肾病及其生化检测实用教案

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1、前言(qin yn) 肾脏是人体的重要器官，肾病在检验科的检测主要(zhyo)是通过生化来完成，通过一系列血清物质的检测，来判断肾功能及其损害情况。 我室现在开展的项目主要(zhyo)有:BUN,UA,CREA,CO2,CYSC（最新开展），内生肌酐清除率，24小时尿蛋白第1页/共69页第一页，共69页。第2页/共69页第二页，共69页。第3页/共69页第三页，共69页。第4页/共69页第四页，共69页。二）肾小球滤过二）肾小球滤过(l u)(l u)膜的通盘性和滤过膜的通盘性和滤过(l u)(l u)面积面积 此为肾小球本身的问题。炎症，使管腔狭窄或完全阻塞，使滤过此为肾小球本身的问题。炎症

2、，使管腔狭窄或完全阻塞，使滤过(l (l u)u)面积减少，滤过面积减少，滤过(l u)(l u)率减少。率减少。三）肾小球血流量。三）肾小球血流量。 流量减少可使滤出减少：剧烈活动、大失血、缺氧，致交感流量减少可使滤出减少：剧烈活动、大失血、缺氧，致交感NN兴奋。兴奋。第5页/共69页第五页，共69页。 通过肾小管重吸收功能和分泌(fnm)K、NH3、H，达至完成保留机体所需的物质，维持和调节水、电解质及酸碱平衡。第6页/共69页第六页，共69页。第7页/共69页第七页，共69页。 肾脏清除率的概念：肾脏清除率即单位时间内（每分钟）肾排出某物质的总量（尿中浓度尿量）与同一时间该物质血浆浓度之

3、比。 根据肾脏对某一物质的清除率可间接(jinji)测定肾小球滤过率（GFR）。第8页/共69页第八页，共69页。 C=肾清除率，即每分钟有多少毫升血浆(xujing)中该物质被清除（ml/分）P=血浆(xujing)中的浓度（mg/ml）U=尿液中的浓度（mg/ml）V=每分钟尿量（ml/分）UV=每分钟尿液中的排泄量（mg/分）CP=每分钟被肾清除的血浆(xujing)中的含量（mg/分）第9页/共69页第九页，共69页。第10页/共69页第十页，共69页。第11页/共69页第十一页，共69页。 肌酸激酶（运动）肌酸+ATP 磷酸肌酸+ADP 脱水 自动(zdng)去P 肌酐 90%以上由

4、肾小球滤过而从尿中排出，仅710%由肾小管分泌排出，但肾小管对肌酐不重吸收。第12页/共69页第十二页，共69页。 正常人每天更新(gngxn)是恒定的，约更新(gngxn)2%，由肾排出，人体血液中肌酐 的生成可有内、外源性两种如在严格控制饮食条件和肌肉活动相对稳定的情况下，血浆肌酐 的生成量和尿的排出量较为恒定。第13页/共69页第十三页，共69页。第14页/共69页第十四页，共69页。第15页/共69页第十五页，共69页。第16页/共69页第十六页，共69页。第17页/共69页第十七页，共69页。第18页/共69页第十八页，共69页。第19页/共69页第十九页，共69页。 根据Jaff反

5、应原理发展而来的动力学方法，基于肌酐和上述非肌酐色原在反应速度上的差异，即后者与苦味酸发生反应比前者要慢，利用这一点来避开非特异反应的干扰（但不能根本消除）。此法干扰和影响因素较少，速度快，适用于自动分析，近年(jnnin)已被普遍采用。第20页/共69页第二十页，共69页。三）内生肌酐清除率（三）内生肌酐清除率（CCrCCr）第21页/共69页第二十一页，共69页。第22页/共69页第二十二页，共69页。第23页/共69页第二十三页，共69页。体表面积的计算：logA(m2)0.425log体重(tzhng)kg0.725log身高cm2.144第24页/共69页第二十四页，共69页。参考值

