细菌感染的检测方法与防治原则学习教案

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1、会计学1第一页,共51页。用的免疫用的免疫(miny)(miny)制剂制剂n细菌感染的治疗原则细菌感染的治疗原则2第1页/共50页第二页,共51页。3第2页/共50页第三页,共51页。形态学检查形态学检查可疑细菌感染可疑细菌感染血清(双份)标本血清(双份)标本含菌标本含菌标本直接凝集试验直接凝集试验乳胶凝集试验乳胶凝集试验补体结合试验补体结合试验ELISA等等细菌分离培养与鉴定细菌分离培养与鉴定细菌成分检测细菌成分检测凝集试验、免疫荧光技术凝集试验、免疫荧光技术酶免疫技术、免疫印迹试验酶免疫技术、免疫印迹试验等等细菌培养、形态学检查细菌培养、形态学检查生物试验、血清学鉴定生物试验、血清学鉴定动

2、物试验、药物敏感试验动物试验、药物敏感试验核酸杂交、核酸杂交、PCR16S rRNA基因序列分析基因序列分析基因芯片等基因芯片等核酸检测核酸检测抗原检测抗原检测特异性抗体检测特异性抗体检测细菌感染的实验室检验细菌感染的实验室检验(jinyn)(jinyn)方法方法4第3页/共50页第四页,共51页。早期采集早期采集无菌操作无菌操作 选感染部位选感染部位最佳时间采集最佳时间采集双份血清双份血清 标本采集标本采集 做好标记做好标记置于密闭容器内置于密闭容器内尽快送检尽快送检标本运送标本运送 5第4页/共50页第五页,共51页。6第5页/共50页第六页,共51页。暗视野暗视野显微镜显微镜相差相差(x

3、in ch)(xin ch)显微镜显微镜主要用于检查在生活状态下主要用于检查在生活状态下细菌的动力及其运动细菌的动力及其运动(yndng)(yndng)情况情况不染色不染色标本标本7第6页/共50页第七页,共51页。细菌细菌(xjn)(xjn)的染色的染色革兰革兰染色染色(rns)(rns)抗酸抗酸染色染色(rns)(rns)荧光金胺荧光金胺O O染色染色其他其他特殊染色特殊染色8第7页/共50页第八页,共51页。9葡萄球菌(革兰染色葡萄球菌(革兰染色(rns)(rns)阳性)阳性)大肠埃希菌(革兰染色大肠埃希菌(革兰染色(rns)(rns)阴性)阴性)9第8页/共50页第九页,共51页。细菌

4、细菌(xjn)(xjn)检查的一般程序检查的一般程序标标本本脓脓/ /痰痰/ /尿尿血、脑血、脑脊液等脊液等涂片、染色、镜检涂片、染色、镜检分离培养分离培养纯培纯培养养生化反应生化反应血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物实验动物实验增增菌菌( (二二) ) 细菌细菌(xjn)(xjn)分离培养与鉴定分离培养与鉴定10第9页/共50页第十页,共51页。在血平板上的肺炎在血平板上的肺炎(fiyn)(fiyn)链球菌菌落链球菌菌落11第10页/共50页第十一页,共51页。肠道感染肠道感染(gnrn)(gnrn)细菌在含铁双糖培养基上的生化反细菌在含铁双糖培养基上的生化反应应12第11页/共50页

5、第十二页,共51页。13第12页/共50页第十三页,共51页。14第13页/共50页第十四页,共51页。15第14页/共50页第十五页,共51页。基基16第15页/共50页第十六页,共51页。17第16页/共50页第十七页,共51页。将培养基上分离的可疑致病菌配制成纯菌液,放入自动微将培养基上分离的可疑致病菌配制成纯菌液,放入自动微生物鉴定生物鉴定(jindng)(jindng)及药敏分析系统中,通过计算机自动及药敏分析系统中,通过计算机自动扫描、读数、分析、最后报告鉴定扫描、读数、分析、最后报告鉴定(jindng)(jindng)及药敏结果。及药敏结果。摘自摘自 临床微生物检验(第五版)人民

