【doc】原生质体融合技术选育易提取的谷氨酸高产菌

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1、原生质体融合技术选育易提取的谷氨酸高产菌蚀.无氧化.热导器的外部在无人为损坏的情况下,一次加料可连续使用12i4年左右据设计推测,每平方米的取暖费用,在l2年的总和不足三分钱.热导器的输热管也可连在暖器片上它具有节能,性能稳定可靠,制造工艺简便,结构简单,安全性好等优点,如果人为的造成漏气时对人体无任何影响.加新料后可继续使用据检测计算,节约能源可在758O%左右.该产品结构简单,投资2万元足够.厂唐占丝1匾覆z0皿(包括化验室),生产人员包括梗导在内2O人,生产设备,化验器县所需费用很少.热导的i可世和推广将会显示出它的优越性,为余热回收节约能源开辟新曲途径(薄宏供稿)原生质体融合技术选育易

2、提取的谷氨酸高产菌天津轻工业学院利用原生质体融台技术,在不对亲株做任何诱变的前提下,成功地使天津短杆菌TG一出明与钝齿棒杆菌B9的原生质体进行融合,获得兼有两亲株遗传性状一一细胞个体大,产酸高的融合子F263及F288.1.通过梯度培养皿方法发现.天津短杆菌(BrevlbacteriumTianjin)TG-S6d遗传标记为s:钝齿棒杆菌(Corynebacceri.umcrenatum)B9遗传标记为L:2.对TG一8和B9菌进行了扫描电子显微甓观察,发现亲株天津短杆菌TG一866细胞为短的直杆菌,无分枝,0.80.71.2I.5m,两端钝圆通过穿刺培养,发现其无运动能力.革兰氏染色量阳性钝

3、齿榨杆菌B9纽胞为微夸的杆菌,两端钝圆,呈一端膨大的棒状,无分枝,0.60.76X1.672.0m.穿刺培埠无运动能力.革兰氏反应呈阳胜3.通过亲株产腔的测定,亲株TG一866产酸很高,达8.52g/d,转化率为53.2嘧,而另一亲株B9则产酸较低.仅5.5g/dl,转化率为34.4嘶.另外,TG一8粕的发酵温度要比B9的发酵温度高,前者为3440.后舞为3004.天津短杆潜TG一B6及钝齿棒杆菌B9均对蛋清溶菌酶不敏感.破壁前必须用青霉素进行预处理才能提高蛋清溶菌酶的敏感性TG一866以采用o.4ml青霉素处理2小时为宜,B9吼采用0.9/mI青霉素处理1.52小时为宜5.天津短杆菌TG一8

4、6螈生质体制备的虽佳条件为:Img,/ml的溶菌酶在34酶解】7个小时.在该条件下,原生质体形成率达99.9铀,原生质体再生率达23%.6.钝齿棒杆菌B9原生质体制备的最佳条件为:0.8mg/ml的溶菌酶在3b酶解15小时.在该条件下,愿生质体形成率达99.9嘶原生质体再生率达28%.7.天滓短杆菌TG-868与钝齿棒杆菌B9原生质体融合的最佳条件为:s5qo的PEG当Ca:+离子浓度为5oreMud,在36融合SO分钟,融台时的pH为10.5在该条件下,原生质体融台频率可达3.2X10一.8.通过上述实验,共筛选出310株细胞个体大的融合子,经对这3l0株融台子进行初筛,共选出两株产酸高的融

5、合子,即F26及F2妇.其初筛产酸分别为2.75g/dt,2.63g/dI9F263F288菌株的高产各氨酸摇瓶条件为:一级种子种龄为1o小时,发酵培养基初糖为16%.玉米浆0.8嘶(F263)或o.T%(F288),初尿0.8%,采用少量多次流加屎索控制phi7.o7.2.发酵始温为734,发酵终了温嚏为40,跚F263及F288可以耐高温.10.在最佳摇瓶发酵条件下融合予F263谷氨酸产率为8.4/d转陀率为52%融合子F288谷氨酸产率为8.0sg/di.转化率为50.2面,由于F2日受F288的细胞个体均与B9菌相同.并且产酸较高,所以是二株优秀的谷氨酸生产菌.If.经过连续摇瓶传代1

6、0次,耐其谷氨酸产率,发现第1o干的各氨酸产率与第1代相同,固此融合子F263及F288的遗传足稳定的,完全可以应用到T.lk生产中去.可以看出该顶研究对昧精生产具有重要的现实意义仅以产酸与现行生产菌相同来看因提取!改率可1LT613菌提高!3野.所以经济效益十分明显该实验的结果很象一个亲株的DNA转移到另一株中去的转化作用怕结果,由于在整个实验过程中加入了DNA酶,从而排除了转化的可能性他们通过上进一系列实验步骤,成功地获得了细胞个体大,谷氨酸产率高的茁株,融台子F263及F288戒功地表现了两株的优良特性说碣利用原生质体融合技术来选育高产谷氨酸生产菌是完全可行的该技术存一般实验室条件下均可

7、以进行并且操作简单见效侠特别在对于与产菌有关的基目及其他性状(如细胞个体大)的控制田子不甚丁解的情况下,原生质体融合技术更其独特的优遗性该菌株芷儿家味精厂试用后,经济效益十分明显.谖项研究已予1959年1月20j通过鉴定.与会专家认为,利用愿生赡体融台技术,选育容易从发酵液qs提取谷氨黢的高产苗,国内外未见报导.融予F16:与F288两菌株,都具有细胞个体太(类似予B9菹),耐高糖,耐高酸,产酸商,耐高溢,遗传稳定等特点,是两株优良的谷氨救生声甫.摇瓶小试产菌8和以上,转化率50%上.达到国内先进水平.该宴ai-I台理试验层次分明,工作细致,数据完整可靠.融合子F263与F288在囔精工业上.

8、有较高的应用价值.(矗津轻工业学院食品工程系陈宁供稿)通用中低合金钢光谱标样中低台金钢是工业系统各行业常用的一种金属材料为此研制通用中低台金钢光谱标样,就极为重要天津纺织机械器材研究所根据国内外光谱标准物质的发展趋势,应用现代科学技术分析了各种标准物质质量的优劣,考虑到百常分析结果向准确性.依据光谱分析标准物质的技术碗范研制孓达斟耳内外,己进水平予通用中低合金钢光谱标样.这项研制工作共分五个阶段.I.设计通用标样的化学成份元素含量.2.制备标样及加工.3.均匀性检验.4.样品的分析及定值.5.工曲线的登查及生产实践考核等.该所研制成功的逮套通用标样可适用于看谱分析,利用詹发茫耍睦,-遗,半定量

9、甚至定量分质析:还可适用于光电直谱分析及摄谱析该通目光j替标样与单牌号光潜标准物比较:在选用38CrMoAi(本锕钢研所).CrMnTi(齐钢)J(天津商检局),J.(无滓商枪局)等不同牌号光谱标准物质与新研制成功的通翊标样在同等工作条件下.同一下版进行了摄谱比较分析其线性基本重合,证明确宴可行.另从比较实验曲线图可以看出造套标准物质在选择好的分析条件下可以列大多数低台金钢牌号自j钢种进行光谱定量分析,达到同内外先进水平.用这些适用中低垒钢光谱标样在天津一光学仪器厂,天津工程机拙制造厂.天津超匝设捋广宰生产单位使用,能达到预期El标.在此基础上_于今年6月召开1技术鉴定会,与会f表致以为该套通j中低合金钢填补了同内空是当前冶金,机械(包括标样纺织机械,纺织新没备)等行业的急需关键标样.应进行扩太生产满足国内需求.(本刊通讯员供稿)

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