DB33 T 594.2-2005 草莓脱毒种苗 第2部分 生产技术规程

21 浙 江 省 地 方 标 准 莓脱毒种苗 第 2 部分：生产技术规程 of : 005布 2006施 浙江省质量技术监督局 发布 2005 I 前 言 草莓脱毒种苗 系列标准分为 2 个部分 ： 第 1 部分：脱毒种苗； 第 2 部分：生产技术规程。 本部分 为 草莓脱毒种苗 系列标准 的第 2 部分。 本部分由浙江省农业厅归口。 本部分起草单位： 浙江大学生物技术研究所。 本部分主要起草人： 毛碧增、娄沂春、李德葆、 孔樟良、 吴建祥 。 2005 1 草莓脱毒种苗 第 2 部分： 生产技术规程 1 范围 本部分规定了草莓脱毒苗生产过程中的培育技术等要求。 本部分适用于通过组织培养技术培育的不 携 带草莓斑驳病毒（ 草莓轻型黄边病毒（ 草莓镶脉病毒（ 草莓皱缩病毒（ 草莓脱毒种苗的生产。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本 部分 的引用而成为本 部分 的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本 部分 ，然而，鼓励根据本 部分 达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分 。 无公害草莓 第 2 部分：生产技术准则 草莓 脱毒种苗 第 1 部分：脱毒种苗 3 脱毒苗培育技术 毒组培瓶苗的培育技术 优良品种选择 选择适宜当地栽培的高产优质品种。 莓脱毒的主要方法 尖组织培养法 植体选择 采样最佳时间为 6 月 8 月份晴天 的 中午，选择无病虫、品种纯正的健壮植株，切取带生长点的匍匐茎段 2 流水冲洗干净。 尖剥离 将表面清洗过的外植 体置于超净工作台上，用 70乙醇表面消毒 1 乙醇，加 汞和1 滴 毒 8 0 不断摇动，然后用无菌水冲洗 5 次 8 次，用无菌滤纸吸干水分。再置于解剖镜下用解剖刀挑取 0.2 .3 茎尖，接种于茎尖诱导培养基中。 养条件 白天温度 25± 2，光照强度 30 60 上温度 18± 2，黑暗培养 。每天照光 12 h 16 h。 织培养快繁 诱导培养至不定芽 1.5 2.0 分株接种于 增殖培养基。 经 病毒检测合格的试管苗在增殖培养基上增殖，增殖培养每 20 d 30 d 继代一次（总继代次数不超过 8 代），选 2 小苗转入生根培养基 进行生根培养 。 脱毒组培瓶苗质量要求按 莓 脱毒种苗 第 1 部分脱毒种苗 执行。 药组织培养法 植体选择 摘取花萼未张开花粉母细胞处一单核期的花蕾，放入 4冰箱中预处理 1 d 2 d。 养过程 取预处理过的花蕾，在超净工作台上用 70 75%乙醇 浸泡 1 用 汞消毒 5 10 不断 摇 动，无菌水冲洗 5 次 10 次，然后去除花萼、花托等，用无菌镊子 夹 取黄色花药接种到愈伤组织诱导培养基中。 伤组织 培养条件 暗培养，培养温度为 25± 2。 组织培养快繁 诱导培养 至 致密愈伤组织 直径 为 0.2 入分化培养基中诱导芽分化，待分化成苗后，进行病毒检测，对合格的试管苗进行增殖， 增殖培养每 20 d 30 继代次数不超过 8代）， 选 2 3 毒组培瓶苗质量要求按 莓 脱毒种苗第 1部分脱毒种苗执行。 毒 原原种苗、脱毒原种苗和脱毒 生产用苗 繁殖 技术 毒原 原 种苗繁殖 打开脱毒瓶苗的瓶盖，常温弱光照条件下驯化 1天 2天后洗净琼脂， 定植 按 照 毒原种苗繁殖 按 照 规定执行。 毒生产用苗繁殖 按 照 规定执行。