《地中海贫血的分子基础和产前诊断徐湘民PPT学习教案》由会员分享，可在线阅读，更多相关《地中海贫血的分子基础和产前诊断徐湘民PPT学习教案（77页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、会计学1地中海贫血的分子基础和产前诊断徐湘地中海贫血的分子基础和产前诊断徐湘民民 异常血红蛋白 地中海贫血 (地贫) 遗传性持续性胎儿血红蛋白 Hereditary persistence of fetal hemoglobin(HPFH)第1页/共77页l 全球每年约有790万出生缺陷患儿出生l 5中常见的疾病占7000种出生缺陷的25%l 血红蛋白病的发病率位于第三位204060801001200第2页/共77页中国南方高发地区人群携带率3%-24%第3页/共77页第4页/共77页第5页/共77页第6页/共77页第7页/共77页珠海珠海 3140韶关韶关 3444广州广州 2604汕头汕头
2、 1049湛江湛江 3160 第8页/共77页正常人群正常人群%11种突变种突变12种突变种突变 第9页/共77页防城港市防城港市 224百色市百色市 834柳州市柳州市 790贺州市贺州市 1033玉林市玉林市 1349南宁市南宁市 1559 第10页/共77页正常人群正常人群75.86%17.55% -地地贫贫正常人群正常人群%9种突变种突变13种突变种突变第11页/共77页第12页/共77页第13页/共77页 常染色体隐性遗传病 致病基因： 突变纯合子： 病理学基础：第14页/共77页 -地中海贫血地中海贫血临床综合征临床综合征 正常正常 正常正常 -地中海贫血特征地中海贫血特征 -地中
3、海贫血特征地中海贫血特征Hb H Hb H 病病 中间型中间型 -地中海贫血地中海贫血 BartBarts s胎儿水肿综合征胎儿水肿综合征 重型重型 - -地中海贫血地中海贫血 -地中海贫血地中海贫血临床综合征临床综合征 第15页/共77页小细胞低色素性溶血型贫血 (中、重度)黄疸肝脾肿大 (脾大明显)骨髓扩增发育迟缓合并感染Barts 水肿胎(地贫,宫内或出生后半小时内死亡)第16页/共77页第17页/共77页 RBC 参数 MCV MCH 细胞形态变化 Hb 成分分析 Hb A2 () 或 () Hb Barts Hb H () Hb E () 第18页/共77页1 2 3 4 5Norm
4、al AA2 AE Barts AF HA+ +- -500V, 25min1. 正常人正常人Hb2. 轻型轻型 地贫地贫 3. 异常异常Hb E杂合子杂合子4. 新生儿新生儿Hb Barts ( 4, 地贫标准型）地贫标准型）5. Hb H第19页/共77页 轻度黄疸 肝脾肿大(脾大明显) 骨髓扩增 合并感染不需进行常规输血治疗血红蛋白水平维持在60-100g/L水平 发病年龄在2岁以后, 或成年期发病第20页/共77页 轻度黄疸 肝脾肿大 (脾大明显) 骨髓扩增 合并感染不需进行常规输血治疗血红蛋白水平维持在血红蛋白水平维持在60-100g/L水平水平发病年龄在发病年龄在2岁以后岁以后,
5、或成年期发病或成年期发病 第21页/共77页第22页/共77页l 重症地贫患儿的出生是世界公认的公共卫生问题重症地贫患儿的出生是世界公认的公共卫生问题l 通过产前诊断阻止重症患儿出生是首选预防措施通过产前诊断阻止重症患儿出生是首选预防措施l WHO优先推荐在发展中国家实施预防的遗传性疾病优先推荐在发展中国家实施预防的遗传性疾病l 预防地贫是中国南方高发区减少出生缺陷的战略需求预防地贫是中国南方高发区减少出生缺陷的战略需求 第23页/共77页第24页/共77页第25页/共77页 -珠蛋白基因缺失珠蛋白基因缺失 中间型地贫中间型地贫: 复杂变异复杂变异 -珠蛋白基因点突变珠蛋白基因点突变 第26页
6、/共77页 中间型地贫:复杂变异 -珠蛋白基因点突变珠蛋白基因点突变 第27页/共77页 第28页/共77页 2 1 2 1 3HVRinterHVR53第29页/共77页CD59 IVS IIVS II UTRUTR53CD13CD31CD125 CD122 CD142 CD4445CD49CD30CD78 CD74 CD118 EXON IIEXON I EXON III 第30页/共77页第31页/共77页 / /3.7 /4.2 WS/ CS/ QS/ SEA/ THAI/ / /3.7 /4.2 WS/ CS/ QS/ SEA/ THAI/ 第32页/共77页 -珠蛋白基因珠蛋白基因
