基因操作中大分子的分离和分析优秀课件

基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件一、大肠杆菌质粒DNA的分离和纯化基因操作中大分子的分离和分析优秀课件1. 碱裂解法提取E.coli质粒DNA基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件质粒提取基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件操作步骤基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件2. 通过试剂盒分离纯化E.coli质粒DNA基因操作中大分子的分离和分析优秀课件二、电泳检测基因操作中大分子的分离和分析优秀课件（一）DNA的琼脂糖凝胶电泳基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围基因操作中大分子的分离和分析优秀课件核酸构型与琼脂糖凝胶电泳分离的关系 基因操作中大分子的分离和分析优秀课件影响迁移率的因素基因操作中大分子的分离和分析优秀课件常用染料基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件pGFP pBSK M基因操作中大分子的分离和分析优秀课件（二）聚丙烯酰胺电泳基因操作中大分子的分离和分析优秀课件（三）脉冲场凝胶电泳基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件三、DNA片段的纯化基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件一、控制潜在的 RNA 酶的活性基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件二、RNA的抽提和纯化基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件三、mRNA的纯化基因操作中大分子的分离和分析优秀课件四、RNA的电泳检测基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件Total RNA基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件一、Southern杂交RNA DNA DNA 基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件二、Northern杂交RNA 基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件三、Western杂交蛋白质基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件四、其他分子杂交基因操作中大分子的分离和分析优秀课件涂布基因组文库或cDNA文库克隆LB+AP37过夜0.5-1mm影印NCFLB+AP37至0.5-1mmAprCmr扩增质粒(不必要）NCF涂菌Apr培养保存平板待用基因操作中大分子的分离和分析优秀课件 a 细胞培养（高密度，几百细胞培养（高密度，几百十万个菌落或低密度，几百十万个菌落或低密度，几百个以下）个以下） b 细菌细胞原位裂解与细菌细胞原位裂解与DNA变性变性 ii. 原位噬菌斑杂交样品膜原位噬菌斑杂交样品膜 a 细胞感染和噬菌斑形成（细胞感染和噬菌斑形成（10,000-20,000/平板）平板） b 噬菌体转移噬菌体转移用用NCF作影印作影印 c DNA变性与固定（与上同）变性与固定（与上同）I II III IV55510% SDS0.5N NaOH1M Tris pH7.4 1.5M NaCl+0.5M Tris pH7.480真空干燥基因操作中大分子的分离和分析优秀课件NCF滤纸点样板支撑板至真空泵废液储槽96孔128基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件五、探针的标记基因操作中大分子的分离和分析优秀课件* * * * * *变性5 33 5基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件5 3 3 5 TdT-dCTP32P5 3CCCC * CCCC 3 5 * 5 3 3 5 Klenow片段-dNTP32P5 3 3 5 基因操作中大分子的分离和分析优秀课件基因操作中大分子的分离和分析优秀课件