饲料公司品管部检验标准全面好用

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1、精选优质文档-倾情为你奉上 企业标准 产品质量标准（内部使用） 2013 - - 发布2013 - - 实施专心-专注-专业前 言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由公司品管部起草。 本标准主要起草人：原料、中间品及成品饲料检测1 范围本标准规定了饲料原料玉米、豆粕、油等物质的验收标准及检测方法，生产过程中的半成品以及成品饲料中的水分、淀粉、pH值、葡萄糖、乳酸、粗蛋白、粗脂肪等物质含量的检验及操作标准，菌种生物量、乳化脂肪的检测方法，以及锅炉房中煤质、水质的检测方法。本标准适用于本公司内部对各种原料、半成品及成品的检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不

2、可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 5917.1 饲料粉碎粒度测定 两层筛筛分法GB/T 14698 饲料显微镜检查方法GB/T 6432 饲料中粗蛋白质的测定方法GB/T 6434 饲料中粗脂肪的测定方法GB/T 6438 饲料中粗灰分的测定方法 GB/T 26428 饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测 NY/T 1461 饲料微生物添加剂 地衣芽孢杆GB/T 14699.1 饲料 采样GB 饲料卫生标准GB/T 20195

3、 动物饲料 试样的制备饲料原料目录（中华人民共和国农业部公告）3 试验方法3.1试样采集与制备3.1.1 试样采集：按GB/T 14699.1的规定执行；3.1.2试样制备：按GB/T 20195的规定执行。3.2 检验方法3.2.1 感官指标：目测、鼻嗅、手感和按照GB/T 146982002的规定执行。3.2.2 淀粉定性：按附录B的规定执行。3.2.3 pH值：按附录C的规定执行。 3.2.4 葡萄糖：按附录D的规定执行。3.2.5 含水量：按附录E的规定执行。3.2.6 乳酸：按附录F的规定执行。3.2.7 乳化脂肪：按附录G的规定执行。3.2.8 水溶性小分子养分：按附录H的规定执行

4、。3.2.9 粗蛋白质：按GB/T 64321194的规定执行。3.2.10 粗脂肪：按GB/T 64342006的规定执行。3.2.11 粗灰分：按GB/T 64382007的规定执行。3.2.12 饲料原料：按GB10647-89的规定执行。3.2.13 菌种生物量：按附录I的规定执行。3.2.20 饲料检测结果判定允许误差：按GB/T 18823规定执行。4 判定规则当检验结果不符合本标准要求时，应重新加倍抽样进行复检，复检结果仍不符合标准要求，则将检测结果报备上级。附录A（规范性附录）原料检测1.1发酵原料检测：1.1.1玉米的质量标准及验收指标营养指标非营养指标物理性状指标水 分14

5、.0%粗蛋白质8.0%粗纤维2.0%粗灰分2.6%验 收 指 标水 分粗蛋白（东北玉米）黄曲霉毒素50PPb杂 质1%容重：一级710g/L以上，二级680g/L以上饲料用玉米以硬玉米及凹玉米为主硬玉米宜用家禽凹玉米宜用猪饲料验 收 指 标黄曲霉毒素容重杂质适用范围：本标准适用于饲料用玉米。一般性状：色 泽：黄或金黄色，通常凹玉米比硬玉米色泽较浅白 粒5%不完善粒5%霉变粒2%（猪用玉米1%以下）无虫害、无霉味、无异味异嗅验 收 指 标无霉味、虫害、霉变粒验收标准水分:4-10月份标准14.0%，14.0%水分14.5%按照超出部分从重量上扣除，14.5%拒收；11-3月份标准14.5%，14

6、.5%水分15%按照超出部分从重量上扣除，15%拒收。杂质：视杂质多少从重量上扣除，2.0%拒收。霉变：黄曲霉素B1不符合标准或发现2%的颗粒霉变拒收。1.1.2小麦的质量指标及验收指标营养指标非营养指标物理性状指标水 分13%粗蛋白质14.0%粗纤维3.0%粗灰分1.8%验收指标水分粗蛋白赤霉病不超过4%杂 质1%容 重（克/升）730验收指标赤霉病容重杂质适用范围：硬质和软质均可使用色泽：红白两种，均适用于饲料生产气味：新鲜麦味,无霉味，异嗅虫情：无活虫验出熏蒸后的小麦需通风一周后方可投入生产亦有污染麦角毒的可能，籽实生长异常者，应检验验收指标气味虫情 验收标准水分：水分标准13.0%，1

