广西地方标准《病死猪无害化处理堆肥技术操作规程》（征求意见稿）

41 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 5/T 2017 病死猪无害化处理堆肥技术操作规程 of by 征求意见稿） 2017 - 布 施 广西壮族自治区质量技术监督局 发布 2017 I 目 次 前言 . 范围 . 1 2 术语和定义 . 1 3 病死猪无害化堆肥技术前期准备 . 1 4 堆肥工艺 . 1 5 堆肥时间控制 . 2 6 无害化判定 . 2 7 注意事项 . 2 附录 A . 3 附录 B（规范性附录） 菌株及培养基要求 . 4 附录 C . 5 2017 前 言 本标准按照 2009给出的规则起草。 本标准由广西壮族自治区水产畜牧兽医局提出。 本标准起草单位：广西壮族自治区动物疫病预防控制中心、广西农垦永新畜牧集团良圻原种猪场、贺州市动物疫病预防控制中心、南宁市武鸣区动物疫病预防控制中心、河池市动物疫病预防控制中心、桂林市动物疫病预防控制中心、广西壮族自治区兽医研究所。 本标准主要起草人：熊 毅、伍少钦、颜健华、冯淑萍、李军、郭建刚、胡巧云、何奇松、胡丽萍、 张浩、于俊勇、王孝德、凌丹、韦建华、韦达有、杨威、彭昊、陈泽祥 。 2017 1 病死猪无害化处理堆肥技术操作规程 1 范围 本标准规定了病死猪无害化处理的堆肥前期准备、堆肥过程中影响因素控制、无害化判定。 本标准适用于病死猪无害化堆肥处理。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 病死猪 指饲养在养殖场（户）内因病原微生物或不明原因引起发病而导致的 淘汰猪或 死亡猪。 无害化处理 指将养殖废弃物（病 死猪等 ）内生物性有害物质杀灭或降解成无害物质、消除其危害的一种技术。 3 病死猪无害化堆肥技术前期准备 肥地点选择 肥地点 要求地形平坦，地势稍高，利于排水， 距离居民区、生活饮用水源地、公路及铁路等主要交通干线 1000m 以上，距离养殖区 500应位于居民区和公共建筑群常年主导风向的下风向。 肥房要求 肥房选址 堆肥房 选址 应符合动物防疫条件要求，应建在相对独立的隔离地方，净、污通道分离，进 、 出口分开并安装有消毒装置，场面硬化、平滑易于清洁消毒。 肥房要求 堆肥间建于防雨棚内，棚屋檐高应不少于 风良好。堆肥间应不少于 4间，每间长、宽、高分别为 U”型布局，即三面围墙，一面开口，场面和墙面用水泥砂浆硬化。 肥原料准备 堆肥主料为甘蔗渣或木屑，辅料可选择畜禽粪便、氮肥、豆渣、微生物菌剂等。 4 堆肥工艺 2017 地面上铺一层甘蔗渣或木屑做主料，厚约 20 料上放置病死猪，对死亡的基础公母猪和育肥大猪，应预先进行碎尸处理后再堆放（离墙壁 20 大猪尸体、尸块每个间隔 15 猪尸体、尸块上铺一层 2025度为 60%的甘蔗渣或木屑，甘蔗渣或木屑中可添加一定量的辅料。以此类推，层层堆放，可堆放到 ，最后一层甘蔗渣或木屑厚度为 3040自然通气状态下进行发酵。 专用温度计测定堆体 4080120温度，必须保证堆体内物料的温度要达到 55以上、并持续 10d 以上。 5 堆肥时间控制 期堆肥 经过 60d 90d，堆肥温度下降 45以下，首次热循环结束。此时病死猪尸体基本被化制，但降解还不够完全。 期堆肥 温度下降后将一期堆肥所有的残余物转移到另一个空的堆肥房，确保所有的残余物都被覆盖。二期堆制过程需要 60d 90d，经过 60d 90d，温度再次下降至 45以下，结束 堆肥 。 6 无害化判定 以大肠杆菌 109径 50 密封于含培养基的 2别置于堆肥的上、中、下层，堆肥期到期的前一周取出进行细菌分离培养，符合总大肠菌数量小于 1000 无害化合格的化尸堆可以用于农作物施肥，也可以与新的甘蔗渣或木屑混合作为下一次堆肥处理中的碳基础层。 7 注意事项 肥过程中注意水分控制。堆肥的起始含水率一般为 50% 65%，含水量不足，影响发酵速度，补入适量水分。过于潮湿，即用手挤压时有水分流出，则添加更多甘蔗渣或木屑。 重 大动物疫病及人畜共患病死亡的病死猪尸体不得使用此种方式进行处理。 酵过程中，应做好防雨措施。 2017 3 附 录 A （资料性附录） 实验室仪器设备配置 要仪器设备 恒温摇床； 电热恒温培养箱。 验工具 水份 测定仪； 专用温度计； 移液器； 三角取样器； 平板； 接种环； 酒精灯； 10µL、 200µ； 天平； 50 2017 附 录 B （规范性附录） 菌株及培养基要求 肠杆菌 0157:株转基因抗萘啶酮酸 的大肠杆菌 0157:7)菌株，均为实验室保存菌株，由广西壮族自治区动物疫病预防控制中心提供。 品及培养基 萘啶酮酸； 大肠杆菌 即磷酸盐缓冲液； 温 80的 即胰蛋白胨培养基； 即麦康凯琼脂培养基； 即补充了 头孢克肟 ,亚碲酸钾， 50萘啶酮酸的山梨醇麦康凯培养基； ，即补充了 20新生霉素， 胆汁盐 ,磷酸二甲盐的 以上培养基按照生产厂家说明书进行配制，并按上述要求加入特殊物质。 2017 5 附 录 C （规范性附录） 大肠杆菌 7的接种和总大肠菌的检测 肠杆菌的接种 将三株抗萘啶酮酸的 7(7)菌株接种于 100 g/于 37培养 6h，随后将三份培养液等体积混合 ,以备接种猪肉样品，所用猪肉样品经实验确定没有抗萘啶 酮酸的 7菌株存在，接种浓度约达 109 品的采集 用三角形取样器采集样品进行总大肠菌检测。堆肥样品在采集后即冰上保存 ,并于 6 7 的检测 采用平板计数法 ,将样品用 冲液 10 倍梯度稀释 ,并涂在 板培养基上 ,37过夜培养后计数 ,每个样品两个重复。每个平板上最多 3 个单克隆菌株。当平板计数检测不到 7时 ,2 个重复的 1g 样品被加入到 9 养基中 ,于 37富集 6h,并将富集液用 大 肠杆菌 疫磁珠分离检测试剂盒 检测 ,最终确定 7 菌株是否存在。 大肠杆菌的检测 将 28温 80的 做 10倍梯度稀释，随后涂于麦康凯平板培养基上 ,于 37过夜培养后计数。 _