6、：根据体表(t bio)面积校正后，范围为80-120ml/min/1.73m2。 第25页/共69页第二十五页，共69页。临床意义临床意义第26页/共69页第二十六页，共69页。第27页/共69页第二十七页，共69页。肾功能试验与肾疾病(jbng)(jbng)生物化学第28页/共69页第二十八页，共69页。 尿素是蛋白质和氨基(nj)酸代谢的最终产物。 一） 尿素的代谢过程。 AA经脱氨基(nj)作用生成氨+CO2（全身各组织），经血液运至肝脏，加上肠道吸收的氨一起在肝脏经鸟氨酸循环而生成尿素。第29页/共69页第二十九页，共69页。第30页/共69页第三十页，共69页。第31页/共69页第

7、三十一页，共69页。三）临床意义三）临床意义第32页/共69页第三十二页，共69页。第33页/共69页第三十三页，共69页。第34页/共69页第三十四页，共69页。BUN为尿毒症诊断指标之一。 肾功能不全的代偿期BUN轻度增高(znggo)（7.0mmol/L），肾功能衰竭失代偿期，BUN中度增高(znggo)（17.9-21.4mmol/L；尿毒症时BUN21.4mmol/L，第35页/共69页第三十五页，共69页。肾前因素引起的血清(xuqng)尿素增加速度常超过血肌酐；而在接受透析的患者因尿素比肌酐分子量小，更易透出，故尿素/肌酐之比有减低趋势。第36页/共69页第三十六页，共69页。第

8、37页/共69页第三十七页，共69页。肾小球滤过(l u)率与血肌酐、尿素浓度的关系 第38页/共69页第三十八页，共69页。血肌酐和尿素(nio s)浓度测定 尿素的测定方法可分为两大类： 1)尿素酶法（直接法）：尿素酶法利用尿素酶催化尿素水解(shuji)生成铵盐，铵盐可用纳氏试剂直接显色、酚-次氯酸盐显色或酶偶联反应显色。 第39页/共69页第三十九页，共69页。尿素测定(cdng)目前多采用尿素酶偶联法： 第40页/共69页第四十页，共69页。2）酚-次氯酸盐显色法：尿素(nio s)酶水解尿素(nio s)生成氨第41页/共69页第四十一页，共69页。3)纳氏试剂显色法： 尿素经尿素

9、酶作用(zuyng)后生成氨，氨可与纳氏试剂（HgI2.2KI的强碱溶液）作用(zuyng)，生成棕黄色的碘化双汞铵。 第42页/共69页第四十二页，共69页。二乙酰一肟法（直接法）： 二乙酰不稳定(wndng)，用二乙酰一肟代替，后者遇酸水解成二乙酰。 第43页/共69页第四十三页，共69页。 试剂中加入(jir)Fe3+或Cd2+及硫氨脲，可提高灵敏度，增加显色稳定性，还能消除羟胺的干扰作用。提高酸的浓度可增加灵敏度。二乙酰一肟与瓜氨酸也有显色。 第44页/共69页第四十四页，共69页。 尿素浓度常用尿素中含有的氮来表示，称为尿素氮。如换算(hun sun)成尿素，可根据60g 尿素含有2

10、8g氮计算，即1g尿素相当于0.467g尿素氮，或是1g尿素氮相当于2.14g尿素。 正常参考值： 血清尿素氮为2.8-7.1 mmol/L，相当于尿素1.8-6.8 mmol/L。 第45页/共69页第四十五页，共69页。肌酐测定。 1)Jaffe反应法：测定肌酐最常用的方法是尿、血清中的肌酐与苦味酸盐作用(zuyng)，生成黄红色的苦味酸肌酐复合物。 第46页/共69页第四十六页，共69页。此法的缺点是 特异性不高，维生素C、丙酮酸、丙酮、葡萄糖、乙酰醋酸、果糖、氨基马尿酸、蛋白质、胍基醋酸酰胺及许多化合物也能与碱性(jin xn)苦味酸盐生成红色。这些能起反应的物质称为假肌酐，相当数量的

