黄芩中黄芩苷的提取、分离与鉴定DOC

欢迎共阅药学专业综合实验（二）题目：黄苓中黄苓苷的提取、分离与鉴定学院医药学院班级xxxxxxxxxxx姓名xxxxxxxxxxxxxxx学号xxxxxxxxx黄苓中黄苓苷的提取、分离与鉴定黄苓简介：黄苓又名山茶根、黄苓茶、土金茶根；为唇形科植物，以根入药。有清热燥湿， 凉血安胎，解毒等功效。含多种黄酮类化合物，主要为黄苓甙，黄苓素，汉黄苓甙，汉黄苓素，7-甲氧 基黄苓素，7-甲氧基去甲基汉黄苓素，黄苓黄酮I，黄苓黄酮II等。主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目 赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。产于河北、辽宁、陕西、山西、山东、 内蒙古、黑龙江等。一、实验目的1掌握从黄苓中提取、精制黄苓苷的原理、方法及操作要点。2掌握黄苓苷的结构鉴定原理及方法。二、实验原理黄苓苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化.合物，具有一定的脂溶性和弱酸性，提取时/r可以选择一定浓度的乙醇溶液，同时其可在、人S 碱性溶液中溶解，形成钠盐，在提取液中加J J 酸酸化，使黄苓苷游离析出。利用黄苓苷能溶于碱，不溶于酸的性质使之与酸性杂质分离。叫°三、实验材料与仪器材料：黄苓干燥根仪器：旋转蒸发仪离心沉淀机200g摇摆式高速中药粉碎机电子天平真空泵抽滤装置圆底烧瓶水浴锅索氏提取器量筒玻璃棒PH试纸试剂：浓盐酸60%乙醇40%氢氧化钠95%乙醇50%乙醇2mol/l盐酸镁粉二氧化锆 枸橼酸三氧化铝四、实验步骤1、黄苓苷的提取、分离黄苓粗粉100g"加10倍量水煎煮2次，每次1h过滤两次滤液药渣I加浓盐酸调pH至1-2, 80°C水浴保温0.5h，充分结晶，过滤滤加水适量混匀，40%氢氧化钠调pH至6.5-7，加入等体积95%乙醇，过滤滤渣(加浓盐酸调pH至1-2放置4h，抽滤沉淀滤液攵水洗，50%乙醇洗，再用95%乙醇洗或结晶史(粗制黄苓苷)2、黄苓苷的鉴定(1) 盐酸-镁粉反应：取黄苓苷少许置于试管中，以乙醇1ml水浴微温振摇溶解， 加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，观察颜色变化。(2) 锆-枸橼酸反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解， 加数滴5%二氧化锆溶液，振荡后，观察颜色变化；再加2%枸橼酸试剂，观察 颜色变化。(3) 三氧化铝反应:取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解， 加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，观察颜色变化。五、实验结果1. 黄苓苷得率黄苓苷得率(%)=M / M°x100%式中：M 一所得黄苓苷精品重量M。一提取时用黄苓的重量本实验中：M为0.139g，M0为100g，所以收率为0.139%。2. 苓苷鉴定结果°(1) .盐酸-镁粉反应:取黄苓苷少许置于试管中，以乙醇1ml水域微温振摇溶解， 加镁粉适量，滴加浓盐酸数滴，溶液产生樱红色。(2) .锆-枸橼酸反应:取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶解， 加数滴5%二氧化锆溶液，振荡后，显黄色并有黄绿色荧光。再加2%枸橼酸试剂， 黄色和荧光褪去。（3）.三氧化铝反应：取黄苓苷少许置于试管中，加水2ml置水浴上温热至溶 解，加入2%三氧化铝甲醇溶液数滴，溶液产生鲜黄色，在紫外光下显黄绿色荧 光。试剂盐酸-镁粉锆-枸橼酸三氧化铝颜色橙色至微红色黄色和荧光褪去黄色六、结果分析、注意事项1、结果分析：本实验中产率不高，原因可能有：金粗粉未浸泡（或粉末浸泡不完 全）；8静置时间短，沉淀不完全；8调PH时温度控制不好。2、注意事项：8提取过程中为防止黄苓苷的酶解、氧化和减少有效成分被破坏，应控制在一定 温度下进行。8在用酸、碱进行提取纯化黄酮类化合物时，应当注意温度和碱度都不宜过高， 以免破坏黄酮类化合物的母核。酸化时，酸度也不宜过高，否则酸会与黄酮类化 合物生成盐而溶解。8在选择乙醇溶液做提取剂时要注意提取溶液的溶度。浓度在（50%70%）的乙醇水溶液其极性与黄苓苷的极性相近，便于其溶出。低浓 度（40%及以下）的乙醇极性较大，杂质的溶出量大大增加，高浓度（90%及以上） 的乙醇溶液极性较小，主要用于药材中的挥发油、叶绿素、树脂等的溶出。七、思考题1、黄苓苷提取过程中为什么要控制温度和调节PH?答：（1）温度的控制：黄苓苷在一定温度和湿度下能酶水解成黄苓素及葡萄 糖醛酸。黄苓素分子中具有邻三酚羟基，在空气中易氧化成醍式结构显绿色。以 防提取过程中黄苓苷的酶解、氧化和有效成分被破坏。（2）PH的调节：在提取纯化黄酮类化合物时，碱度过高，会破坏黄酮类化合 物的母核；酸度过高，会使酸与黄酮类化合物生成盐而溶解。因此在黄苓苷的提取过程中要控制温度和调节PH。2、为什么要选用一定浓度的乙醇溶液作为提取液？答：黄苓苷在黄苓中以羧酸盐存在，可以被溶剂溶出，传统的提取方法以水做提 取剂，但黄苓苷只能微溶于热水，而且在水煎煮的过程中引入了大量的水溶性杂 质。黄苓苷为一连有葡萄糖醛酸结构的黄酮化合物，具有一定的脂溶性，所以在 提取时可以选择一定浓度的乙醇溶液作为提取液，大大增加它的溶出率，并且抑 制象鞣质、蛋白、粘液等高分子杂质的溶出，便于过滤纯化。浓度（50%70%） 的乙醇水溶液其极性与黄苓苷的极性相近，便于其溶出。低浓度（40%及以下）的乙醇极性较大，杂质的溶出量大大增加，高浓度（90% 及以上）的乙醇溶液极性较小，主要用于药材中的挥发油、叶绿素、树脂等的溶 出。因此，本实验采用了 60%的乙醇溶液作为提取溶剂。