CL-BIII八通道残留农药测定仪使用说明实用教案

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1、农残常识(chngsh)1 有机磷和氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂的特点。两类农药的作用机理均为抑制动物体内乙酰胆碱酯酶的活性，破坏神经传导，引起一系列的神经中毒症状，直至死亡。二者的主要(zhyo)区别在于：有机磷类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是不可逆的，而氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是可逆的 。第1页/共48页第一页，共49页。农残常识(chngsh)2 酶抑制率法和酶系酶源：国家标准GB/T 5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测推荐的酶抑制率法能方便、快速、准确、成本低廉检测出农产品中的农药残留，也同时肯定了乙酰胆碱酯酶作为快速检测推荐试

2、剂的活性量和具体要求。近年来，我们通过对动物源和植物源的多种丁酰胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶进行检测实验(shyn)和比较研究，发现乙酰胆碱酯酶对农药的检测敏感度和综合指标优于丁酰胆碱酯酶；确定了有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酸有较专一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多数农药浓度和乙酰胆碱酯酶抑制率呈较好的线性关系，并能实现对单种农药的定量分析；解决了酶的活性和稳定性控制等技术 第2页/共48页第二页，共49页。农残常识(chngsh)3 什么是间接比色法:由于只有当底物与产物之间，在光学性质或其它理化性质有显著差异时，才可能直接用分光光度计法测定，因此对酶活性浓度的监测大多是采用间接

3、监测法。如对胆碱(dn jin)酯酶的测定：底物（硫代乙酰胆碱(dn jin)）及酶水解产物（硫代胆碱(dn jin)和乙酸）并不具有颜色，不能用分光光度计法测定。所以必须设法在原来反应体系中添加一些试剂，这些试剂必须不与酶作用也不影响酶活性，同时又能与酶反应物迅速作用，产生可以被直接测定的物质。这就产生了Ellman的胆碱(dn jin)酯酶测定法即间接连续监测法。目前国内大多厂家生产的快速农药测定仪都采用了 Ellman的胆碱(dn jin)酯酶测定法即间接比色法。该方法通过监测底物（硫代乙酰胆碱(dn jin)），酶水解产物硫代胆碱(dn jin)与添加的二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用

4、立刻生成黄色化合物的反应速度来测定酶活性变化。第3页/共48页第三页，共49页。农残常识(chngsh)4 什么是连续监测法：50年代，Warburg首先用分光光度计测定酶的活性。该方法不需停止酶反应就可测定反应物的变化，容易观察到反应的整个过程和干扰情况（通过绘制反应曲线）。因此逐步取代了固定(gdng)时间法成为目前测酶活性的主要方法。该方法是利用连续对反应过程进行高灵敏度检测，并通过绘制整个酶反应曲线避开延滞期和非线性反应期，只在线性反应期测定最大反应初速度。由于仪器的高精密度，连续监测法能在很短时间，甚至在1分钟反应时间内就能准确测定出活性的抑制率。 第4页/共48页第四页，共49页。

5、技 术 指 标CL-BIII八通道残留农药测定仪的技术指标： 测量波长：410nm 通道数：8 检测用样品器皿：10mm比色皿 光电流漂移：0.5% (3min) 暗电流漂移：0.5% (3min) 抑制率显示范围：0-100% 抑制率测量范围：10-100% 农药检测：（用甲胺磷农药标样测试(csh)） 抑制率示值误差：10 % 抑制率重复性误差： 5 % 第5页/共48页第五页，共49页。第一部分(b fen) 试剂配制第二部分(b fen) 联机使用第三部分(b fen) 单机使用第四部分(b fen) 相关技巧与常识目 录第6页/共48页第六页，共49页。第一第一(dy)部分部分试剂配

6、制试剂配制 第7页/共48页第七页，共49页。1、试剂(shj)的配制提取液：把提取液甲乙提取液：把提取液甲乙(ji y)粉末倒入大玻璃瓶中，并加粉末倒入大玻璃瓶中，并加入入 510ml蒸馏水溶解。蒸馏水溶解。酶试剂酶试剂(shj)：用移液枪取：用移液枪取3.1ml提取液，加入酶试剂提取液，加入酶试剂(shj)瓶中。瓶中。显色剂显色剂：用移液枪取20ml提取液，加入显色剂瓶，溶 解后倒入棕色瓶中。底底 物物：用移液枪取3.1ml蒸馏水，加入底物瓶中。第8页/共48页第八页，共49页。2、试剂(shj)的保存及注意事项返回目录1、本试剂适用的国家标准为：GB/T5009.199-2003。2、未