7、3.0%水分13.5%按照超出部分从重量上扣除，13.5%拒收。杂质：视杂质多从重量上扣除，2%拒收。赤霉病：4%拒收。1.1.3 豆粕的质量指标以及验收指标营养指标非营养指标物理性状指标水 分13%粗蛋白质43%粗脂肪2.0%粗纤维5.0%粗灰分6.0%验收指标水 分粗蛋白质粗灰分尿素酶活性：0.05-0.40.2%KOH溶解度：70.0-85.0%黄曲霉毒素30ppb验收指标尿素酶活性（0.2%）KOH溶解度 黄曲霉毒素适用范围：本标准适用于以大豆为原料经浸提法提取油后所得饲料用大豆粕。一般性状：色泽：淡黄至淡褐色，颜色过深表示加热过度，太浅则表示加热不足；具有烤大豆香味；如颜色异常，做尿

8、素酶活性和KOH溶解度试验验收指标色 泽验收标准水分：标准13.0%。13.0%水分13.5按照超出部分重量上扣除；13.5%拒收。粗蛋白质：标准43.0%，42.5蛋白质43.0%，按比例从价格上扣除， 1.0%拒收。霉变、异味、变色、色过浅或过深拒收。 注：氢氧化钾蛋白质溶解度：大豆粕样品在规定的条件下，可溶于0.2%氢氧化钾溶液中的粗蛋白质含量占样品中总的粗蛋白质含量的质量百分数。1.1.4 碎米的质量指标及验收指标营养指标非营养指标物理性状指标水 分14.0%粗蛋白质6.0%粗纤维2.0%粗灰分2.5%验收指标水 分粗蛋白质适用范围：本标准适用于饲料用碎米一般性状：颜色：白或淡灰黄色，

9、发霉酸败时则转灰色。味道：新鲜米味，不可有酸败，发霉味碎米变质甚速，应迅速用完，不可久贮验收指标 外观检查验收标准水分：水分标准14.0%，14.0%水分14.5%按照超出部分从重量上扣除，14.5%拒收。感观: 色泽灰暗，霉味明显拒收。1.1.5 大豆油的质量指标以及验收指标抽样方法按照GB/T 5524的要求执行营养指标非营养指标物理性状指标水份及挥发物0.2%酸价(mgkoH/g)3杂质3.5%拒收。水份及挥发物：0.2%水分0.3%按照超出部分从重量上扣除，0.3%拒收。杂质：标准0.2%；0.2%杂质0.3%按照超出部分从重量上扣除，0.3%拒收。1.1.5 棕榈油的质量指标以及验收

10、指标营养指标非营养指标物理性状指标水份及挥发物0.2%酸价(mgkoH/g)3杂质3.5%拒收。水份及挥发物：0.2%水分0.3%按照超出部分从重量上扣除，0.3%拒收。杂质：标准0.2%；0.2%杂质0.3%按照超出部分从重量上扣除，0.3%拒收。28低温加热,油色变黑,有较多析出物拒收。1.2锅炉房检测验收：1.2.1煤的质量指标以及验收指标验收指标其他指标物理性状指标燃烧热4500千卡/千克水份3%拒收燃烧热：4000千卡/千克拒收。 1.2.2锅炉水质硬度检测按GB15762001的规定执行。检测原理：。经过滤处理后的锅炉房用水硬度极低，Ca2+、Mg2+含量极低。铬黑T指示剂能够与M

11、g2+产生络合反应生成紫红色物质且反应灵敏。而EDTA-2NA能够置换铬黑T与Mg2+的络合物产生无色络合物，反应终点时溶液显铬黑T指示剂自身的蓝色。因此可以用该指示剂检测锅炉水中Ca2+、Mg2+是否含量极低，符合锅炉用水标准。检验器材：125ml三角瓶、胶头滴管、酸式滴定管、量筒、500ml烧杯检验试剂：0.5%铬黑T指示剂：0.5g铬黑T加入100ml乙醇中溶解，置于冰箱中保存。NH3-NH4cl缓冲液pH=10:67.5gNH4cl溶于约200ml水中，再加入570ml 15mol/L的氨水，洗涤定容至1L。0.001mol/LEDTA-2NA：0.372gEDTA-2NA溶于纯水，定

