酸性α-醋酸萘酚酯酶染色液(共3页)

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1、精选优质文档-倾情为你奉上酸性-醋酸萘酚酯酶染色液(ANAE)预期用途:供骨髓细胞图片及血液细胞图片染色检查检验原理:盐酸副品红与亚硝酸钠反应生成六偶氮副品红(重氮盐),底物-醋酸萘酚在酯酶的作用下水解-萘酚,-萘酚再与重氮盐偶联,生成棕红色沉淀,定位于细胞浆中,本染色液对酯酶染色无特异性,故又称作非特异性酯酶染色主要组成成分:组成主要成分1,、固定剂(A液)甲醛2、偶氮溶液(B液)副品红3、亚硝酸钠溶液(C液)亚硝酸钠4磷酸盐缓冲溶液(D液)磷酸盐5、-醋酸萘酚溶液(E液)-醋酸萘酚6、甲基绿溶液(F液)甲基绿7、NaF溶液氟化钠储存条件及有效期:有效期:一年储存条件:本试剂盒应储存于2-8

2、低温环境。样本要求:新鲜骨髓细胞涂片及血液细胞涂片(切勿使用抗凝血)检验方法:一、 工作液配制(一)、浸染工作液配制(一份浸染工作量是33ml,至少可同时放置8-10张涂片)1、重氮盐溶液的准备:B液1ml与C液1ml彻底混匀,静置2分钟;2、染缸(自备染液缸)内加入D液40ml;3、将重氮盐溶液倒入染缸内,混匀4、再加E液1ml入染缸内,轻轻混匀B液C液D液E液NaF液A染缸1ml1ml30ml1ml-B染缸(抑制试验)1ml1ml30ml1ml1ml(二)滴染工作液配制(一份滴染工作液是1.65ml)使用器材:一次性塑料试管、微量移液器,一次性吸嘴,滴管。操作:于试管内加B液50L,C液5

3、0L混匀,静置1分钟,再加D液1.5ml,E液50l,混匀,静置2分钟备用 (NaF抑制试验加NaF液1滴)。B液C液D液E液NaF液A染缸50L50L1.5ml50L-B染缸(抑制试验)50L50L1.5ml50L1滴二、 染色步骤1、 干燥涂片,直接滴加工作液做第二步或滴加A液(用前恢复室温,并充分摇匀)固定约30-60秒,蒸馏水冲洗,待干或滤纸吸干(涂片不固定直接做ANAE染色,阳性反应强于固定者);2、 滴加或浸入工作液布满涂片(37)孵育分钟,蒸馏水冲洗,待干或滤纸吸干3、 F液复染1-2分钟,蒸馏水冲洗,干后镜检参考范围:1.单核细胞系统:呈阳性反应,其反应可被氟化钠抑制。 2.粒

4、细胞系统:各期粒细胞多呈阴性反应,有时少数粒细胞可呈弱阳性反应,其反应不被氟化钠抑制。 3.巨核细胞及血小板为阳性。 4.淋巴细胞多呈点状阳性,部分淋巴细胞及浆细胞为阴性反应。 5.单核细胞源性的组织细胞、巨噬细胞呈强阳性反应,高雪氏细胞、海蓝组织细胞为阳性。 6.幼红细胞呈阴性反应。检验结果的解释细胞浆内红色或棕红色颗粒为阳性。点样型:主要见于成熟T淋巴细胞,阳性反应呈棕色或棕红色1-4个圆形、团块、边界清楚的大点状颗粒定位于细胞浆中。弥散型:阳性反应呈棕红色尘粒状、弥散分布,可位于细胞浆的某一局部,边界不清。单核细胞型:阳性反应为均匀棕红色弥漫性遍布整个细胞浆。检验方法的局限性仅限于形态学染色观察使用注意事项1、5Tests只限滴染使用2、本染色又名酸性非特异性酯酶染色。3、使用前应恢复室温,用前请摇匀试剂;B,C液请充分混匀,所用容器必须洁净。4、工作液临用前新鲜配制,应采用新鲜涂片染色。5、每次试剂使用后,请迅速盖好密封保存,以免挥发及影响效果6、本品应由专业人士使用及进行结果的判读7、使用前应详细阅读使用说明书及产品包装标识,在有效期内使用,并做好个人卫生防护8、生产批号、效期见外包装9、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物专心-专注-专业

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