7、配制的试剂，要保存在0以下的冷冻箱里。 （保质期可达1年）3、配制好的酶和底物试剂，要保存在4的冷藏箱内。 （保质期为一周）4、配制好的提取液常温下可以长期(chngq)保存。5、配制好的显色剂需避光保存；常温或冷藏，可以 保存1年。第9页/共48页第九页，共49页。第二第二(d r)部分部分联机使用联机使用第10页/共48页第十页，共49页。第一步第一步 仪器仪器(yq)(yq)连接连接第11页/共48页第十一页，共49页。1、连接(linji)电源将仪器(yq)的电源接头和数据信号线接好。 如图：第12页/共48页第十二页，共49页。2、连接(linji)电脑 把数据信号线（串口线）接入电

8、脑主机背后的COM口（串口）上，然后把数据信号线与仪器(yq)联接起来，这样就完成了仪器(yq)与电脑的硬件连接。第13页/共48页第十三页，共49页。第二步第二步 软件软件(run (run jin)jin)安装安装第14页/共48页第十四页，共49页。安装“农产品质量(zhling)安全检测软件” 把“农产品质量安全检测软件”光盘(un pn)放入电脑光驱中，等自动读取或在光盘(un pn)目录下找到并双击“setup”后，按提示点击“下一步”安装。安装完成以后，桌面上会出现“食品质量安全检测平台”的图标。安装完成桌面上出现的图标第15页/共48页第十五页，共49页。第三步第三步 仪器仪器

9、(yq)(yq)设置设置第16页/共48页第十六页，共49页。仪器(yq)设置打开仪器电源，按仪器“确认”键2次，然后按1次“设置”键，再按 “确定”键，选择 “受控”后再按1次“确定”键。打开检测(jin c)软件，检测(jin c)软件的用户名默认为“管理员”，密码是“111111”。 检测软件登陆设置(shzh)为受控状态第17页/共48页第十七页，共49页。调0/100注：以上是一个检测窗口的步注：以上是一个检测窗口的步骤骤(bzhu)，其他七个窗口都，其他七个窗口都是如此。是如此。 等待10-15秒 按“确定” 放入黑块 等待10-15秒 按“确定” 拿出黑块 按“ ”键按“ ”键按

10、“ ”键 按“ ”键第18页/共48页第十八页，共49页。第四步第四步 空白对照空白对照第19页/共48页第十九页，共49页。空白对照空白对照 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中酶试剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中显色剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml底物加入试管中底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池放入比色池 按按“开始对照分析开始对照分析”键键 等待对照结束等待对照结束 第20页/共48页第二十页，共49页。装入对照装入对照(duzho) 按“装入对照(duzho)分析”键选择所需对照选择需要装入

11、对照的通道号（在通道号码前） 按“读取”键完成装入工作 注：对照结束注：对照结束(jish)(jish)后，对照曲线会自动保后，对照曲线会自动保存存. . （标准对照库中已有（标准对照库中已有3030种蔬菜的对照，在种蔬菜的对照，在做这做这3030种蔬菜时，请参照这些对照。）种蔬菜时，请参照这些对照。） 第21页/共48页第二十一页，共49页。装入标准装入标准(biozhn)对对照库照库 按“装入对照(duzho)分析”键选择所需的空白对照和相应的样品修正值选择需要装入对照的通道号（在通道号码前） 按“读取”键完成装入工作 第22页/共48页第二十二页，共49页。第五步第五步 样品样品(yng

12、pn)(yngpn)检测检测第23页/共48页第二十三页，共49页。用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中，用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟（或震荡1分钟） 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开始样品分析”键 等待检测结果 第24页/共48页第二十四页，共49页。第六步第六步 保存检测保存检测(jin (jin c)c)结果结果第25页/共48页第二十五页，共49页。保存检测(jin

