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1、会计学1植物植物(zhw)组织培养教程组织培养教程 李浚明李浚明4第一页，共44页。植物器官培养（植物器官培养（Organ Culture）是指对植物某一器）是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。分为营养器官（根、茎、叶）和繁殖分为营养器官（根、茎、叶）和繁殖(fnzh)器官（器官（果实、种子、花器官）培养。果实、种子、花器官）培养。组织培养指对植物组织（分生组织、表皮组织、薄组织培养指对植物组织（分生组织、表皮组织、薄壁组织）及愈伤组织进行离体培养的技术。壁组织）及愈伤组织进行离体培养的技术。第1页/共44页第二页，共44页。
2、第2页/共44页第三页，共44页。基本程序：基本程序：一、无菌外植体的获得一、无菌外植体的获得(hud)二、初代培养物的建立二、初代培养物的建立三、形态发生和植株再生三、形态发生和植株再生四、培养产物的观察记载四、培养产物的观察记载第3页/共44页第四页，共44页。一、无菌外植体的获得一、无菌外植体的获得(hud)第4页/共44页第五页，共44页。第5页/共44页第六页，共44页。二、初代培养二、初代培养(piyng)物的建立物的建立第6页/共44页第七页，共44页。三、形态三、形态(xngti)发生和植株再生发生和植株再生植株植株植株植株植株植株植株植株第7页/共44页第八页，共44页。四、
3、培养产物的观察四、培养产物的观察(gunch)记载记载第8页/共44页第九页，共44页。根段培养根段培养(piyng)茎段培养茎段培养(piyng)叶培养叶培养第9页/共44页第十页，共44页。n植物叶培养是指以离体的叶片植物叶培养是指以离体的叶片器官为外植体进行培养，再生器官为外植体进行培养，再生植株的过程。植物叶培养常用植株的过程。植物叶培养常用于研究叶形态发生过程以及进于研究叶形态发生过程以及进行光合作用、叶绿素形成、遗行光合作用、叶绿素形成、遗传转化等。传转化等。n培养过程主要包括：愈伤组织培养过程主要包括：愈伤组织诱导；不定芽分化诱导；不定芽分化(fnhu)(fnhu)；无菌苗增殖及
4、生根等。无菌苗增殖及生根等。一、植物一、植物(zhw)叶培养叶培养第10页/共44页第十一页，共44页。叶片叶片(ypin)离体离体培养过程培养过程第11页/共44页第十二页，共44页。ABEC花烛花烛(huzh)叶片离体培养及植株叶片离体培养及植株再生再生第12页/共44页第十三页，共44页。（一）愈伤组织诱导：（一）愈伤组织诱导： 诱导接种的叶片外植体脱分化形诱导接种的叶片外植体脱分化形成愈伤组织的过程。愈伤组织的形成成愈伤组织的过程。愈伤组织的形成通常经历诱导期、分裂期和分化期等通常经历诱导期、分裂期和分化期等阶段阶段(jidun)。 高浓度生长素及适当浓度的细胞高浓度生长素及适当浓度的
5、细胞分裂素可以促进愈伤组织的形成。分裂素可以促进愈伤组织的形成。第13页/共44页第十四页，共44页。（二）不定芽的分化：（二）不定芽的分化： 由脱分化形成的愈伤组织细胞由脱分化形成的愈伤组织细胞分化出不定芽及不定根的过程。分化出不定芽及不定根的过程。 分化过程受细胞分裂素分化过程受细胞分裂素/生长素生长素比值的影响。通常比值的影响。通常(tngchng)添加添加高浓度的细胞分裂素，降低生长素高浓度的细胞分裂素，降低生长素浓度以诱导不定芽的形成。浓度以诱导不定芽的形成。 第14页/共44页第十五页，共44页。（三）不定芽的增殖及生根：（三）不定芽的增殖及生根： 分化形成分化形成(xngchng
6、)的不定芽切下的不定芽切下后，接种于增殖培养基中，促进不定芽后，接种于增殖培养基中，促进不定芽的增殖，增殖的无根苗转接于生根培养的增殖，增殖的无根苗转接于生根培养基中可以诱导不定根的形成基中可以诱导不定根的形成(xngchng)。第15页/共44页第十六页，共44页。二、植物二、植物(zhw)根段培养根段培养 植物根段培养是指以植物植物根段培养是指以植物的根切段为外植体进行离体培的根切段为外植体进行离体培养，再生完整植株的过程。是养，再生完整植株的过程。是研究根系生理代谢、器官分化研究根系生理代谢、器官分化及形态及形态(xngti)(xngti)建成的良好实建成的良好实验体系。培养方法与叶片培
