弯曲菌属和螺杆菌属课件

弯曲菌属和螺杆菌属弯曲菌属和螺杆菌属（Campylobacter and Helicobacter）分类分类新伯杰分类：薄壁菌门，群新伯杰分类：薄壁菌门，群2（需氧（需氧/微需氧，有动微需氧，有动力，螺型力，螺型/类弧形革兰阴性细菌）类弧形革兰阴性细菌）弯曲杆菌属（弯曲杆菌属（Campylobacter）空肠弯曲菌（空肠弯曲菌（C.jejuni）三个亚种：三个亚种：C.jejuni subsp.jejuni(major human enteric pathogen worldwide,characterized susequantly)C.jejuni subsp.doylei C.jejuni subsp.fetus-continued大肠弯曲菌（大肠弯曲菌（C.coli）胎儿弯曲菌（胎儿弯曲菌（C.fetus）C.fetus subsp.fetus(major veterinary pathogen)C.fetus subsp.venerealis(Infrequent septicemia)螺杆菌菌属（螺杆菌菌属（Helicobacter）幽门螺杆菌（幽门螺杆菌（H.pylori）H.cinaedi and H.fennelliae16SrRNA分型：分型：Campylobacter,Helicobacter,Wolinella,Arcobacter and Flexispira 属于一个完全不同于一般革兰阴性杆菌属于一个完全不同于一般革兰阴性杆菌的系统发生群的系统发生群传统分型：传统分型：C.jejuni:弯曲菌病;格林-巴力综合症（Guillain-Barre syndrome,GBS）C.fetus ssp.fetus:H.pylori:重要性重要性：培养基：培养基：肠道标本（主要分离肠道标本（主要分离C.jejuni ssp.）弯曲菌选择培养基（弯曲菌选择培养基（Campy-BAP）组成：组成：Brucella agar 含亚硫酸钠含亚硫酸钠10%羊血羊血抗生素抗生素:Vancomycin甲氧卞氨黄胺嘧啶（甲氧卞氨黄胺嘧啶（Trimethojprim）多粘菌素（多粘菌素（polymyxin B）头孢噻吩（头孢噻吩（cephalothin）二性霉素二性霉素B弯曲菌属（弯曲菌属（Campylobacter）生长特性生长特性：环境环境微需氧菌，微需氧菌，capnophilic，氧浓度范围：氧浓度范围：5 10%（v/v）最佳气体环境：氧：最佳气体环境：氧：5 10%；CO2:10%；氮气：氮气：85%实验室设备：实验室设备：专门专门CO2 孵箱；烛缸孵箱；烛缸Butzler Medium:Skirrow Medium:非肠道标本（主要分离非肠道标本（主要分离C.fetus）血液标本血液标本生长温度：生长温度：C.jejuni,C.coli:themophlic,最适生长温度最适生长温度42430，比比370C生长好生长好。250C不生长。不生长。C.fetus最适生长温度最适生长温度370C，比比250C 生长好生长好,420C不生长不生长染色染色：细、螺旋型，弯曲杆状，可见细、螺旋型，弯曲杆状，可见“gull-winged”；陈旧培养物中可呈球状。陈旧培养物中可呈球状。暗视野显微镜特征暗视野显微镜特征：快速飞镖式或螺旋式运动：快速飞镖式或螺旋式运动菌落形态菌落形态：两种菌落形态：两种菌落形态A.singled B.connected氧化酶、触酶阳性；部分解糖类氧化酶、触酶阳性；部分解糖类 初步鉴定：初步鉴定：细胞形态，菌落形态细胞形态，菌落形态氧化酶氧化酶+420C生长生长相差显微镜：快速飞镖式或螺旋式运动相差显微镜：快速飞镖式或螺旋式运动 种间鉴定：种间鉴定：C.jejuniC.coliC.fetus马尿酸马尿酸 +-+醋酸吲哚醋酸吲哚 +-生长温度生长温度42 +-25 -+实验室鉴定：实验室鉴定：红霉素为严重或复杂的肠炎首选；阿齐霉素近红霉素为严重或复杂的肠炎首选；阿齐霉素近来临床实验表明较好疗效；来临床实验表明较好疗效；对氨基糖甙类、大环内酯类较敏感；氯霉素、对氨基糖甙类、大环内酯类较敏感；氯霉素、四环素也敏感；对黄胺、多数头孢菌素类天然耐药；四环素也敏感；对黄胺、多数头孢菌素类天然耐药；对氟奎酮类曾经高度敏感，但对氟奎酮类曾经高度敏感，但80年代中期开始年代中期开始出现耐药出现耐药-continued敏感性：敏感性：C.jejun C.coliC.fetus 萘啶酸萘啶酸 S S R头孢噻吩头孢噻吩 R R S药物敏感性药物敏感性培养基：营养要求较高，须加入血液或血清；培养基：营养要求较高，须加入血液或血清；常用培养基：常用培养基：环境环境微需氧，对气体要求同弯曲菌属。微需氧，对气体要求同弯曲菌属。最适生长温度：最适生长温度：370C；250C、420C不生长不生长适度要求高适度要求高生长缓慢生长缓慢螺杆菌属（螺杆菌属（H.pylori）生长特性：生长特性：染色染色除具弯曲菌属形态，常可见直杆菌除具弯曲菌属形态，常可见直杆菌丛单端鞭毛丛单端鞭毛螺旋式运动螺旋式运动菌落形态：菌落形态：直接检查（非培养）直接检查（非培养）显微镜检查显微镜检查研磨活检组织相差显微镜：螺旋状活泼运动研磨活检组织相差显微镜：螺旋状活泼运动染色镜检：染色镜检：gram,银染银染，姬姆萨姬姆萨，美兰，美兰免疫组化：免疫组化：快速尿酶实验：快速尿酶实验：CLO-test ,二氧化碳呼吸实验二氧化碳呼吸实验PCR血清学：血清学：IgG,slow decline of antibody after eradication实验室检验实验室检验：培养法培养法（不敏感）（不敏感）不分解糖类，高尿酶、触酶活性不分解糖类，高尿酶、触酶活性初步鉴定：初步鉴定：染色，菌落染色，菌落生长温度：生长温度：氧化酶：氧化酶：+尿酶：尿酶：+萘定酸：萘定酸：R ;头孢噻吩头孢噻吩:S种间鉴定种间鉴定:马尿酸，马尿酸，硝酸盐，硝酸盐，氨基酸胺肽酶等氨基酸胺肽酶等药物敏感性：药物敏感性：抗生素：抗生素：铋剂：铋剂：Gram-negative,very slender,curved rods,which can be S,seagull or spiral shaped.Very slender,curved rods,which can be S,seagull or spiral shaped.In older cultures the cells become coccoid.Very slender,curved rods,which can be S,seagull or spiral shaped.They have a characteristic corkscrew-like darting(to and fro)motility.Colonies are flat,droplet-like,glistening and tend to spread along the direction of the steak on moist agar.;small colony,translucent,round,litter convex;The colonies have a very characteristic odour.broth culture of H.pylori ATCC 43504(A)，atypicala plate culture of H.pylori ATCC 43579(B),classic morphologyA silver stain(Warthin Starry)of HP(black wiggly things)on gastric mucus-secreting epithelial cells(x1000).This picture is notorious because it is of Dr.Marshalls stomach biopsy taken 8 days after he drank a culture of H.pylori.The experiment was published in 1985(Marshall BJ,Armstrong JA,McGechie DB,Glancy RJ.Attempt to fulfill Kochs postulates for pyloric Campylobacter.Med J Aust 1985;142:436-439).This is a 3 day culture of HP on blood agarSpecimen:biopsyAdvantage:specific,cheapDisadvantage:high false negative after antibiotic treatment.