实验四酶地特性实验

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1、实用标准文案说明:本实验由四个小实验组成,其中第一个实验(酶的专一性)必做,其他三个小实验选做(至少做一个)写实验报告时, 可以只写需要做的实验内容!实验四酶的特性实验一、实验目的酶是生物催化剂,生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了解酶催化的特异性、温度对酶活力的影响、 PH 对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响,对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验内容本实验由酶的专一性实验、温度对酶活力的影响、PH 对酶活力的影响、激活剂和抑制剂对酶活力的影响4 个小实验组成。(一)酶的专一性1、实验原理本实验以唾液淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例,来说明

2、酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性, 唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性二糖的麦芽糖, 但不能催化蔗糖的水解。用班氏试剂检查糖的还原性。 班氏试剂为碱性硫酸铜, 能氧化具还原性的糖, 生成砖红色沉淀氧化亚铜。2、材料、仪器与试剂(1) 材料:新鲜配制的唾液及其稀释液(2) 仪器:恒温水浴;沸水浴;试管及试管架;(3) 试剂: 2%蔗糖溶液; 溶于 0.3% NaCl 的 0.5%淀粉溶液; 班氏试剂。3、实验操作( 1)稀释唾液的制备唾液的获取用一次性杯取一定量的饮用水,漱口以清洁口腔,然后在嘴中含10-20ml 饮用水, 轻漱2min 左右时间,即可获得唾液的原液,内含唾液淀粉酶。不同稀释度唾液的制

3、备(用大试管)本实验需制备1: 1、 1:5、 1: 20、 1: 50、1: 200 等五个不同浓度的稀释唾液。精彩文档实用标准文案举例说明: 1:5 指的是稀释了5 倍的唾液,制备方法为1 份原液 +4 份蒸馏水。1: 20 指的是稀释了20 倍的唾液,制备方法为1 份 1: 5 的稀释液 +3 分蒸馏水。(2)唾液淀粉酶最佳稀释度的确定(严格按表1 添加顺序做实验,用小试管做实验)表 1唾液淀粉酶稀释度的确定管号1( 1: 1)2( 1: 5)3( 1: 20)4( 1: 50)5( 1:200)0.5%淀粉溶液(滴)44444稀释唾液( ml)1111137恒温水浴中保温5 分钟班氏试

4、剂( ml)11111沸水浴 2 3 分钟实验结果(2)淀粉酶的专一性表 2淀粉酶专一性实验管号1234560.5% 淀粉溶液 (滴)4442%蔗糖溶液(滴)444最佳稀释度唾液( ml)11煮沸过的最佳稀释度唾液( ml)11蒸馏水( ml )1137恒温水浴中保温5 分钟班氏试剂( ml)111111沸水浴 2 3 分钟实验结果(二)温度对酶活力的影响1、实验原理酶的催化作用受温度的影响。 在最适温度下, 酶的反应速度最高。 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色,糊精按其分子的大小,遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色, 麦芽糖遇碘也不呈色,在不同温度下, 淀粉被唾液淀粉酶水的

5、程度可由水解混合精彩文档实用标准文案物遇碘呈现的颜色来判断。2、材料、仪器与试剂( 1)材料:新鲜配制的唾液及其稀释液( 2)仪器:试管及试管架;恒温水浴;冰浴;沸水浴;( 3)试剂: 溶于 0.3% NaCl 的 0.5%淀粉溶液; KI I2 碘溶液;3、实验操作取 4 支干燥的试管,编号后按下表加入试剂:表 3 温度对酶活力影响实验加样顺序管号1230.5% 淀粉溶液( ml )1.51.51.5最佳稀释度唾液(ml )11煮沸过的稀释唾液(ml)1实验结果摇匀后,将1、3 号试管放入37恒温水浴中,2 号试管放入冰水中。10 分钟后 1、 2、3 管均取出(将2 号内液体分两半) ,用

