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1、会计学1白血病微小残留病灶白血病微小残留病灶 Complete remission (CR) must be attained to cure patient CR defined as: Clearance of peripheral blood & bone marrow of leukemic blasts Reconstitution of normal hematopoiesis Resolution of leukemic infiltratesRemissionInductionPost-remission TherapyConsolidationChemotherapySCT第
2、1页/共62页第2页/共62页Acute leukemia and CML Concept of minimal residual disease (MRD)10121010106Cell numberTimeMorphological detection limitPCR detection limitI第3页/共62页第4页/共62页第5页/共62页第6页/共62页第7页/共62页第8页/共62页第9页/共62页第10页/共62页第11页/共62页第12页/共62页第13页/共62页第14页/共62页第15页/共62页第16页/共62页nMCR90%-99%nMDR检测结果决定后续治疗选择
3、第17页/共62页巩固治疗结束后巩固治疗结束后MRDMRD状态与复发的关系状态与复发的关系RT-PCR （+） RT-PCR （-） PN 7 693yr Relapse 57% 27% 0.006第18页/共62页2323例例MRDMRD持续阳性患者挽救性治疗的结果持续阳性患者挽救性治疗的结果病例数治疗时相治疗方法结果(m)3MRDCT+ABMT3 in CCR(64,96,98) 4MRDallo-BMT4 in CCR(64,92,98,118)9血液学复发CT9 died of the disease5血液学复发CT+allo-SCT 3 died; 2 in CCR(62,74)2血
4、液学复发CT+ASCT2 died of the disease结论结论:MRD:MRD持续阳性者宜尽早移植持续阳性者宜尽早移植第19页/共62页第20页/共62页第21页/共62页第22页/共62页第23页/共62页分子生物学异常第24页/共62页慢粒白血病的分子生物学检测意义第25页/共62页BCR-ABL转录本上升预示疾病复发供体淋巴细胞回输供体淋巴细胞回输Ph染色体转阴染色体转阴第26页/共62页第27页/共62页* 获得主要分子生物学治疗反应时BCR-ABL转录本绝对数量实验室 标准化基线 Adelaide 80% 0.08% London 45%0.045% Seattle 15%
5、0.015%MMR 数值*第28页/共62页% 无疾病进展0102030405060708090100随机分组后时间（月）0369 12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 45 48 51获得完全细胞遗传学治疗反应n=138 下降=3对数级n=136 98%90%75%第29页/共62页第30页/共62页第31页/共62页第32页/共62页缓解后任何时间点MRD转录本数与诊断时比值病例数n复发数nP .001 /=1%1110第33页/共62页第34页/共62页随访期监测MRD复发持续缓解持续升高80无明显升高趋势7127P101010101001234H091399
6、007CD 15 FITCH -101010101001234HAE1887-98.007cd 15 FITC -101010101001234H228798007CD 15 FITCH -CD34 PECD15 FITCMRD (1)MRD (2)2m after auto-SCT3m after auto-SCT0.24%0.11%0.07%0%15+/34+/33+第37页/共62页101010101001234H 2310-02.004CD15 FITC -101010101001234H 3940-01.004CD15 FITC -101010101001234H 2809-01.0
7、04CD15 FITC -CD34 PECD15 FITCMRD (1)MRD (3)0.11%3.2%0.24%7m after auto-SCT15+/34+/33+第38页/共62页101010101001234H 3627-01.004CD34 FITC -101010101001234H 2874-01.004CD34 FITC -101010101001234H 0262-02.004CD34 FITC -101010101001234H 0507-02.004CD34 FITC -CD56 PECD34 FITCMRD (1)MRD (3)3m after allo-SCT4m
8、after allo-SCT0.3%0.7%0.6%0%34+/56+/DR-第39页/共62页第40页/共62页第41页/共62页第42页/共62页第43页/共62页MRD水平累计复发率P值FCM0.1%67%/=0.1%21%QRT-PCR10-375%/= 10-321%第44页/共62页第45页/共62页第46页/共62页第47页/共62页第48页/共62页第49页/共62页第50页/共62页MRD定量病例数n中位RFS(m)低水平组/=0.05%4416P=0.001第51页/共62页IgH TCRTCRTCR B-ALL 95%54% 55%33%T-ALL14% 68%91%89
9、%第52页/共62页第53页/共62页MRD detected by Ig H showed significant correlation with disease free survivalOnly 77% had suitable fingerprinting markerTedious with need for sequencing in significant number of patients第54页/共62页第55页/共62页第56页/共62页MethodsSuitable cases (%)SensitivityFISH25-35?Ploidy determination5-25?PCR on translocation breakpoints10-3010-4-10-6PCR on TCR genes40-6010-3-10-6PCR on IgH genes7010-3-10-6Colony assay?Immunophenotyping35%10-4第57页/共62页第58页/共62页第59页/共62页第60页/共62页第61页/共62页
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