11、假肌酐存在于红细胞中。第47页/共69页第四十七页，共69页。 为去除假肌酐的影响，现在(xinzi)常用速率法来测定血肌酐。 乙酰乙酸在20s内已与碱性苦味酸反应完成，其他多数干扰物则在80s后才与苦味酸有较快的反应，而20-80s之间主要是肌酐的反应。因此，血清与苦味酸混合后，分别读取510nm在20s及80s时的吸光度检验肌酐浓度. 第48页/共69页第四十八页，共69页。2）酶联法： 第49页/共69页第四十九页，共69页。 此法特异性高，标本不需去蛋白，特别适用于自动分析。但工具(gngj)酶过多、价格昂贵。 正常参考值：血浆肌酐44-133 mol/L。 第50页/共69页第五十页

12、，共69页。 尿酸是嘌呤核苷酸分解生成嘌呤核苷及嘌呤后，经水解脱氨和氧化，生成的最终产物。尿酸随尿排出，血中尿酸全部通过(tnggu)肾小球滤出，在近曲小管几乎完全被重吸收，故尿酸的清除率极低（10%）。第51页/共69页第五十一页，共69页。 血尿酸： 男性(nnxng)180440mol/L女性120320mol/L第52页/共69页第五十二页，共69页。 第53页/共69页第五十三页，共69页。尿酸测定方法可分为两大类 磷钨酸法：是利用在碱性(jin xn)环境中尿酸具有还原性，无蛋白血滤液中的尿酸可使磷钨酸还原生成蓝色的钨蓝，可进行比色测定，反应如下： 尿酸磷钨酸尿囊素CO2+钨蓝 此

13、法的不足之处是特异性不高，显色褪色速率变化不定，灵敏度低。 第54页/共69页第五十四页，共69页。尿酸酶法：尿酸酶测定方法可分为三种类型： 1)紫外分光(fn un)法：尿酸在282-292nm处有特异吸收峰，当其经尿酸酶作用后，产物在此波长范围无吸收峰，测量酶作用前后吸光度之差，经标准品、测定样品同时处理，可计算尿酸含量。第55页/共69页第五十五页，共69页。 该法灵敏度高，特异性强，其它物质无干扰(gnro)，可用血清直接测定，不需沉淀蛋白，易于自动化，具有简单、快速的优点。 第56页/共69页第五十六页，共69页。2）酶联比色法： 第57页/共69页第五十七页，共69页。3)酶联-紫

14、外分光(fn un)法： 第58页/共69页第五十八页，共69页。 此反应第一步是特异的，但后面的氧化还原反应易受干扰，因体内有许多(xdu)脱氢酶反应，亦可氧化内源性底物而伴有NAD+还原生成NADH，导致结果偏高。 第59页/共69页第五十九页，共69页。收，经小管上皮细胞吞饮作用进入收，经小管上皮细胞吞饮作用进入细胞内，被溶酶体消化分解为氨基细胞内，被溶酶体消化分解为氨基酸供机体再利用，由尿排出者仅占酸供机体再利用，由尿排出者仅占0.1%0.1%。第60页/共69页第六十页，共69页。第61页/共69页第六十一页，共69页。 1.GFR减低时血清升高，血清2m与Scr有正相关关系，其变化

15、较Scr更明显。2.血清2m升高还可见于恶性肿瘤(xngzhngli)及自身免疫病，如系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎。3.高龄者血2m高于低年龄组，反映其肾功有一定减退。4.仅尿2m排出增高说明肾小管重吸收障碍，称为管性蛋白尿，以区别白蛋白增高为主的球性蛋白尿。第62页/共69页第六十二页，共69页。 方法（莫氏试验）: 试验前日晚8时后禁食，试验当日正常进食，每餐含水分约500ml，不再饮任何液体(yt)。晨8时排尿弃去，于上午10时、12时，下午2、4、6、8时（日间尿）及次晨8时（夜间尿）各留尿一次，尿须排尽。准确测定各次尿量及比密（SG）。第63页/共69页第六十三页，共69页。第64页/共69页第六十四页，共69页。第65页/共69页第六十五页，共69页。第66页/共69页第六十六页，共69页。第67页/共69页第六十七页，共69页。第68页/共69页第六十八页，共69页。感谢您的观看(gunkn)。第69页/共69页第六十九页，共69页。