6、卫生出版社临床微生物检验(第五版)人民卫生出版社18自动自动(zdng)(zdng)微生物鉴定及药敏分析系统微生物鉴定及药敏分析系统第17页/共50页第十八页,共51页。药敏检测药敏检测(jin (jin c)c)原理原理微型化的肉汤稀释试验微型化的肉汤稀释试验(shyn)(shyn)根据根据CLSICLSI标准得到相应标准得到相应敏感度:敏感、中度敏敏感度:敏感、中度敏感和耐药感和耐药微生物数码鉴定原理微生物数码鉴定原理计算并比较数据库内每个计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和化反应出现的频率总和性能特点性能特点自动化程度较高、检测速度快、可

7、鉴定细菌种类及药敏试验种类多、数据处理软件功能强大、结果准确可靠自动化程度较高、检测速度快、可鉴定细菌种类及药敏试验种类多、数据处理软件功能强大、结果准确可靠系统组成系统组成测试卡(板)、菌液测试卡(板)、菌液接种器、培养和监测接种器、培养和监测系统、数据管理系统系统、数据管理系统自动微生物鉴自动微生物鉴定及药敏分析定及药敏分析系统系统1919第18页/共50页第十九页,共51页。(三)细菌抗原(三)细菌抗原(kngyun)的检测的检测凝集试验凝集试验用已知抗体检测待检标本中未知的颗粒性抗原。用已知抗体检测待检标本中未知的颗粒性抗原。IgG的的Fc段与金葡菌的段与金葡菌的SPA结合,结合,Fa

8、b段与细菌抗原段与细菌抗原结合后,可使金葡菌发生肉眼可见的凝集现象。结合后,可使金葡菌发生肉眼可见的凝集现象。协同凝集试验协同凝集试验用已知的荧光抗体检测待检标本中的未知抗原,用已知的荧光抗体检测待检标本中的未知抗原,借助荧光显微镜观察。借助荧光显微镜观察。免疫荧光技术免疫荧光技术对流免疫电泳对流免疫电泳利用双向琼脂扩散与电泳技术相结合的方法。由于电泳和电渗作用,抗原向正极移动,抗体向负极移动,在比例合适处形成肉眼可见的沉淀线。利用双向琼脂扩散与电泳技术相结合的方法。由于电泳和电渗作用,抗原向正极移动,抗体向负极移动,在比例合适处形成肉眼可见的沉淀线。用酶标记的抗体检测特异性可溶性抗原的实验技

9、术。用酶标记的抗体检测特异性可溶性抗原的实验技术。酶免疫技术酶免疫技术20第19页/共50页第二十页,共51页。PCR(含(含RT-PCR、real time PCR等)等)核酸杂交核酸杂交技术技术基因芯片技术基因芯片技术16S rRNA基因序列分析基因序列分析21第20页/共50页第二十一页,共51页。22第21页/共50页第二十二页,共51页。23第22页/共50页第二十三页,共51页。究:可研究病原体基因的序列、究:可研究病原体基因的序列、转录表达、抗原的表达及细菌转录表达、抗原的表达及细菌糖键的特异性研究;糖键的特异性研究;n抗微生物感染抗微生物感染(gnrn)(gnrn)药物的药物的

10、研制等。研制等。24第23页/共50页第二十四页,共51页。果。果。25第24页/共50页第二十五页,共51页。血清学试验血清学试验疾病举例疾病举例直接凝集反应直接凝集反应肥达试验、外斐试验肥达试验、外斐试验乳胶凝集试验乳胶凝集试验脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌沉淀试验沉淀试验梅毒梅毒间接免疫荧光技术间接免疫荧光技术各类微生物感染各类微生物感染补体结合试验补体结合试验Q热热中和试验中和试验风湿热(抗风湿热(抗O试验)试验)酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验各类微生物感染各类微生物感染26第25页/共50页第二十六页,共51页。27第26页/共50页第二十七页,共51页。自然

11、免疫自然免疫(z (z rn min y)rn min y)人工免疫人工免疫(rn (rn n min y)n min y)u主动免疫:疫主动免疫:疫苗或类毒素等苗或类毒素等u被动免疫:抗毒被动免疫:抗毒素或丙种球蛋白等素或丙种球蛋白等u主动免疫:隐主动免疫:隐性或显性感染性或显性感染u被动免疫:获得被动免疫:获得母体的母体的Ab(胎盘胎盘/初初乳乳)28第27页/共50页第二十八页,共51页。29特异性预防特异性预防疫苗疫苗类毒素类毒素29第28页/共50页第二十九页,共51页。30第29页/共50页第三十页,共51页。31第30页/共50页第三十一页,共51页。32第31页/共50页第三十

