《董稚明食管鳞癌tgfβ受体基因启动子区甲基化状态研究学习教案》由会员分享，可在线阅读，更多相关《董稚明食管鳞癌tgfβ受体基因启动子区甲基化状态研究学习教案（25页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、会计学1董稚明食管鳞癌董稚明食管鳞癌tgf受体基因启动子区甲受体基因启动子区甲基化状态研究基化状态研究第一页，编辑于星期三：点 三十七分。食 管 癌我国是世界上食管癌发病率和死亡率最高的国家缺乏有效的早期诊断指标，就诊病人失去了最佳治疗时机95%以上食管癌为食管鳞状细胞癌（ESCC)冀医四院第1页/共25页第二页，编辑于星期三：点 三十七分。并非所有暴露个体均患病 环境因素与遗传因素共同作用食管癌遗传因素和表观遗传因素亚硝胺类化合物吸烟、饮酒营养缺乏霉菌感染冀医四院第2页/共25页第三页，编辑于星期三：点 三十七分。传统的多途径多步骤的基因突变引起肿瘤的观点日益受到挑战，目前众多的研究者认为，
2、肿瘤最早的发生可能源于干细胞阶段的表观遗传学改变，表观遗传学的改变可能发生的更早些。RNA干扰 表观遗传学DNA甲基化组蛋白修饰染色体重塑冀医四院第3页/共25页第四页，编辑于星期三：点 三十七分。DNA 甲基化是在DNA甲基转移酶的作用下,以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体,将甲基基团转移到胞嘧啶第5位碳原子上,从而转变成5-甲基胞嘧啶（5-mC）。基因启动子区域的CpG 岛正常状态下不发生甲基化，一旦由于某种原因而发生甲基化就会导致基因转录沉寂，使重要基因如抑癌基因、修复基因等丧失功能，有可能导致肿瘤发生。冀医四院第4页/共25页第五页，编辑于星期三：点 三十七分。冀医四院第5页/共25页第六页
3、，编辑于星期三：点 三十七分。 头颈部鳞癌、胃癌及胰腺癌细胞株中TR基因甲基化与其表达降低有关。 对非小细胞肺癌、前列腺癌的研究显示，TR基因的表达缺失与其甲基化之间存在高度相关性。 小细胞肺癌中TR和表达缺失与基因甲基化无关。冀医四院第6页/共25页第七页，编辑于星期三：点 三十七分。冀医四院第7页/共25页第八页，编辑于星期三：点 三十七分。65例贲门癌组织、59例相应癌旁组织性别：男性51例，女性14例TNM分期：、期37例，、期28例 病理分级：高、中分化组55例，低分化组10例 年龄：范围在26-74岁，中位年龄岁冀医四院第8页/共25页第九页，编辑于星期三：点 三十七分。 基因Cp
4、G 状态 引物序列（53）退火温度()产物大小(bp) TR UCAACCCTCCAAAACTAACAACTAAACAA 60 147TGTTGGTTTTTGGTTATGTTTTATGTTTTTT MACCCTCCGAAACTAACGACTAAACGA 52 142CGGTTTTTGGTTACGTTTTACGTTTTT TR UTTGAAAGTTGGTTAAAGTTTTTGGA 55 123AAACAAAACCTCTCTCCACCCA MGAAAGTCGGTTAAAGTTTTCGGAACAAAACCTCTCTCCGCCCG 53119冀医四院TR和TR基因MSP引物第9页/共25页第十页，编辑
5、于星期三：点 三十七分。 case 1 case 2 case 3冀医四院 TR TR case 1 case 2 case 3第10页/共25页第十一页，编辑于星期三：点 三十七分。UnmethylatedMethylated原始序列： GGGGAGCGTGGGGCGTGGCCAGAAACCGG 非甲基化序列：AAAAAACATAAAACATAACCAAAAACCAA甲基化序列： AAAAAACGTAAAACGTAACCAAAAACCGA冀医四院UnmethylatedTRMethylatedTR原始序列： TCGGGCGGAGAGAGGTCCTGC非甲基化序列：TTGGGTGGAGAGAG
6、GTTTTGT甲基化序列： TCGGGCGGAGAGAGGTTTTGT第11页/共25页第十二页，编辑于星期三：点 三十七分。GeneMethylation ratio 2 Ptumor tissueadjacent non-cancerous tissueTR52.3%（34/65）40.7%(24/59) 1.6800.195TR70.8%(46/65)47.5%(28/59) 6.984 0.008冀医四院第12页/共25页第十三页，编辑于星期三：点 三十七分。Group TR TRNMU2PMU2PESCC6534314619Age6037172028960281711 1.3930.
