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1、1会计学PCR临床应用资料临床应用资料4 基因诊断3 免疫学诊断临床诊断细胞膜细胞核DNA转录 mRNA翻译蛋白质1 形态学诊断2 生化诊断PCRPCR.exe动画No. ofNo. Amplicon Cycles Copies of Target122438416532664201,048,576301,073,741,824Ct值与重复性值与重复性同一样本在相同条件下同时进行同一样本在相同条件下同时进行96次次扩增扩增FQ-PCRCt值与浓度值与浓度不同的模板达到荧光域值时的不同的模板达到荧光域值时的Ct值不同值不同荧光定量荧光定量PCR的临床应用的临床应用临床应用临床应用二 肿瘤1. 肿
2、瘤标志物：癌胚抗原、同功酶、抗体、激素、细胞因子、受体等2. 肿瘤相关基因表达的检测：包括癌基因抗癌基因、肿瘤转移基因及转移抑制基因三 遗传病1. 等位基因检测2. 多基因遗传病的突变检测3. 基因表达异常所致遗传病检测 1.亲子鉴定 2.法医物证 3.PCR-RFLP技术的法医学应用 4.罪犯鉴定 免疫学诊断主要是抗原抗体反应，应用于临免疫学诊断主要是抗原抗体反应，应用于临床通常在体内产生抗体以后，而许多病原体床通常在体内产生抗体以后，而许多病原体的免疫学检测存在较长的的免疫学检测存在较长的“窗口期窗口期”，不利，不利于对疾病的早期诊断；于对疾病的早期诊断；PCRPCR方法直接检测病方法直接
3、检测病原体的原体的DNA/RNADNA/RNA，能大大缩短，能大大缩短“窗口期窗口期”，其高灵敏度的检测显然也有利于疾病的早期其高灵敏度的检测显然也有利于疾病的早期诊断诊断。临床应用一肝炎病毒定量检测HBVHCV临床应用HBVHBV（二） HBV-DNA与“两对半”HBVHBsAg()HBV-DNA() HBeAg ()HBV-DNA()103 copyHBV(三)HBV-DNA定量检测的临床意义3. HBV-DNA定量与预后 a. 含量高者急性肝炎患者易慢性化 b. 癌变的几率明显高于含量低者 1. HBV-DNA定量与HBV复制水平及传染性2. HBV-DNA定量与乙肝药物疗效 a. 专家
4、提出103 copy /ml做为阴性或临床治愈标准 b. HBV-DNA定量分析与干扰素干扰素治疗(前、中、后) c. 拉咪呋啶拉咪呋啶HBV(三)HBV-DNA定量检测的临床意义4. HBV-DNA定量有助于指导怀孕与孕期，哺乳期检查5. 肝脏移植与HBV-DNAMazzaferro等报告：105copy /ml 发生了严重HBV再感染6. 血液制品和献血员的筛选（一）丙型肝炎病毒特点HCV感染特点：1. HCV在血中含量极微 2. 输血后肝炎主要致病因子3. 免疫学标志仅有抗-HCV，非中和抗体，产生时间不一4. 有一部分人感染HCV后，不产生抗-HCV 5. 感染易于慢性化(50-85%
5、)6. 疫苗研制尚不成功单链RNAHCVHCV(二)HCV-RNA定量检测的临床意义2. HCV-RNA载量与抗-HCV滴度、ALT水平之间的相关性。抗-HCV滴度和ALT异常率随着HCV-RNA载量升高而增加。3. HCV-RNA是评价抗病毒治疗效果的重要指标。4. 慢性丙型肝炎长期抗-HCV阳性，这时如果进行HCV-RNA 定量检测可以鉴别活动性、复制程度。STDNGH淋球菌感染与致病1. 人是淋球菌的惟一宿主。2. 2. 发病率最高，在所发病率最高，在所STDSTD疾病中，高达疾病中，高达60%60%左右。左右。3. 发病趋势： a. 男性多于女性。 b. 城市走向农村， c. 高收入阶
6、层向低收入阶层扩展4. 4. 人对淋球菌感染无天然抵抗力，免疫不持人对淋球菌感染无天然抵抗力，免疫不持 久，再感染和慢性患者普遍存在。久，再感染和慢性患者普遍存在。5. 如母亲为淋病患者，婴儿出生时易患上淋球菌性结膜炎CT沙眼衣原体感染与致病1. 严格的细胞内寄生。2. 不仅可致眼部感染、肺部感染、也是STD的主要 病原体。3. 近年来在欧美等国，沙眼衣原体的感染率和危害 性已超过淋球菌而居STD之首。4. 在我国，在非淋球菌性尿道炎中，居首位。在我国，在非淋球菌性尿道炎中，居首位。5. 泌尿生殖道感染，妨碍妊娠。6. 盆腔感染，可致生殖能力损害。UU解脲脲原体感染与致病1. 合成尿素酶，分解
7、尿素2. 在非淋球菌性尿道炎其感染率仅次于衣原 体感染，居第二位。3. 流产超过4次以上者，检出率高达80%。4. 有30-40%男性尿道炎是由感染UU所致。5. 与男性不育相关。男性不育患者精液中，脲原体检出率高达66.6。检出率随精子数减少和精子活动力下降而升高。NGH/CT/UUNGH/CT/UU荧光定量PCR诊断NGH/CT/UU的意义HPV人乳头瘤病毒感染与致病HPV梅艳芳梅艳芳(40(40岁岁) )国家一级演员国家一级演员李媛媛李媛媛(41(41岁岁) )HPVHPV荧光定量PCR检测HPV的意义HPVTBTBTBTB荧光定量PCR检测TB-DNA的意义TORCHTORCHTORC
8、H TOX(二) 人巨细胞病毒感染与致病TORCH-CMV(三) 人风疹病毒感染与致病TORCH-RVTORCH-RV(三) 人风疹病毒感染与致病TORCH-HSVTORCH-HSV(四) 人单纯疱疹病毒感染与致病TORCHTORCHTORCHTOXCMVRVHSV核测核酸DNADNARNADNA检测标本血液、羊水、绒毛膜血液、尿液、乳汁、唾液、精液、分泌物咽拭子、血液、尿液、羊水、胎盘、妊娠物疱疹液、患处刮片、粘膜、血液TORCH检测核酸与检测标本的比较如果是标本量是可以定量的，如血液、脑脊液等，则检测结果报告为：copy/ml如果是标本量不能定量，如分泌物等，则结果只能报告为：copy临床应用二 肿瘤1. 肿瘤标志物：癌胚抗原、同功酶、抗体、激素、细胞因子、受体等2. 肿瘤相关基因表达的检测：包括癌基因抗癌基因、肿瘤转移基因及转移抑制基因NGH/CT/UU荧光定量PCR诊断NGH/CT/UU的意义TBTB荧光定量PCR检测TB-DNA的意义TORCHTORCH-HSV
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