12、容至1000ml。检验操作： 取100m透明水样注于250ml锥形瓶中. 加3mlNH4（NH4）CL缓冲溶液和2滴铬黑T指示剂,在不断摇动下,用0.001mol/LEDTA-2NA标准溶液滴定至蓝色为终点,记录所耗EDTA的体积数(V).结果判定：硬度值0.03mmol/L为合格水。硬度(YD)=C*V*103/Vs.mmol/l（1）式中：CC1/2EDTA标准溶液的摩尔浓度，mol/l； V滴定时所耗EDTA标准溶液的体积，ml； Vs水样的体积，ml。1.3验收指标检验方法 1.3.1水分：取一定量具有代表性样品，按附录E方法操作。 1.3.2粗蛋白：取一定量具有代表性样品，按附录H方

13、法操作。 1.3.3容重：取1L样品称重，计算重量与体积的比值。1.3.4杂质（固态原料）：取1Kg样品，计算其杂质含量。1.3.5杂质（液态原料）：取定量样液蒸干、测量固态渣重量与样液重量比值。1.3.6不完善粒、霉变粒：取一定量样品，计算其问题粒与总粒数的比值。1.4.7 粗灰分： 检测原理： 待测试样在550灼烧后所得残渣。用质量百分率来表示。残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，也包括混入饲料中的沙石、土等，故称粗灰分。 检验仪器： 瓷坩埚、分析天平、干燥器、粉碎机（40目）、马弗炉、电炉（1000W) 检验操作： 将干净坩埚放入马弗炉中，于550，灼烧至少30min，移入干燥器中冷却至室

14、温，准确至0.001g。称取约5g试样（精确至0.001g）于坩埚中。 将盛有试样的坩埚放在电炉上250小心加热至试样炭化完全并无烟，转入预先加热到550的马弗炉中灼烧3h，观察是否有炭粒，如无炭粒，继续于马弗炉中灼烧1h，如果有炭粒，将坩埚冷却并用蒸馏水润湿，在（1032）的干燥箱中仔细蒸发至干，再将坩埚置于马弗炉中灼烧1h，取出于干燥器中冷却室温迅速称量，准确至0.001g。 结果判定： 粗灰分（%）=灼烧后灰分重*100/样品重注：允许相对偏差为1%，平行试验取其算术平均数为分析结果。 用电炉炭化时应小心，以防止炭化过快，试料飞溅。灼烧残渣颜色与试样中各元素含量有关，含铁高时为棕红色，含

15、锰高时为淡蓝色。灰化后如果还能观察到炭粒，须加蒸馏水或过氧化氢进行处理。1.4.8酸价：按GB 5530-85执行。 检测原理： 脂肪长期暴露于潮湿闷热的空气中，受到空气的作用，游离脂肪酸被氧化、断裂生成醛、酮及低分子量脂肪酸，产生难闻的恶臭味，称之酸败。中和1g油脂中游离脂肪酸所消耗KOH的mg数称为酸值或酸价，可表示酸败的程度。所以测试酸价，可知油脂的新鲜度。 检验器材： 滴定管、锥形瓶：250ml、试剂瓶、容量瓶、移液管、称量瓶等、天平 检验试剂： 0.1mol/L氢氧化钾(或氢氧化钠)标准溶液； 中性乙醚-乙醇(2:1)混合溶剂：临用前用0.1mol/L碱液滴定至中性。 指示剂：1酚酞

16、乙醇溶液。 检验方法 ： 称取均匀试样35g (W)注入锥形瓶中，加入混合溶剂50ml，摇动使试样溶解，再加三滴酚酞指示剂，用0.1mol/L碱液滴定至出现微红色在30s不消失，记下消耗的碱液毫升数(V)。 判定结果： 油脂酸价按下列公式计算： V N 56.1 酸价(mgKOH/g油) = W式中：V-滴定消耗的氢氧化钾溶液体积，ml;N-碱溶液当量浓度；56.1-氢氧化钾的毫克当量；W-试样重量，g。双试验结果允许差不超过0.2mg KOH/g油，求其平均数，即为测定结果，测定结果取小数点后第一位。注：测定深色油的酸价，可减少试样用量，或适当增加混合溶剂的用量，以酚酞为指示剂，终点变色明显