7、2381810 1.0000.317GenderMale5126253516Female1486 0.1670.683113 0.1540.694Clinical stage+3721162710+281315 0.6820.409199 0.2020.653Differential degreeWell - moderately5530254015Poorly1046 0.2530.61564 0.1900.663冀医四院第13页/共25页第十四页，编辑于星期三：点 三十七分。Group TR and geneSimultaneousmethylationNon-simultaneousme
8、thylation2Ptumor tissue31(47.7%)343.8210.051Non-cancerous tissue18(30.5%)41冀医四院第14页/共25页第十五页，编辑于星期三：点 三十七分。Group TR and gene SimultaneousmethylationNon-simultaneousmethylation2PDifferential degreeWell -moderately28270.7630.382Poorly37Clinical stage+19180.4610.497+1216冀医四院第15页/共25页第十六页，编辑于星期三：点 三十七分。
9、冀医四院第16页/共25页第十七页，编辑于星期三：点 三十七分。 基因 引物序列（53）退火温度 ()产物大小 (bp) TR GGAGAAGAAGTTGCTGTTAAG 57 419 ATGGTATCTGTGGCTGAATC TR CAACATCAACCACAACACAGAG 54 248 CCGTCTTCCGCTCCTCAG GAPDH GGGAAACTGTGGCGTGAT 60 342 GTGGTCGTTGAGGGCAATTR和TR基因 RT-PCR引物冀医四院第17页/共25页第十八页，编辑于星期三：点 三十七分。 RT-PCR analysis of TR ma:100bp DNA
10、marker; 1,3,5,6: positive mRNA expression; 2,4: negative mRNA expression冀医四院 RT-PCR analysis of TR ma:100bp DNA marker; 1,3,5,6: positive mRNA expression; 2,4: negative mRNA expression第18页/共25页第十九页，编辑于星期三：点 三十七分。GeneTumor tissueadjacent non-cancerous tissuetPTR0.770.170.990.31-3.3930.001TR0.890.301.
11、100.29-2.3580.022冀医四院第19页/共25页第二十页，编辑于星期三：点 三十七分。GeneESCCtPMethylatedUnmethylatedTR0.740.180.810.15-1.2870.206TR0.860.330.950.20-0.9220.362冀医四院第20页/共25页第二十一页，编辑于星期三：点 三十七分。 本研究结果显示食管鳞癌组织中TR的甲基化率高于癌旁组织，其mRNA的表达量也明显低于癌旁组织，但是发生甲基化的癌组织与未发生甲基化的癌组织相比，其mRNA表达虽然降低，但却无统计学差异。 冀医四院第21页/共25页第二十二页，编辑于星期三：点 三十七分。
12、部分肿瘤组织可能由于基因启动子区甲基化程度不足以抑制转录而导致了发生甲基化的组织其mRNA表达仍可为阳性。 1除了甲基化外，可能还有其他使该基因表达下调的遗传学和表观遗传学改变，如基因突变、组蛋白乙酰化等。2第22页/共25页第二十三页，编辑于星期三：点 三十七分。结 论结 论 TR基因mRNA表达异常可能与食管鳞癌的发生有关,但其甲基化可能在食管鳞癌的发生发展中不起主要作用。 TR基因的甲基化和蛋白表达异常可能与食管鳞癌的发生有关，但其甲基化有可能不是导致其蛋白表达异常的主要原因。冀医四院第23页/共25页第二十四页，编辑于星期三：点 三十七分。第24页/共25页第二十五页，编辑于星期三：点 三十七分。
董稚明食管鳞癌tgfβ受体基因启动子区甲基化状态研究学习教案