13、c)结果样品结束(jish)后，系统自动弹出“检测结果”对话框 选择该通道所测蔬菜名 填写（选择）检测单位 按“退出”键 填写（选择）被检单位和生产单位 按“保存”键，保存检测结果 第26页/共48页第二十六页，共49页。备备 注注“统计分析统计分析” 中的中的“农残检测数据查询统计农残检测数据查询统计”对话框有对话框有所有保存过的检测数据，在该对话框中有所有保存过的检测数据，在该对话框中有“开始日期开始日期“、“结束日期结束日期”、“果蔬品种果蔬品种”、“被检单位被检单位”等九项选项，等九项选项，对这些选项进行组合选择后，再按对这些选项进行组合选择后，再按“查询查询”键，就可以将您键，就可以

14、将您需要的信息从所有的数据中筛选出来。需要的信息从所有的数据中筛选出来。另外，另外，“农残检测数据查询统计农残检测数据查询统计”对话框中还有对话框中还有“统计分统计分析析”和和“转存转存”等功能，当选择出需要的检测数据后，就可等功能，当选择出需要的检测数据后，就可以按以按“统计分析统计分析”键或者键或者“转存转存”键，对数据进行统计分析键，对数据进行统计分析或制成相应报表。或制成相应报表。如果需要打印单项检测结果，则点选该结果后，按如果需要打印单项检测结果，则点选该结果后，按“打印打印当前记录当前记录(jl)”键，浏览打印效果，再按打印键后打印。键，浏览打印效果，再按打印键后打印。第27页/共

15、48页第二十七页，共49页。检测(jin c)结果上传打开“设置”项下(xin xi)的“系统选项” 在“系统选项”中在“注册ID号”处填入ID号 及ID密码 通过右半边的条件选择，查询出需要上传的数据点击“发送”下的“发送查询的数据” 当检测结束后需要发送数据时，打开“统计汇总”中的“农残检测数据查询统计” 返回目录第28页/共48页第二十八页，共49页。第三第三(d sn)部分部分单机使用单机使用第29页/共48页第二十九页，共49页。第一步第一步 设置设置(shzh)(shzh)仪器仪器第30页/共48页第三十页，共49页。1、连接(linji)电源将仪器电源(dinyun)连接好，（如

16、需打印，则要将专用打印机连接到仪器的打印接口上。）如图： 第31页/共48页第三十一页，共49页。2、仪器(yq)设置 打开仪器开关后，按提示进入仪器操作主界面。按“设置(shzh)”键进入仪器设置(shzh)功能，在“设置(shzh)”里可以对 “日期”、“打印方式”、“对照查询”等进行设置(shzh)。设置(shzh)完成后再按“设置(shzh)”键退回到主界面。 第32页/共48页第三十二页，共49页。3、调0/100 在主界面(jimin)状态下，按0/100键，根据屏幕提示逐一调1-8通道的100值，最后按“确定”键结束。第33页/共48页第三十三页，共49页。第二步第二步 空白对照

17、空白对照第34页/共48页第三十四页，共49页。空白对照空白对照注 ： 对 照 的 时注 ： 对 照 的 时间默认为间默认为3 3分钟，如分钟，如需修改，则先要在需修改，则先要在“设置设置(shzh)”(shzh)”中进行设置中进行设置(shzh)(shzh)。 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中酶试剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中显色剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml底物加入试管中底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿迅速摇匀并倒入比色皿 放入第一通道的比色池放入第一通道的比色池 按按“对照对照”键，并选择键，并选择“新建新建” 等

18、待对照结束等待对照结束 第35页/共48页第三十五页，共49页。第三步第三步 样品样品(yngpn)(yngpn)检测检测第36页/共48页第三十六页，共49页。用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中，用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“样品”键 等待检测结果 注：按注：按“样品样品”键后，会从键后，会从1-81-8通道依次提示是否准备好开始进行检测，如

19、果该通道不需要通道依次提示是否准备好开始进行检测，如果该通道不需要(xyo)(xyo)进行检测，则选择进行检测，则选择“不用不用”。 第37页/共48页第三十七页，共49页。第四步第四步 数据打印数据打印(d (d yn)yn)及退出及退出 第38页/共48页第三十八页，共49页。数据打印数据打印(d yn)及退出及退出返回目录按“打印(d yn)(d yn)”键 按“确定”键 用/键选择检测数据的编号 按“打印”键进行打印 按“确定”键退出打印状态 第39页/共48页第三十九页，共49页。第四部分第四部分相关相关(xinggun)技巧与常识技巧与常识第40页/共48页第四十页，共49页。常见

