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1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流DPPH自由基SOP主要目的：为了测定样品清除DPPH自由基的能力。主要原理：自由基清除剂与DPPH单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用酶标仪进行快速的定量分析。实验室签章一、 试剂1 ,1-二苯基-1-苦味肼基自由基（DPPH）甲醇（分析纯）二、 仪器设备96孔酶标板UV-Vis可见多功能酶标仪移液枪200 L量程枪头三、 实验方法前期准备配置2 g/L 的DPPH甲醇标准溶液。DPPH自由基清除能力参照Brand-Williams (1995)1 报道的方法，将其稍加改动后应用在96孔酶标板中2。
2、在酶标板的每孔中，依次加入不同体积（10、20、30、40、50、60、70、80、90和100 L）的样品溶液和200 L的DPPH标准溶液（2 g/L），最后用甲醇溶液补齐至总体积300 L。室温反应30 min后，于515 nm下用UV-Vis可见多功能酶标仪测定其吸光度（EL 340, Bio-Tek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA）。番茄样品消除自由基的能力表示为EC50（清除1 g DDPH至50 %所需的样品用量（g干重）。EC50越小，表示抗氧化活性越高。平行测定三次，取平均值计算。清除DPPH自由基能力用如下公式计算：清除率%=（1-
3、）100%其中：Ai为样品溶液加DPPH试剂混合液的吸光度，Aj为样品溶液加甲醇的吸光度，Ac为DPPH溶液加样品溶剂的吸光度。1 Brand-Williams W, Cuvelier M E. Berset C. Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity J. LWT - Food Science and Technology, 1995, 28(1): 25-30.2 Verma A R, Vijayakumar M, Rao C V. Mathela C S. In vitro and in vivo antioxidant properties and DNA damage protective activity of green fruit of Ficus glomerata J. Food and Chemical Toxicology, 2010, 48(2): 704-709.精品文档.
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