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1、结核分枝杆菌 GeneXper t 核酸扩增检测操作步骤精品文档结核分枝杆菌GeneXpert核酸扩增检测操作步骤一、准备工作：1. 开机 依次开启： UBS 电源、仪器电源、打印机电源、笔记本电脑电源； 等待笔记本电脑进入系统，出现四个用户图案时，选择用户Cepheid，输入密码：cphd ，等待约一分钟后系统弹出登录窗口，依次输入用户名和密码； 等待 Gene-Xpert操作软件的启动与自检过程，自检过程中软件出现“数据库管理”提示窗，点选“否”；再在“存档”提示窗点选“否”，待模块进展显示“可用”。 仪器预热 15 分钟后再进行检测。2. 耗材准备 标本处理液、 Cartridge 反应
2、盒、 前处理管（带有盖子的试管）、 塑料滴管（每个标本准备 2 支）、 待检标本。3. 样品预处理 前处理管标号或粘贴条形码，再吸取 2ml 标本处理液在前处理管中，加入 1ml 标本；旋紧盖子，旋涡仪振荡 10 秒或剧烈摇动 10-20 次，室温静置 10 分钟，再旋涡仪振荡10 秒或剧烈摇动 10-20 次，室温静置 5 分钟，观察无可见块状痰标本存在。4. 试剂盒 拆开 Cartridge 反应盒包装，小心取出，不要接触到正面的二维码、上面胶盖和后面有尖端区域，避免污染，可在侧面编号或粘贴条码。 小心上拔开启 Cartridge 反应盒蓝色上盖的前部，取处理后的样品2ml，沿样品加入口的
3、内壁缓缓加入反应盒内（避免吸到未液化的粘液部分，吸液量可以略超过两毫升，把尖端残液保留不注入，以免产生气泡）。收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档二、测定操作：1 .在 GeneXpert Dx 系统窗口的工具栏点击创建测试；2. 在“扫描患者ID 条形码”弹窗，选“手动输入患者条形码”，再输入患者的姓名 ；3. 在“扫描样品ID 条形码”弹窗选“手动输入”，再在弹窗内输入痰检的实验室编号 ；4. 在“扫描检测盒条形码”弹窗内，用扫码方法（或手动）输入测试盒上的条码，成功后软件自动指定待运行板块（ (注意：为了保障每个模块有均等的运行机会，软件会选择运行次数最少的模块；但手工可以选择不
4、同的模块）。此时板块顶部绿色指示灯亮起并开始闪烁，点击“开始测试”。打开指定的测定板块（顶部指示灯闪动），将Cartridge 反应盒放入其中，关紧板块前门，检测开始，系统内有测定完成时间倒计时显示，等待检测结束（时间约2h）。三、打印报告1. 在系统窗口的工具栏点击“查看结果”，点击页面下端的“报告”，在对话框中勾选需要打印的结果，点击“生成报告文件”，点“保存”；2. 确认打印机有纸，点“预览 PFD”，再选弹出报告，点“打印”，弹出窗再选“当前页”，点OK 之后打印出报告单。四、关机1. 取出检测完成的 Cartridge 反应盒2. 退出笔记本电脑系统，选择关机按钮，关闭电脑；3. 依
5、次关断：检测设备电源、打印机电源；4. 按下 UPS 电源 OFF 开关，等待电源输出关闭，之后关闭排插上的电源开关。五、质量控制措施（一）样本与保存 ：收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档1.每份样品需收集痰液至少1 mL 痰液，不应使用含明显的食物颗粒的样本和血痰。2.标本保存： 原始痰标本或已处理过（去污染/浓缩）的痰标本：28C 冷藏 , 最长保存 10 天； 在必要的情况下，标本可在室温下（环境温度最高为35C）最长保存 3 天，然后再置于 28C 进行冷藏，前后累计天数最长仍为10 天。3.已加入样品处理剂的标本保存： 原始痰标本或已处理过（去污染/浓缩）的痰标本：如果可在
6、 2-8C 冷藏， 12 小时内完成处理；如果不具备该冷藏条件，需在5 小时内完成处理； 已加人样品的试剂盒的保存（如：遭遇突然停电）：从加入样品后至测试开始时间在4 小时之内，试剂盒可以直接上机测试；如果超过4 个小时，则需要换一个新的试剂盒重新加样再测试。（二）试剂盒与加样1.试剂盒保存于 2-28C，干燥环境中，避免阳光直射。2.开启后，始终保持试剂盒处于直立状态，避免震动、倾斜或坠落！用手取试剂盒时，仅能接触试剂盒的左右两侧，不能接触盒盖、前面的二维码，或者后面的反应管。? 不要在盒盖上进行标记或者妨碍识别试剂盒已有的二维码? 可以在试剂盒的左右两侧手写标记样品编号或粘贴样品编号标签3
7、.用移液管吸取过程中需小心操作，避免产生气溶胶和气泡，不要把制备样品中的固体颗粒加入到试剂盒里，在试剂盒操作说明建议的15 分钟（ 10+5）处理步骤后，如果样本仍然很粘稠，那么不要直接加入试剂匣，建议额外等待10 分钟直至样本完全液化，然后再使用一支新的移液管取样至试剂匣。样本的总体积需要在2-4 毫升之间。4.如果发生以下情况，试剂盒不可使用：收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档检测日期超过试剂盒标注的有效期； 外部潮湿；盖子有破损或者 (意外 ) 开启； 加入处理的样品之后，试剂盒坠落或震荡；位于试剂盒后面的 PCR 反应管破损； 已使用过的试剂盒，扫描之后不能重复使用；试剂盒的
8、包装（指10 只试剂盒的袋装）打开长达6 周以上。（三）实验室环境 ：温度保持在 15-25，并确保机器处于干燥的环境中，避免阳光直射，避免灰尘。（四） GeneXpert 仪器维护指引项目方法维护频率清洁机器表面酒精擦拭每月一次清洁试剂盒仓室酒精擦拭（ 注意：不要清每月一次洁 I-CORE反应管插缝！ ）清洁柱塞杆酒精擦拭每月一次清洁风扇处空气过滤片取下过滤片，吹掉灰尘每月一次更换风扇处空气过滤片更换新的空气过滤片每年或定期更换（必要时）校准机器Cepheid 维修中心每年或每 2 千个测试（以先到者为准）（五）相关事务 ：核对报告、及时登记、工作区整理、清洁与消毒、规范处理废弃物。收集于网络，如有侵权请联系管理员删除
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