7、养验体系。培养方法与叶片培养相似。相似。 培养过程包括愈伤组织诱培养过程包括愈伤组织诱导、不定芽分化、无菌苗的增导、不定芽分化、无菌苗的增殖与生根等。殖与生根等。第16页/共44页第十七页，共44页。大蒜根尖培养大蒜根尖培养(piyng)及植及植株再生株再生第17页/共44页第十八页，共44页。三、植物三、植物(zhw)茎段培养茎段培养第18页/共44页第十九页，共44页。一、植物花器官一、植物花器官(qgun)的培养的培养(主要主要见胚胎培养和花药培养见胚胎培养和花药培养)二、植物幼果培养二、植物幼果培养(了解了解)第19页/共44页第二十页，共44页。三、植物种子培养：三、植物种子培养：定
8、义：是指对受精后发育不全的未成熟种定义：是指对受精后发育不全的未成熟种子和发育完全的成熟种子进行离体培养的子和发育完全的成熟种子进行离体培养的技术。技术。用途：打破种子休眠，缩短生活周期；挽用途：打破种子休眠，缩短生活周期；挽救远缘杂种，提高杂种萌发率等。救远缘杂种，提高杂种萌发率等。对培养的要求：成熟种子萌发培养所用培对培养的要求：成熟种子萌发培养所用培养基成分养基成分(chng fn)简单，不需生长调节简单，不需生长调节剂；未成熟种子萌发培养则需要添加一定剂；未成熟种子萌发培养则需要添加一定的营养成分的营养成分(chng fn)和生长调节剂。若和生长调节剂。若需要其形成愈伤组织，需要相应的
9、生长调需要其形成愈伤组织，需要相应的生长调节剂及营养物质。节剂及营养物质。第20页/共44页第二十一页，共44页。一、植物分生组织一、植物分生组织(meristem culture)培养：培养：定义：是指对植物的分生组织进行离体培养的定义：是指对植物的分生组织进行离体培养的技术技术(jsh)，包括植物根尖、茎尖等顶端分生，包括植物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛组织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。应用于植物再生和脱病毒研究。第21页/共44页第二十二页，共44页。二、植物茎尖二、植物茎尖(stem tip culture)培养：培养：
10、 茎尖培养（茎尖培养（shoot tip culture）指对植物顶）指对植物顶端的原分生组织端的原分生组织(zzh)和衍生的分生组织和衍生的分生组织(zzh)的培养。小到的培养。小到10100um的茎尖分生组的茎尖分生组织织(zzh)，大到几十毫米的茎尖或更大的芽。，大到几十毫米的茎尖或更大的芽。茎尖培养的成活率与茎尖大小呈正相关。茎尖培养的成活率与茎尖大小呈正相关。 茎尖培养广泛应用于种苗快速繁殖，脱毒茎尖培养广泛应用于种苗快速繁殖，脱毒苗的生产，品种改良和基础理论研究。快繁可苗的生产，品种改良和基础理论研究。快繁可取数毫米大小，脱病毒培养要求取小于取数毫米大小，脱病毒培养要求取小于1mm
11、的茎尖。的茎尖。第22页/共44页第二十三页，共44页。植物茎尖培养植物茎尖培养(piyng)过过程程第23页/共44页第二十四页，共44页。第24页/共44页第二十五页，共44页。第25页/共44页第二十六页，共44页。第26页/共44页第二十七页，共44页。第27页/共44页第二十八页，共44页。第28页/共44页第二十九页，共44页。第29页/共44页第三十页，共44页。培养获得了无病毒苗，证实了这培养获得了无病毒苗，证实了这种理论。同时也获得了大丽花的种理论。同时也获得了大丽花的无病毒苗。并建立了茎尖组织培无病毒苗。并建立了茎尖组织培养的繁殖体系。养的繁殖体系。第30页/共44页第三十
12、一页，共44页。扩繁扩繁 进一步检测病毒进一步检测病毒 移栽移栽获得脱毒植株获得脱毒植株第31页/共44页第三十二页，共44页。第32页/共44页第三十三页，共44页。第33页/共44页第三十四页，共44页。第34页/共44页第三十五页，共44页。virus-freevirus-freetissuetissuevirus particlesvirus particlesfound herefound here第35页/共44页第三十六页，共44页。第36页/共44页第三十七页，共44页。指示植物指示植物(zh sh zh w)第37页/共44页第三十八页，共44页。CMV病毒感染的植株病毒感染的植株(zhzh)叶片叶片第38页/共44页第三十九页，共44页。第39页/共44页第四十页，共44页。第40页/共44页第四十一页，共44页。第41页/共44页第四十二页，共44页。第42页/共44页第四十三页，共44页。第43页/共44页第四十四页，共44页。
植物组织培养教程李浚明4实用教案