17、。 附录B（规范性附录）淀粉检测：检测原理：玉米、碎米（或大米）、面粉（或小麦）等谷物饲料中含有丰富的淀粉，其与反应呈现蓝紫色。因此，碘与淀粉发生的碘色反应可以用来判定发酵液是否液化完全，不含有淀粉。检验器材 100ml烧杯、胶头滴管、比色板、玻璃棒、检验试剂0.02mol/L标准碘液：称取13g碘化钾于烧杯中，加入少量水完全溶解。再称取2.5381g碘加入烧杯中，搅拌至完全溶解后转入容量瓶中，洗涤烧杯2至3次，洗涤液转入容量瓶并定容至1L。将配制好的碘液转入棕色瓶贴好标签注明溶液浓度、配制时间、有效期及配制人，置于冰箱中保存。检验时用棕色滴瓶倒取少量使用。检验步骤取少量样品于烧杯中，用胶头滴

18、管吸取少量样品于比色板上，加入1至2滴碘液，用玻璃棒搅拌混匀，观察颜色变化。判定结果 样品溶液与碘反应后，如果溶液变为蓝色，说明样品里含有淀粉；如果溶液颜色不变蓝，显示碘液自身的棕黄色，说明样品中的淀粉已被降解成为小分子物质，如麦芽糊精、葡萄糖和果糖等。A 2.2 附录C（规范性附录）pH值检测：1 pH计检测法检验器材100ml烧杯、1000ml容量瓶、玻璃棒、蒸馏水、废液缸、吸水纸、实验室pH计检验试剂3mol/L Kcl溶液：分析天平称取223.5g Kcl固体于烧杯中，加入约500ml蒸馏水用玻璃棒搅拌至Kcl完全溶解，溶解后的Kcl溶液转入容量瓶中，洗涤烧杯及玻璃棒2-3次，并将洗涤

19、液转入容量瓶，定容止1000ml。转入溶液瓶并贴好标签注明浓度、时间、有效期、配制人等信息。检验操作用烧杯取样约50ml，自然冷却或冷水冲洗使待测样品温度降至40以下。接通pH计电源，打开开关，取下电极盛液套，用蒸馏水清洗探头并用吸水纸轻轻吸干。将探头放入待测液，确保探头完全浸入，按下“读数”键开始测量。判定结果开始测量后，屏幕上测量数值闪动，当电极输出稳定后显示屏自动固定，并显现检测样液pH值。测量结束后要用蒸馏水冲洗并擦拭干净电极探头，浸入盛有3mol/L Kcl溶液的盛液套中。2 精密试纸检测取精密试纸一条，浸入待检测样液中，半秒钟后取出与标准色板比较，得出pH值。B 2.3附录D（规范

20、性附录）葡萄糖浓度检测：检测原理在生物传感分析仪中，一分子葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下能够生成一分子葡萄糖酸与一分子的H2O2。H2O2与电极接触能够产生电信号，该信号强弱与葡萄糖浓度成线性比例关系。经生物传感器可将可将不同葡萄糖浓度信号转变为H2O2再转变为不同强度电信号，再通过电信号强度得出葡萄糖的浓度。检验器材烧杯、100ml量筒、1000ml容量瓶、100ml容量瓶、1ml移液管、10ml移液管、吸耳球、5.4-7.0精密试纸、SBA-40E型生物传感分析仪及其配套葡萄糖生物膜、缓冲液、标准液、进样针等。检验试剂pH=10的NH3-NH4cl缓冲液：称取67.5克NH4cl于烧杯中加入

21、约200ml蒸馏水至完全溶解，再加入15mol/L的氨水570ml，转入容量瓶定容至1000ml备用。或者pH=12的NaOH溶液：称取0.4NaOH固体溶于蒸馏水中，定容至1000ml。SBA缓冲液：从厂家购买固定缓冲剂，用蒸馏水稀释定容备用。SBA标准液：从厂家购买，置于0-4冰箱保存，用带盖小瓶倒取少量供当天测量使用。检验操作准备操作：液体样品用烧杯取样50ml以上，固体样品称取一定重量并加入足量一定体积水使葡萄糖完全溶解。试纸测定其pH值范围，过酸样品用碱性溶液稀释调节至pH=6-8。对于糖浓度较大的溶液，用蒸馏水稀释至糖浓度0-100mg/100ml。将pH值及葡萄糖浓度调至合理范围

