其他革兰阴杆菌的常规检验
其他革兰阴性杆菌的常规检验 嗜血杆菌属 嗜肺军团菌属 布鲁菌 百日咳鲍特菌 弯曲菌 幽门螺杆菌 流感嗜血杆菌 G-小杆菌,多形性 有毒菌株形成荚膜 培养基中需加入血液,以提供 X因子和 V 因子( 巧克力色培养基 ) X因子血红素 V因子辅酶 或辅酶 菌落光滑、无色透明、露滴状 CO2培养 “卫星现象” 卫星现象 流感嗜血杆菌与金 黄色葡萄球菌在 血 平板 上共同孵育时, 由于后者能合成较 多的 V因子 ,在金黄 色葡萄球菌菌落周 围生长的流感嗜血 杆菌的菌落较大, 离金黄色葡萄球菌 菌落越远的越小。 根据荚膜抗原分 ABCDEF六型, B型 毒力最强 可产生自溶酶 致病物质:荚膜、菌毛、内毒素、 IgA蛋 白酶 所致疾病 原发感染:脑膜炎、鼻咽炎等,多见于 儿童 继发感染:鼻窦炎等,多见于成人 微生物学检查 标本 (脑脊液、痰、血液、脓液) 涂片染色镜检 分离培养 鉴定试验 结果报告 G-性杆菌 多形性 “卫星现象” 检出流感嗜血杆菌 鉴定依据 革兰阴性小杆菌、多形性 培养采用巧克力色培养基, CO2培养 血平板上有“卫星现象” X、 V因子需求试验 军团菌 是引起军团菌病的病原体 首发于 1976年的美国一次军人聚会,故 称作军团病 1982年 ,在我国南京首次证实了军团菌病。 形态染色 革兰阴性,但不易被着色 杆菌,形态有多形性 Gimenen染色,菌体呈红色,背景为绿 色 不形成芽孢,无荚膜 , 有端生或侧生鞭毛 培养特性 营养要求高 专性需氧 需 2.5 5 CO2 生长缓慢 常用培养基及菌落特征 BCYE培养基:灰白色、圆形光滑湿润菌落 F-G培养基:针尖大小、黄色荧光 军团菌菌落形态 (CYE琼脂培养基 ) 抗原结构 抗原:具有型特异性 军团菌病约 90%的是由嗜肺军团菌所致 , 已发现 15个血清型 ,其中以 Lp1血清型 最常见 , Lp6次之。 抵抗力 分布广泛、抵抗力强 水中存活时间长 军团菌病的主要污染源是供水系统及冷 却塔和空调系统 定期清洗空调 预防军团菌病 临床意义 致病物质:内毒素、外毒素、侵袭性酶 传染途径:呼吸道(吸入含有军团菌的 气溶胶) 所致疾病:军团菌病 肺炎型 非肺炎型(类似感冒) 免疫性:感染者血清中出现特异性 IgG、 IgM抗体 微生物学检查 标本 (痰、支气管分泌物、血液、) 涂片染色镜检 ( Giemsa染色 ) 分离培养 ( BEYE琼脂) 鉴定试验 结果报告 形态染色 菌落特征 氧化酶、触酶 荧光抗体染色等 血清学试验 检测指标:检测患者血清中特异性抗体 方法: ELISA 意义: 检测特异性 IgM:诊断军团菌病 检测特异性 IgG:军团菌病流行病学调查 布鲁菌属 引起布鲁菌病(波状热) 可引起人畜共患病 我国流行菌种主要是羊、牛、猪布鲁菌, 以羊布鲁菌最常见 属细胞被寄生菌 形态染色 革兰阴性球杆菌 光滑型有微荚膜,无芽孢,无鞭毛 常用染色法: 改良 Ziehl-Neelsen染色法:菌体 红色 , 背景为蓝色 柯兹洛夫斯基染色法:菌体 红色 ,背景 绿色 培养特性 专性需氧、 5 10 CO2 营养要求高,常用肝浸液培养基 生长缓慢 菌落细小、无色透明、光滑 生化反应 氧化酶、触酶: 氧化分解葡萄糖 产生硫化氢 抗原构造 菌种 M抗原: A抗原 羊布鲁菌 20: 1 牛布鲁菌 1: 20 猪布鲁菌 1: 2