7、缺失缺失 中间型地贫:复杂变异 -珠蛋白基因点突变珠蛋白基因点突变 第33页/共77页 -珠蛋白基因缺失 中间型地贫:复杂变异 第34页/共77页 第35页/共77页第36页/共77页 第37页/共77页 -珠蛋白基因缺失珠蛋白基因缺失 中间型地贫:复杂变异 -珠蛋白基因点突变珠蛋白基因点突变 第38页/共77页 -珠蛋白基因缺失珠蛋白基因缺失 -珠蛋白基因点突变珠蛋白基因点突变 第39页/共77页 人群携带者筛查发现高风险家庭人群携带者筛查发现高风险家庭 基于基于DNA分析的胎儿基因型分析的胎儿基因型诊断诊断 胎儿取样胎儿取样 家系分析家系分析第40页/共77页 基于基于DNA分析的胎儿基因
8、型诊断分析的胎儿基因型诊断 胎儿取样胎儿取样 家系分析家系分析第41页/共77页 全血细胞计数全血细胞计数 MCV (80fL) MCH ( 5% 第51页/共77页第52页/共77页l -地贫:基因分析技术l -地贫:基因分析技术 Reverse Dot Blot （RDB）: 反向点杂交 probe melting curve-based genotyping assay （PMCA）: 基于探针熔解曲线的基因分型 Gap-PCR : 缺口缺口PCR Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification （MLPA）: 多重连接探针扩增多重连接探
9、针扩增 检测检测基因拷贝数的基因拷贝数的荧光定量荧光定量PCR第53页/共77页第54页/共77页l 3种缺失型种缺失型 地贫检测试剂盒：单管多重地贫检测试剂盒：单管多重gap-PCR法法l 17种种 地贫突变检测试剂盒：反向点杂交法地贫突变检测试剂盒：反向点杂交法l 多位点缺失型多位点缺失型 地贫检测试剂盒：地贫检测试剂盒： PCR荧光探针法荧光探针法l 25 种种 地贫突变检测试剂盒：荧光地贫突变检测试剂盒：荧光PCR熔解曲线法熔解曲线法第55页/共77页- HW-THAI- FIL - SEA-11Kb 4.2 3.7 2 11 3HVRHVR 1 210kb0kb20kb 30kb 4
10、0kb 50kb53第56页/共77页 1 基因基因2个拷贝个拷贝 看家基因看家基因2个拷贝个拷贝 1 基因基因1个拷贝个拷贝 看家基因看家基因2个拷贝个拷贝 1 基因基因0个拷贝个拷贝 看家基因看家基因2个拷贝个拷贝CtCt值值CtCt33334No 01 3个个循循环环 3个个循循环环 3个个循循环环 4个个循循环环 3个个循循环环PCRPCR扩增扩增第57页/共77页 第58页/共77页第59页/共77页-SEA/, -/-/等基因分型-SEA, -, - 等单倍型分析珠蛋白基因拷贝数-地贫分子诊断: 临床表型与基因分型Gap-PCR定性检测基因缺失待检人基因组DNA第60页/共77页.
11、 第61页/共77页第62页/共77页SamplesVariant IdentifiedPCR/melting analysisHybridizationMembrane WashingPCRRDBMeltProSignal DevelopmentPCRDirect SequencingPCR Clean-UpSequencing PCRCapillary Electrophoresis(260 min)Variant IdentifiedVariant Identified(370 min)(160 min)30 min3 reactions100 min15 min100 min120 m
12、in45 min120 min2 reactions160 min1 reaction100 min第63页/共77页 扩展家系筛查计划 基于医院水平的预防计划 基于社区或行政区的预防计划第64页/共77页第65页/共77页 斗门区斗门区 金湾区金湾区 香洲区香洲区 l 统一调度统一调度l 质量控制质量控制l 转诊病例确诊转诊病例确诊l 高风险对象建档高风险对象建档l 产前诊断产前诊断一级技术中心一级技术中心l 宣传教育宣传教育l 携带者筛查携带者筛查l 病例转诊病例转诊l 遗传咨询遗传咨询l 随访随访二级检测站二级检测站斗门市妇幼保健院斗门市妇幼保健院唐家镇医院唐家镇医院香州区妇幼保健院香州区妇幼保健院珠海市妇幼保健院珠海市妇幼保健院横琴医院横琴医院金湾区妇幼保健院金湾区妇幼保健院第66页/共77页 第67页/共77页产前诊断：例地贫 例地贫 例重型例重型 地地贫贫 例例Barts水肿儿和水肿儿和Hb H病病 筛查发现的阳性孕妇或阳性夫妇 地贫 地贫 地贫 地贫 4312 2251 103对对 45对对 第68页/共77页第69页/共77页第70页/共77页第71页/共77页 第72页/共77页第73页/共77页第74页/共77页第75页/共77页第76页/共77页
地中海贫血的分子基础和产前诊断徐湘民PPT学习教案