22、的待测样品用生物传感分析仪测定结果。SBA-40E型生物传感分析仪测量操作：接通缓冲液流入与废液排出管道，打开开关，仪器自定完成清洗。当进样绿灯亮并闪动，用进样针吸取25ul标准液注入进样口，反应灯亮开始反应。反应结束后进样绿灯再次亮并闪动，重复上述过程直至绿灯亮但不闪动，此时定标完成，注入25ul待测样品开始测量，仪器测量并打印结果。重复测量2-3次取平均测量值。测量完成后用蒸馏水清洗进样针。测量结果值乘以稀释倍数即为原待测液中的葡萄糖浓度。待测原液总浓度测量操作：用量筒量取50ml待测原液称重，重量与体积的比值即为原液浓度。判定结果 （原液中葡萄糖浓度/原液浓度）*100%即为待测液葡萄糖

23、浓度。C 2.4附录E（规范性附录）水分含量检测检测原理检测样品温度高于100时水分会蒸发流失。水份分析仪在测量样品重量的同时，加热单元和水分蒸发通道快速干燥样品，过程中仪器持续测量并即时显示样品丢失的水分含量，干燥程序完成后，最终测定的水分含量值被确定显示。检验器材水份分析仪及其配套样品盘、取样烧杯、玻璃棒检验操作需要粉碎测量的样品先用粉碎机粉碎，过样品筛后备用。将仪器调节水平，接通电源，设定蒸发温度及时间。打开仪器加热罩，取出托盘架放入空样品盘，放回称重后去皮清零。再次取出盘托架和样品盘，放入约5g样品，用玻璃棒搅动使其均匀分布在样品盘上，将其放回仪器内，屏幕显示称重值。合上加热罩，按开始

24、键测量，屏幕即时显示水分蒸发值，测量结束后机器发出警报并显示最终水分蒸发值。判定结果 测量结束时屏幕显示值即为检测样品含水量。D 3.2附录F（规范性附录）乳酸含量检测检测原理在生物传感分析仪中，一分子乳酸在乳酸氧化酶的作用下能够生成一分子丙酮酸与一分子的H2O2。H2O2与电极接触能够产生电信号，该信号强弱与乳酸浓度成线性比例关系。经生物传感器可将可将不同乳酸浓度信号转变为H2O2再转变为不同强度电信号，再通过电信号强度得出乳酸的浓度。检验器材烧杯、100ml量筒、1000ml容量瓶、100ml容量瓶、1ml移液管、10ml移液管、吸耳球、5.4-7.0精密试纸、SBA-40E型生物传感分析

25、仪及其配套乳酸生物膜、缓冲液、标准液、进样针等检验试剂pH=10的NH3-NH4cl缓冲液：称取67.5克NH4cl于烧杯中加入约200ml蒸馏水至完全溶解，再加入15mol/L的氨水570ml，转入容量瓶定容至1000ml备用。或者pH=12的NaOH溶液：称取0.4g NaOH固体溶于蒸馏水中，定容至1000ml。SBA缓冲液：从厂家购买固定缓冲剂，用蒸馏水稀释定容备用。SBA标准液：从厂家购买，置于0-4冰箱保存，用带盖小瓶倒取少量供当天测量使用。检验操作准备操作：用烧杯取样50ml以上，试纸测定其pH值范围，过酸样品用碱性溶液稀释调节至pH=6-8。对于乳酸浓度较大的溶液，用蒸馏水稀释

26、至乳酸浓度0-50mg/100ml。将pH值及乳酸浓度调至合理范围的待测样品用生物传感分析仪测定结果。SBA-40E型生物传感分析仪测量操作：接通缓冲液流入与废液排出管道，打开开关，仪器自定完成清洗。当进样绿灯亮并闪动，用进样针吸取25ul标准液注入进样口，反应灯亮开始反应。反应结束后进样绿灯再次亮并闪动，重复上述过程直至绿灯亮但不闪动，此时定标完成，注入25ul待测样品开始测量，仪器测量并打印结果。重复测量2-3次取平均测量值。测量完成后用蒸馏水清洗进样针。测量结果值乘以稀释倍数即为原待测液中的乳酸浓度。待测原液总浓度测量操作：用量筒量取50ml待测原液称重，重量与体积的比值即为原液浓度。判