12、二页,共51页。区别点区别点活疫苗活疫苗死疫苗死疫苗制品特点制品特点减毒或无毒的疫苗减毒或无毒的疫苗死菌,仍保持免疫原性死菌,仍保持免疫原性制备方法制备方法通过非正常培养减毒株通过非正常培养减毒株通过物理化学方法使病原体失通过物理化学方法使病原体失活活接种次数和接种量接种次数和接种量1次,量小次,量小23次,量大次,量大接种反应接种反应可在体内增殖,类似轻型可在体内增殖,类似轻型感染或隐性感染感染或隐性感染在体内不增殖,可出现发热、在体内不增殖,可出现发热、全身或局部肿痛等反应全身或局部肿痛等反应免疫的类型免疫的类型体液免疫和细胞免疫体液免疫和细胞免疫体液免疫体液免疫免疫效果免疫效果15年年0

13、.51年年毒力回升与安全性毒力回升与安全性有可能,对免疫缺陷者有有可能,对免疫缺陷者有危险危险不可能,安全性好不可能,安全性好疫苗的稳定性疫苗的稳定性相对不稳定相对不稳定相对稳定相对稳定保存保存不易保存,不易保存,4存活存活2周,周,真空冻干可长期保存真空冻干可长期保存易保存,易保存,4可保存可保存1年以上年以上33第32页/共50页第三十三页,共51页。亚单位亚单位(dnwi)(dnwi)疫疫苗苗基因工程基因工程(jyn (jyn gngchng)gngchng)疫苗疫苗核酸疫苗核酸疫苗 重组载体疫苗重组载体疫苗34第33页/共50页第三十四页,共51页。35第34页/共50页第三十五页,共

14、51页。36第35页/共50页第三十六页,共51页。37第36页/共50页第三十七页,共51页。38第37页/共50页第三十八页,共51页。39第38页/共50页第三十九页,共51页。40第39页/共50页第四十页,共51页。41第40页/共50页第四十一页,共51页。42第41页/共50页第四十二页,共51页。区别点区别点人工主动免疫人工主动免疫人工被动免疫人工被动免疫免疫物质免疫物质抗原抗原抗体或细胞因子等抗体或细胞因子等接种次数接种次数13次次1次次免疫出现时间免疫出现时间慢(注射后慢(注射后24w) 快(注射后立即出现)快(注射后立即出现)免疫维持时间免疫维持时间长(数月数年)长(数月

15、数年)短(短(23w)用途用途多用于预防多用于预防多用于治疗或紧急预防多用于治疗或紧急预防43第42页/共50页第四十三页,共51页。44第43页/共50页第四十四页,共51页。45第44页/共50页第四十五页,共51页。46第45页/共50页第四十六页,共51页。47第46页/共50页第四十七页,共51页。48第47页/共50页第四十八页,共51页。血清学诊断血清学诊断serological diagnosis最低抑菌浓度最低抑菌浓度minimum inhibitory concentration, MIC最低杀菌浓度最低杀菌浓度minimum bactericidal concentrat

16、ion, MBC基因芯片技术基因芯片技术gene chips人工主动免疫人工主动免疫artificial active immunization人工被动免疫人工被动免疫artificial passive immunization预防接种预防接种prophylactic inoculation疫苗接种疫苗接种vaccination死疫苗死疫苗killed vaccine减毒活疫苗减毒活疫苗attenuated vaccine亚单位疫苗亚单位疫苗subunit vaccine基因工程疫苗基因工程疫苗gene engineered vaccine核酸疫苗核酸疫苗 nucleic acid vaccine类毒素类毒素toxoid49第48页/共50页第四十九页,共51页。50第49页/共50页第五十页,共51页。NoImage内容(nirng)总结会计学。脓/痰/尿。琼脂稀释法使用琼脂培养基。肉汤稀释法使用肉汤培养基。根据CLSI标准得到相应敏感度:敏感、中度敏感和耐药。微生物感染的快速诊断:对某些病原体,如细菌(xjn)、真菌和病毒进行多重快速检查与鉴别。有可能,对免疫缺陷者有危险。易保存,4可保存1年以上。血清丙种球蛋白是从正常人血浆中提取的丙种球蛋白制剂。胎盘丙种球蛋白是从健康产妇的胎盘或婴儿脐带血液中提制而成,主要含有丙种球蛋白。50第五十一页,共51页。

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