6、 KI I2 溶液来检验1、 2、 3 号管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果。将2 号管剩下的一半溶液放入37水浴中继续保温10 分钟后,再用KI I2 液实验,记录实验结果。(三) PH对酶活力的影响1、实验原理酶的活力受环境PH 值的影响极为显著。不同酶的最适PH 不同。本实验观察PH 对唾液淀粉酶活性的影响。唾液淀粉酶的最适PH 约为 6.8。2、材料、仪器与试剂( 1)材料:新配制的 溶于 0.3%NaCl 的 0.5%淀粉溶液( 2)仪器:试管及试管架;吸管;滴管;恒温水浴( 3)试剂: PH 为 5.0、 5.8、 6.8、 8.0 的缓冲溶液; KI I2 碘溶液;

7、PH 试纸3、实验操作表 4PH 对酶活性的影响实验PH55 8688.0精彩文档实用标准文案缓冲液( ml)33330.5%淀粉溶液( ml )1111向第一个试管加入稀释唾液后,置于37的恒温水浴;等待1min 后向第二个试管加入稀释唾液,置于37的恒温水浴;依次类推!最佳稀释度的唾液(ml)1111待向第四只试管加入唾液2min 后,每隔1 分钟从第 3 管中取出1 滴反应液于白瓷板上,加碘液检查反应进行情况,直至反应液变为淡棕检查淀粉水解程度黄色 (颜色有点淡即可) 。即可从第一只试管依次添加碘液,时间间隔也为 1min。碘液 (滴)11112现象为了更好的理解表格内容,下面对实验过程

8、进行说明:各取缓冲液3ml ,分别注入4 支带有号码的试管,随后于各个试管中添加0.5%淀粉溶液 1ml 和最佳稀释度的唾液1ml 。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔为1 分钟。将各试管中物质混匀,并依次置于37恒温水浴中保温。待向第 4 管加入唾液2ml 后,每隔1 分钟由第3 管取出一滴混合液,置于白瓷板上,加 1 小滴 KI I2 溶液。添加KI I 2 溶液,检验淀粉的水解程度。待混合变为淡棕黄色(颜色有点淡即可)后,向所有试管依次添加1-2 滴 KI I 2 溶液。添加滴KI I2 溶液的时间间隔,从第 1 管起,亦均为1 分钟。观察各试管中物质呈现的颜色,分析pH 对唾液淀粉酶活性

9、的影响。(四)唾液淀粉酶的活化及抑制1、实验原理酶的活性受活化剂或抑制剂的影响, 氯离子为唾液淀粉酶的活化剂, 铜离子为其抑制剂。2、材料、仪器与试剂( 1)材料: 0.5%淀粉溶液;最佳稀释度的唾液( 2)仪器:试管及试管架;恒温水浴( 3)试剂: 1% NaCl 溶液; 1% CuSO4 溶液; KI I 2 碘溶液; 1%Na2SO4 溶液3、实验操作 (注意本实验的淀粉溶液为无NaCl 的淀粉溶液)表 4唾液淀粉酶活化及抑制实验精彩文档实用标准文案管号12340.5%淀粉溶液( ml)1.51.51.51.5最佳稀释度唾液( ml)0.50.50.50.51% NaCl 溶液( ml )0.51% CuSO4 溶液( ml )0.51% Na 2SO4 溶液( ml )0.5蒸馏水( ml )0.537恒温水浴中保温10 分钟KI I2 溶液(滴)2 32 32 32 3现象三、注意事项各人唾液中淀粉酶活力不同,故本实验需要先做一个唾液淀粉酶稀释度的确定实验,以确定最佳稀释度。四、思考题1、何谓酶的最适pH 和最适温度?2、说明底物浓度、酶浓度、温度和pH 对酶反应速度的影响。3、作为一种生物催化剂,酶有哪些催化特点?精彩文档实用标准文案精彩文档

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