27、定结果 （原液中乳酸浓度/原液浓度）*100% 即为待测液乳酸浓度。E 3.附录G（规范性附录）乳化脂肪检测原理乳化脂肪能够溶于水，并与水形成均质稳定的乳状液。在高速离心力作用下不稳定的乳化脂肪溶液会产生分层效果，因而用离心分离法可以检测该乳状液的稳定性。检验器材250ml烧杯、玻璃棒、恒温水浴锅、离心机、10ml离心管数支、胶头滴管检验操作 水溶性检测： 烧杯内装入约100ml水，倒入适量待检验乳化脂肪，用玻璃棒轻轻搅动，观察混合液是否分层，表面是否有油状物。 稳定性检测： 取一定量均质后的乳状液稀释5倍，置于1O m1离心管中，60恒温水浴中恒温5 min，在4 000 rmin 下离心5

28、 min，观察分层情况，记录离心体积，以确 定乳状液的稳定性。 乳状液稳定性=(1-离心管中分层液体积/离心管中总体积） 100%判定结果若乳化脂肪倒入水中以后很快分散混合均匀、乳状液颜色呈乳白色、无分层现象且表面没有油状物，说明乳化脂肪水溶性良好。附录H（规范性附录）水溶性小分子养分含量的测定方法检测原理饲用五粮肽中含有乳化脂肪、麦芽糊精、葡萄糖、果糖、小肽、游离氨基酸、乳酸、乳酸钙和低聚糖等容易吸收的小分子养分物质均溶于水。五粮肽溶于水中，经滤纸或滤布过滤后，烘干滤渣即可测出水溶性小分子养分含量。检验器材100mL三角瓶、烘箱、漏斗、滤纸或滤布、 100mL烧杯、玻璃棒、电子天平检验试剂实

29、验用水为去离子水。检验操作 样品采集：分点采集成品饲料样品，混合均匀后取10克备用。称样：准确称取10g样品，精确到0.0001g。将称好的样品置于三角瓶中。 测定步骤：将称好的样品放于烧杯中，加入100mL蒸馏水，用玻璃棒搅拌，使其溶解；用滤纸或滤布将溶液过滤到三角瓶里，玻璃棒和烧杯里剩余的样品须用蒸馏水反复冲洗，直至干净。收集滤液和滤渣备用；将滤液放置烘箱内，95-105烘干24h后称重，扣除三角瓶重量后即为小分子养分物质重量。（或将滤纸或滤布上不溶物放到烘箱内，95-105烘干24h后称重，扣除滤纸或滤布重量后，即可计算出烘干后的不溶物重量。）结果判定： M1-M2 M-（M3-M4)

30、小分子养分物质的含量（）= 100% = 100% M0.9 M0.9 式中：M1：滤液和三角瓶的重量，g； M2：三角瓶的重量，g。 M：样品的重量，g； M3：滤渣和滤纸（或滤布）的重量，g； M4：滤纸（或滤布）的重量，g； 0.9：样品初始含水系数。附录I（规范性附录）生物量检测检测原理：显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的血细胞计数板上(又称计菌器)，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上25或16，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成lmL菌液中的总菌数。检验器材

31、显微镜、16*25或25*16血细胞计数板、盖玻片，无菌毛细滴管、烧杯、不同规格容量瓶、胶头滴管、检验试剂：0.9%Nacl溶液（生理盐水）：称取0.9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到100毫升。检验操作： 菌悬液制备：以无菌生理盐水将待测液制成浓度适当的菌悬液。 镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数。 加样品：将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴，让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室，一般计数室均能充满菌液，加样时计数室不可有气泡产生。 显微镜计数：加样后静止5min，然后将血细胞

32、计数板置于显微镜载物台上，先用低倍镜找到计数室所在位置，然后换成高倍镜进行计数。调节显微镜光线的强弱适当，对于用反光镜采光的显微镜还要注意光线不要偏向一边，否则视野中不易舌清楚计数室方格线，或只见竖线或只见横线。注：在计数前若发现菌液太浓或太稀，需重新调节稀释度后再计数。一般样品稀释度要求每小格内约有5-10个菌体为宜。每个计数室选5个中格(可选4个角和中央的一个中格)中的菌体进行计数。位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算样品的含菌量。 清洗血细胞计数板：使用完毕后，将血细胞计数板在水龙头用水冲洗干净，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或用吹风

33、机吹干。镜检，观察每小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。判定结果： 计数板有16中格*25小格和25中格*16小格2种，都由400个小格组成。计数室大方格边长为1mm，盖上盖玻片后，载片与盖片之间高度0.1mm，得计数室体积为1*1*0.1=0.1mm3即为1/ 104ml。每个小方格体积为0.1/ 400mm3即为1/ ml。设5个中方格中的总菌数为A，菌液稀释倍数为B， 如果是25个中方格的计数板，则：1mL菌液中的总菌数=A/525104B=50000AB（个） 如果是16个中方格的计数板，则：1mL菌液中的总菌数=A/516104B=32000AB（个

34、）F 3.4附录J（规范性附录）粗蛋白含量检测检测原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。 检验器材：实验室用样品粉碎机或研钵、40 目分样筛、分析天平 、消煮炉或电炉、25mL酸式滴定管 、250mL凯氏烧瓶、凯氏蒸馏装置，常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式、150或250mL锥形瓶、100mL容量瓶、250mL消煮管、凯氏定氮仪。检验试剂硫酸（GB625）:化学纯，含量为98%，无氮。混合催化剂：0.4g 硫酸铜，5个

35、结晶水（GB665）， 6g 硫酸钾（HG3-920）或硫酸钠（HG3-908），均为化学纯，磨碎混匀。氢氧化钠（GB629）：化学纯，40%水溶液（M/V）。硼酸（GB628），化学纯，2%水溶液（M/V）。混合指示剂溶液：甲基红（HG3-958）0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿（HG3-1220）0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。0.1mol/L盐酸标准溶液：移取8.3mL 盐酸(分析纯)，于1000mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液为c(HCl)=0.1mol/L。0.02mol/L盐酸标准溶液：移取1.67mL 盐酸(分析纯)，于1000mL 容量瓶中，用

36、水稀释至刻度，混匀。此溶液为c(HCl)=0.02mol/L。蔗糖，分析纯。硫酸铵，分析纯，干燥。硼酸吸收液：1%硼酸水溶液1000mL，加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL， 0.1% 甲基红乙醇溶液7mL， 4%氢氧化钠水溶液0.5mL，混合，置阴凉处保存期为一个月(全自动程序用)。检验操作 试样的消煮：称取试料0.51g(含氮量580mg)准确至0.0002g，放入凯氏烧瓶中，加入6.4g 混合催化剂，与试样混合均匀，再加入12mL 硫酸和2 粒玻璃珠，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开始小火，待样品焦化，泡沫消失后，再加强火力(360410)直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h。 氨

37、的蒸馏：将试料消煮液冷却，加入60100mL 蒸馏水，摇匀，冷却。将蒸馏装置的冷凝管末端浸入装有25mL 硼酸吸收液和2 滴混合指示剂的锥形瓶内。然后小心地向凯氏烧瓶中加入50mL 氢氧化钠溶液，轻轻摇动凯氏烧瓶，使液溶混匀后再加热蒸馏，直至流出液体积为100mL。降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸馏12min，并用蒸馏水冲洗冷凝管末端，洗液均需流入锥形瓶内， 然后停止蒸馏。 蒸馏步骤的检验：准确称取0.2g 硫酸铵，代替试料，按蒸馏 步骤进行操作，测得硫酸铵的质量分数为21.19 0.2%，否则应检查加碱、蒸馏和滴定各步骤是否正确。滴定：蒸馏后的吸收液立即用0.1mol/L 或0.02

38、mol/L盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变成灰红色为终点。判定结果 粗蛋白含量计算式： 式中： V2滴定试样所需标准溶液体积，mL；V1滴定空白时所需标准酸溶液体积，mL； C盐酸标准溶液浓度，mol/L； m试样质量，g； V试样分解液总体积，mL； V试样分解液蒸馏用体积，mL； 0.0140 每毫克当量氮的克数； 6.25氮换算成蛋白质的平均系数。注： 每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。 当粗蛋白质含量在25以上时，允许相对偏差为1。 当粗蛋白质含量在1025之间时，允许相对偏差为2。 当粗蛋白质含量在10以下时，允许相对偏差为3。 蛋白质中的氮含量一般为1517.6%