20、问题及相关(xinggun)(xinggun)技巧1 11.仪器联机操作的情况下，在检测过程中或者开始检测时，电脑出现“没有检测到指定的设备”，是怎么回事？ 一般来说出现这种提示说明(shumng)您的检测仪与电脑硬件连接出现问题，检查的步骤如下： 第一步、确定检测软件的设备设置中相关设置与硬件连接相匹配； 第二步、电脑串口通讯故障，检测方法：重新启动电脑，确认是否故障依然存在，如果故障依然存在，检查下一步； 第三步、更换一下电脑串口，并在检测软件的设备设置中进行相应的改动，或者换一台电脑，确认故障是否存在，如果故障解决，则表明是电脑本身的问题，否则可进行下一步检查； 第四步、更换RS2324

21、85转换器，确认问题是否存在,如果故障解决，则表明为RS232485转换器连接不通。第41页/共48页第四十一页，共49页。常见问题及相关(xinggun)(xinggun)技巧2 22.仪器联机操作的情况下，调100时看不到红线是怎么回事？ 首先我们要学会看图谱(tp)，图谱(tp)的横坐标为时间，纵坐标为投射比，我们所所的调100准确的所是指将投射比值调整为100。 图谱(tp)在没有拖拉的情况下，最高只能显示到100，如果在调100的过程中，其投射比值大于100，那样就看不到红线了，但图谱(tp)右边的小白框中有数字显示，你只要正常的调0/100就可以了。 另外，对于小白框内数字，显示的

22、是当前的投射比值。在做对照或调0/100时，小白框内的数字前有一短红线，在做样品时则为短绿线。大家不要把这个短线认为是负号。第42页/共48页第四十二页，共49页。常见问题及相关(xinggun)(xinggun)技巧3 33.如何检测(jin c)仪器的重现性？ 做一空白对照后，做一个双倍量的样品，然后一分为二，先后或同时做检测(jin c)，即：取2克样品，加10ml提取液浸泡，然后取5ml检液，分别加0.2ml的酶、显色剂，15分钟后，如果直接加0.2ml底物，然后一分为二在两个通道中同时做检测(jin c)，则是检查不同通道的重现性；如果15分钟后先将溶液一分为二，先后加入0.1ml底

23、物做检测(jin c)，则是检查同一通道的重现性。4.如何添加品种名称？ 一般来说有两种添加方法： A.可以在基础数据维护中进行添加。 B.在检测(jin c)结果弹出是，通过 进行添加。另外，在添加时一定要按“增加”键，填好相关信息后按“保存”完成。 第43页/共48页第四十三页，共49页。常见问题及相关(xinggun)(xinggun)技巧4 45.如何升级检测软件？ 对于检测软件的升级有两种方法： A.在线升级：打开检测软件并连接因特网，然后(rnhu)在帮助中选择在线升级。 B.本地升级：执行新版检测软件的安装程序，选择“修复或升级”项，然后(rnhu)按照提示完成安装即可。6.如何

24、上传数据？ 上传数据有三个步骤： 1）打开“设备”菜单中的“系统选项”，并将注册ID号和ID密码填写好； 2）打开“统计汇总”菜单中的“农残检测数据查询统计”，通过查询项将需要上传的数据查询出来； 3）按“上传”键完成上传数据的操作。第44页/共48页第四十四页，共49页。常见问题及相关(xinggun)(xinggun)技巧5 5返回目录7.检测中需要注意哪些事项？ A.蔬菜不能剪切的太小，一般以2cm见方为好； B.对于颜色深的蔬菜尽量取茎、叶各一半为好； C.对于果品，可以顺皮削下一块或取皮下部分； D.对于有味蔬菜可以使用检测软件的对照标样库来检测； E.对于有杂质或沉淀物及较浑浊(h

25、nzhu)的检液可以采用双倍取样，过滤后再检测； F.移液枪的枪头不能互相污染； G.在移液枪将试剂加入检液时，一定要保证枪头垂直于液面，不能将试剂加到试管壁上。第45页/共48页第四十五页，共49页。上海博纳新(n xn)技术研究所2006年4月第46页/共48页第四十六页，共49页。I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK

26、8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%

27、s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOd

28、LaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w

29、*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v)v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlT

30、iQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3

31、B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYm

32、VjSgOdLdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoW

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