细胞融合技术用

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1、学案优秀小组学案优秀小组： 3组组 6组组 学案优秀个人：学案优秀个人：杜洋洋杜洋洋 柴会祥柴会祥 郭玉良郭玉良 李浦李浦 李光上李光上彭丽莹彭丽莹 卢庆蕊卢庆蕊 牛余洋牛余洋 张彤张彤 张琦张琦 赵昊赵昊 于海洋于海洋 孙贺孙贺 刘福港刘福港 李天笑李天笑从同学们的学案批阅情况看出，存在以下问题：从同学们的学案批阅情况看出，存在以下问题：（1）书写潦草，字迹模糊不清）书写潦草，字迹模糊不清（2）专业术语的运用不恰当）专业术语的运用不恰当（3）存在错别字）存在错别字（4）试剂名称记忆错误）试剂名称记忆错误知识与技能目标：知识与技能目标：1.掌握细胞融合的过程和方法掌握细胞融合的过程和方法2.单

2、克隆抗体的制备过程单克隆抗体的制备过程3.植物体细胞杂交过程植物体细胞杂交过程能力目标：能力目标：培养学生归纳、综合的能力培养学生归纳、综合的能力；情感态度价值观目标：情感态度价值观目标：培养学生科学的世界观、价值观和严谨的科学培养学生科学的世界观、价值观和严谨的科学态度。态度。 1.细胞融合的概念，原理，细胞融合技术概念？细胞融合的概念，原理，细胞融合技术概念？ 2.总结诱导细胞融合的方法？总结诱导细胞融合的方法？ 3.把把AB两种细胞诱导融合，思考可以产生哪几种两细两种细胞诱导融合，思考可以产生哪几种两细胞融合的产物？胞融合的产物？ 4.图解单克隆抗体产生过程？图解单克隆抗体产生过程？ 5

3、.杂交瘤细胞具有什么特点？经过几次筛选得到杂交瘤杂交瘤细胞具有什么特点？经过几次筛选得到杂交瘤细胞，每次筛选的目的是什么？细胞，每次筛选的目的是什么？ 6.单克隆抗体的特点，意义？单克隆抗体的特点，意义？ 7.简述植物体细胞杂交过程，原理？简述植物体细胞杂交过程，原理？ 8.植物体细胞杂交意义？植物和动物细胞融合的诱导方植物体细胞杂交意义？植物和动物细胞融合的诱导方法有何不同？法有何不同？ 讨论要求讨论要求：1、全员参与，热烈讨论。 2、首先同层同学之间讨论，然后跨层同组讨论。 3、组长宏观调控，把握好讨论的方向、合理安排时间 展示要求：1、展示同学在相应区域书写迅速、工整。 2、点评同学纠正

4、错误，强调重难点，条理清晰，表达连贯 我展示我精彩我展示我精彩展示问题（展示问题（要求脱稿要求脱稿）展示小组展示小组点评点评1.简述细胞融合概念，原理，细胞融合技术概念简述细胞融合概念，原理，细胞融合技术概念8组组B/C5组A2.总结诱导细胞融合的方法总结诱导细胞融合的方法6组组B/C5组A3.把把AB两种细胞诱导融合，思考可以产生哪几两种细胞诱导融合，思考可以产生哪几种两细胞融合的产物？种两细胞融合的产物？4组组B/C3组A4.图解单克隆抗体产生过程图解单克隆抗体产生过程2、9组组B/C3组A5.杂交瘤细胞具有什么特点？经过几次筛选得到杂交瘤细胞具有什么特点？经过几次筛选得到杂交瘤细胞，每次

5、筛选的目的是什么？杂交瘤细胞，每次筛选的目的是什么？3组组B/C1组A6.简述单克隆抗体特点，意义简述单克隆抗体特点，意义5组组B/C1组A7.简述植物体细胞杂交过程，原理简述植物体细胞杂交过程，原理1组组B/C9组A8.植物体细胞杂交意义？植物和动物细胞融合的植物体细胞杂交意义？植物和动物细胞融合的诱导方法有何不同？诱导方法有何不同？7组组B/C9组A课堂小结课堂小结 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案风杆菌抗体的实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？、该方案能达到预期效果吗？为什么？4、图中、图中B为为