39、，按16%计算乘以6.25即为蛋白质，乳制品为6.38，面粉为5.70，玉米、高粱为6.24，花生为5.46，米为5.95，大豆及其制品为5.71，大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83。附录K（规范性附录）粗脂肪含量检测检测原理粗脂肪是将经过处理的、分散且干燥的样品用乙醚或石油醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，回收溶剂后所得到的残留物。常规分析的粗脂肪中除真脂肪外，还含有其他溶于的，如、等物质，故称粗脂肪或乙醚浸出物。检验器材分析天平：感量0.0001g、 电热恒温箱、 电热恒温水浴锅、 粉碎机、研钵、 备有变色硅胶的干燥器、滤纸筒、 索氏抽提器一套(各部件必须洗净，用105 温度烘干，

40、其中抽提瓶烘至恒重)、广口瓶、脱脂线、脱脂棉、脱脂细砂。检验试剂无水乙醚(A.R)检验操作 样品制备：分取除去杂质的净试样3050g ，磨碎通过直径1.0 mm 圆孔筛装入广口瓶内备用。 试样包扎：从备用的样品中，用烘盒称取 2 5g试样，在 105 温度下烘30min ，趁热倒入研钵中，加入约2g 脱脂细砂一同研磨。将试样和细砂研到出油状后，干净地转入滤 纸筒内(筒底塞一层脱脂棉，并在105 温度下烘30min)，用脱脂棉蘸少量乙醚揩净研钵上 的试样和脂肪，并入滤纸筒内，最后再用脱脂棉塞入上部，压住试样。 抽提与烘干：将抽提器安装妥当，然后将装有试样的滤纸筒置于抽提筒内，同时 注入乙醚至虹吸

41、管高度以上，待乙醚流净后，再加入乙醚至虹吸管高度的三分之二处。用 一小块脱脂棉轻轻地塞入冷凝管上口，打开冷凝管进水管，开始加热抽提。加热的温度以 每分钟回流的乙醚在120150 滴，每小时回流七次以上。抽提的时间须视试样含油量而定， 一般在8h以上，抽提至抽提管内的乙醚用玻璃片检查(点滴实验)无油迹为止。抽净脂肪后，用长柄镊子取出滤纸筒，再加热使乙醚回流2 次，然后收回乙醚，取下冷凝管和抽提筒，加热除尽抽提瓶中残余的乙醚，用脱脂棉蘸乙醚揩净抽提瓶外部，然后 将抽提瓶在105 温度下先烘90min ，再烘20min ，烘至恒重为止(前后二次重量差在0.0002g 以内即视为恒重)。抽提瓶增加的重

42、量即为粗脂肪的重量。判定结果 粗脂肪湿基含量、干基含量和标准水杂下含量分别按公式(1)、(2)和(3)计算： 粗脂肪(湿基) = W1/ W 100 .(1) 粗脂肪(干基) = W1/W(100M) 10000 .(2) 粗脂肪(标准水杂下，) = W1 ( 100-M标)/ W ( 100 - M) 100 .(3) 式中： W1粗脂肪重量，g; W试样重量，g ； M试样水分百分率，； M 标试样标准水分、标准杂质之和，。 双试验结果允许差：粮食、油料不超过0.4，大豆不超过0.2，求其平均数，即为 测定结果。测定结果取小数点后第一位。注：回收乙醚的再制，分三个步骤: 除去过氧化物：将乙醚注入分液漏斗中，加入占乙醚量五分之的10硫酸亚铁溶 液(取100g硫酸亚铁溶于600ml 水中，加30ml浓硫酸进行酸化，再用水稀释至1000ml) 充分混合，静置澄清后放出水溶液。 除去乙醇：加入占乙醚量五分之一的10氢氧化钾溶液，振荡洗涤后静置，放出水 溶液，再重复洗涤2 3 次即可。 除去水分和蒸馏：在乙醚瓶中加入适量(占乙醚量的十分之一至五分之一)的小颗粒 无水氯化钙，放置一昼夜，时加振摇，取上层清液进行蒸馏，收集3337之间的 馏分，乙醚的承接器需用冰或冷水进行冷却，同时连接一安全瓶，并将瓶内的气体 排出室外或排入下水道中。