6、_过程，常用过程，常用_作为诱导剂，该细胞继作为诱导剂，该细胞继承承_的遗传特性，既能的遗传特性，既能_,又能又能_。1、该实验方案的目的是、该实验方案的目的是_3、A是从小鼠的脾脏中取得是从小鼠的脾脏中取得_效应效应_,该细胞能够产生该细胞能够产生_5、C过程指细胞培养，该过程包括过程指细胞培养，该过程包括_培养和培养和_培养两个阶段，其培养两个阶段，其中中_代以内的的细胞属于细胞株代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体制备单克隆抗体B细胞细胞抗体抗体细胞融合细胞融合灭活病毒灭活病毒双亲细胞双亲细胞分泌抗体分泌抗体无限增殖无限增殖原代原代传代传代50B体外培养体外培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞杂

7、交瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群足够数量的细胞群注射到注射到小鼠腹腔小鼠腹腔AC反馈练习反馈练习 2下列不是细胞融合常用方法的是下列不是细胞融合常用方法的是() A细胞培养细胞培养 B灭活的仙台病毒诱导灭活的仙台病毒诱导 C电刺激电刺激 D聚乙二醇作为诱导剂聚乙二醇作为诱导剂A 3动物细胞融合的目的中，最重要的动物细胞融合的目的中，最重要的是是() A克服远缘杂交不亲和的障碍克服远缘杂交不亲和的障碍 B制备单克隆抗体制备单克隆抗体 C培育新物种培育新物种 D生产杂交细胞生产杂交细胞B4. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后，要用特

8、定培养基筛选出杂交瘤细胞，诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞A BC D C 5科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是的是() A经过免疫的经过免疫的B淋巴细胞淋巴细胞 B不经过免疫的不经过免

9、疫的T淋巴细胞淋巴细胞 C经过免疫的经过免疫的T淋巴细胞淋巴细胞 D不经过免疫的不经过免疫的B淋巴细胞淋巴细胞 A6用动物细胞工程获得单克隆抗体，下列用动物细胞工程获得单克隆抗体，下列实验步骤错误的是实验步骤错误的是()A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的的B淋巴细胞淋巴细胞B用纤维素酶处理用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂，使能产生抗体的用聚乙二醇作诱导剂，使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细

10、胞群，培养后提取单克隆抗体需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体B 7单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是克隆抗体的叙述，错误的是 () A特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高 B与抗癌药物结合可制成与抗癌药物结合可制成“生物导弹生物导弹” C体外培养体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体体 D由效应由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌交瘤细胞分泌C学科组长总结学习该节课的收获学科组长总结学习该节

11、课的收获和各小组的表现情况和各小组的表现情况一、动物细胞融合一、动物细胞融合1.1.概念：概念：2.2.结果：结果：3.3.原理：原理：4.4.诱导方式诱导方式指两个或多个动物细胞结合形指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激（动植）物理法：离心、振动、电激（动植）化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEG)（动植）（动植）生物法：灭活的病毒生物法：灭活的病毒(动物）动物）5.5.过程：过程：动物动物细胞细胞A A动物动物细胞细胞B B诱导，融合诱导，融合1 1个完整的个完整的杂交细胞

12、杂交细胞ABAB注意：动物细胞的融合也需要把多个注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞再从中筛选杂交细胞6.6.意义：意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。成为可能。7 7. . 应用：应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段瘤和生物新品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体抗体常规抗体的缺陷常规抗体

13、的缺陷动物体内动物体内刺激刺激浆细胞浆细胞 抗体抗体抗原不纯抗原不纯抗体不纯抗体不纯筛选单一浆细胞筛选单一浆细胞特异性差、纯度低；特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏产量低、反应不够灵敏不能增殖产生大量抗体不能增殖产生大量抗体抗原抗原2. 怎样才能获得单克隆抗体？怎样才能获得单克隆抗体？设计方案：设计方案：一个一个B B淋巴细胞淋巴细胞只分泌一种特异性抗体只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖能无限增殖杂交细胞杂交细胞如何大量生产单克隆抗体？如何大量生产单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用肿瘤细胞无限增殖的特性

14、 利用细胞融合的技术将利用细胞融合的技术将两种细胞融两种细胞融合合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的性的杂交瘤细胞杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞交瘤细胞如何筛选？如何筛选？融融合合方方式式？ 单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程 注射抗原注射抗原B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选细胞融合、筛选杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养筛选，继续培养筛选，继续培养足够数量的、能产生足够数量的、能产生特定抗体的细胞群特定抗体的细胞群体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔单克隆抗体单克隆抗体2、植物体细胞杂交过程示意图、植物体细胞杂交过程示意图: