临床血液学检验：血液凝固分析仪

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1、血液凝固分析仪血液凝固分析仪 1血液凝固分析仪教学要求血液凝固分析仪教学要求 掌握掌握血凝仪的检测原理和基本结构血凝仪的检测原理和基本结构 熟悉熟悉半自动、全自动血凝仪的特点，血凝半自动、全自动血凝仪的特点，血凝仪的性能评价以及各种检测方法的优缺点仪的性能评价以及各种检测方法的优缺点 了解了解血凝仪的分类、临床应用、进展血凝仪的分类、临床应用、进展2 请记住哦请记住哦！第二节第二节 目录目录 血液凝固分析仪血液凝固分析仪一、一、血凝仪分型与检测原理血凝仪分型与检测原理二、二、血凝仪基本结构与评价血凝仪基本结构与评价三、三、血凝仪的维护血凝仪的维护四、四、血凝仪临床应用与进展血凝仪临床应用与进展

2、 思考题思考题3血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪（血液凝固分析仪（automated coagulation analyzer,ACA）是采用一定分析技术，对）是采用一定分析技术，对血栓血栓与出血有关成分与出血有关成分自动检测的临床常规检验仪器自动检测的临床常规检验仪器血栓血栓/出血实验室中最基本的设备就是血出血实验室中最基本的设备就是血液凝固分析仪（简称血凝仪）液凝固分析仪（简称血凝仪）4血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述发发 展展 史史 1910年：年：Kottman发明了最早的血凝仪发明了最早的血凝仪 1950年：年：Schnitger和和Gross发明了基于电流发明

3、了基于电流法的血凝仪法的血凝仪 20世纪世纪70年代前为血凝仪的初级阶段年代前为血凝仪的初级阶段5血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述 20世纪世纪70年代：年代：第一代产品第一代产品 单通道、终点单通道、终点法的半自动血凝仪法的半自动血凝仪 20世纪世纪80年代末：年代末：第二代产品第二代产品 多通道、多通道、多种分析方法与原理的半自动血凝仪多种分析方法与原理的半自动血凝仪6各代血凝各代血凝仪的特点仪的特点血液凝固分析仪概述血液凝固分析仪概述 20世纪世纪90年代年代:第三代产品第三代产品 多通道、多通道、多方法、多功能全自动血凝仪多方法、多功能全自动血凝仪7凝血仪发展史凝血仪发展史凝血仪凝

4、血仪 20世纪年代世纪年代 特特 点点1ST 70 单通道、单一测定原理、半自动单通道、单一测定原理、半自动2ND 80 多通道、多种测定原理、半自动多通道、多种测定原理、半自动3RD 90 多种测定原理、全自动多种测定原理、全自动8返回本节目录一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理（一）血凝仪分型（一）血凝仪分型按自动化程度按自动化程度半自动血凝仪半自动血凝仪全自动血凝仪全自动血凝仪全自动血凝工作站全自动血凝工作站9一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理10 （二）血凝仪检测原理（二）血凝仪检测原理主要检测方法：主要检测方法：凝固法凝固法底物显色法底物显色法免疫学法免疫学

5、法干化学法等干化学法等 彼此有何彼此有何不同？不同？一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理11 血凝仪检测原理血凝仪检测原理（二）底物显色法（二）底物显色法 生物化学法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子以底物释放产色基团量的变化测定有关因子（一）凝固法（一）凝固法 生物物理法生物物理法电流法电流法纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白导电导电光学法光学法散射比浊法散射比浊法凝固过程中散射光变化凝固过程中散射光变化透射比浊法透射比浊法凝固过程中吸光度变化凝固过程中吸光度变化浊度变化浊度变化光度变化光度变化双磁路磁珠法双磁路磁珠法钢珠振幅衰减程度判断终点钢珠振幅衰减程度判断

6、终点光电磁珠法光电磁珠法吸光度衰减程度判断终点吸光度衰减程度判断终点超声波法超声波法超声波衰减程度判断终点超声波衰减程度判断终点（三）免疫学法（三）免疫学法 抗原抗体抗原抗体免疫扩散法免疫扩散法火箭电泳火箭电泳双向免疫电泳双向免疫电泳免疫比浊免疫比浊ELISA法法直接比浊直接比浊乳胶比浊乳胶比浊散射比浊散射比浊透射比浊透射比浊一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理121凝固法原理凝固法原理（生物物理法）（生物物理法）凝血因子激活剂加入到待检血浆凝血因子激活剂加入到待检血浆血浆体外血浆体外凝固凝固凝血仪记录凝固过程的变化凝血仪记录凝固过程的变化(光光/电电/机机械运动等械运动等)变化信

7、号转变成数据变化信号转变成数据计算机收计算机收集、处理数据、得出检测结果集、处理数据、得出检测结果呵！是血浆呵！是血浆凝固的变化凝固的变化凝血终点法凝血终点法 检测纤维蛋白原转变成纤维蛋白凝块所需检测纤维蛋白原转变成纤维蛋白凝块所需时间。据此衍生出许多检测方法。时间。据此衍生出许多检测方法。13倾斜试管法倾斜试管法14纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白凝纤维蛋白凝块：倾斜试管时液体可流块：倾斜试管时液体可流动动 纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白凝块凝块:倾斜试管时不再流倾斜试管时不再流动动一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理1. 1. 凝固法凝固法电流法电流法( (钩方法钩方法) )

8、超声分析法超声分析法光学法：光学法：比浊法（透射、散射比浊法），光电磁珠比浊法（透射、散射比浊法），光电磁珠法法磁珠法磁珠法15一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理（1）电流法：钩方法）电流法：钩方法将样品作为电路的一部分，由于纤维蛋白具将样品作为电路的一部分，由于纤维蛋白具有导电性，利用有导电性，利用电流的断与否电流的断与否来判断纤维来判断纤维蛋白的形成与否，即判断凝固终点。蛋白的形成与否，即判断凝固终点。16钩方法原理钩方法原理17纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋纤维蛋白丝白丝:钩可上下自由钩可上下自由移动，无纤维蛋白移动，无纤维蛋白丝钩出。丝钩出。纤维蛋白原纤维蛋白原纤维纤维蛋白丝

9、蛋白丝:纤维蛋白丝纤维蛋白丝可被钩出可被钩出2013120918将电极插入待检样品中，其中一个可以上将电极插入待检样品中，其中一个可以上下运动。当两个电极都血浆中的时候，电下运动。当两个电极都血浆中的时候，电路是连通的路是连通的, ,其中一个电极向上运动离开血其中一个电极向上运动离开血时，电路是断开的。时，电路是断开的。血浆中加激活剂，纤维蛋白形成，运动血浆中加激活剂，纤维蛋白形成，运动电极向上运动时，可钩纤维蛋白丝，由电极向上运动时，可钩纤维蛋白丝，由于纤维蛋白是导电的，故此时电路仍可于纤维蛋白是导电的，故此时电路仍可连通，此时仪器即可将其判为凝固终点。连通，此时仪器即可将其判为凝固终点。一

10、、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理将电极插入待检样品中，其中一个可以上下将电极插入待检样品中，其中一个可以上下运动。当两个电极都血浆中的时候，电路运动。当两个电极都血浆中的时候，电路是连通的是连通的, ,其中一个电极向上运动离开血时，其中一个电极向上运动离开血时，电路是断开的。电路是断开的。19一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理（1）电流法：钩方）电流法：钩方法法一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理血浆中加激活剂，纤维蛋白形成，运动电血浆中加激活剂，纤维蛋白形成，运动电极向上运动时，可钩纤维蛋白丝，由于极向上运动时，可钩纤维蛋白丝，由于纤维蛋白是导电的，故

11、此时电路仍可连纤维蛋白是导电的，故此时电路仍可连通，此时仪器即可将其判为凝固终点。通，此时仪器即可将其判为凝固终点。20（1）电流法：钩方法）电流法：钩方法一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理（2）光学法（比浊法）：）光学法（比浊法）：是根据血浆凝固过是根据血浆凝固过程中浊度的变化，导致光强度变化来测定程中浊度的变化，导致光强度变化来测定相关因子相关因子 2112111光光 学学 法法 光光 路路 图图有何不同？谁优有何不同？谁优光学法仪器应用原理光学法仪器应用原理 透射光+散射光凝固法（散射比浊法）凝固法（散射比浊法）660nm 发色底物法（透射比色法）发色底物法（透射比色法）4

12、05nm 免疫比浊法（透射比浊法）免疫比浊法（透射比浊法）405/575/800nm散色光比浊法透射光比浊法信号 激发光透射光激发光信号 22一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理光学法血凝仪工作流程光学法血凝仪工作流程23（2 2）光学法）光学法血液凝固导致光强度变化判断凝固终点血液凝固导致光强度变化判断凝固终点比浊法比浊法：散射比浊法：散射光散射比浊法：散射光 弱弱 强强透射比浊法：吸光度透射比浊法：吸光度 弱弱 强强 透光度透光度 强强 弱弱光电磁珠法光电磁珠法：光学与凝块检测结合光学与凝块检测结合吸光度吸光度 强强 弱弱 透光度弱透光度弱 强强24散射比浊法散射比浊法/ /透

13、射比浊法透射比浊法光通过样品杯，发生透射和散射光通过样品杯，发生透射和散射样品杯中的血浆在凝固过程中样品杯中的血浆在凝固过程中: :纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白理学性状改变理学性状改变吸光度吸光度/ /散射光：由弱到强散射光：由弱到强. .25 散射比浊法：散射比浊法：根据待测样品在凝固过程中散射光的变化来根据待测样品在凝固过程中散射光的变化来确定凝固终点的检测方法确定凝固终点的检测方法26凝血常见检测方法凝血常见检测方法l 光学法1. 散射光37散乱光散射光强度增加光源凝固反应的进行凝固反应的进行检出部27基本原理基本原理: :来自光发射二极管的光被样品所反射或散来自光发射二极管的光

14、被样品所反射或散射，散射光又将光强度转变成电信号；射，散射光又将光强度转变成电信号；这些电信号再被传送到监测器处理。这些电信号再被传送到监测器处理。28 Optical detectionOptical detection Light scatter Clot reaction Clot reaction progress progress Increased Scattered light intesity Light scater Light Light transmission Clot reaction Clot reaction progress progress Decreased

15、 Transmitted light detectionlight Transmitted light29光源与光探测器呈光源与光探测器呈9090直角直角样本与试剂快速混合的初始：散射光极弱样本与试剂快速混合的初始：散射光极弱随着纤维蛋白凝块的形成：散射光强度渐随着纤维蛋白凝块的形成：散射光强度渐增加增加完全凝固以后，散射光的强度就稳定下来完全凝固以后，散射光的强度就稳定下来. .30试剂混合的瞬间，散射光最弱：试剂混合的瞬间，散射光最弱： 将散射光强度置为将散射光强度置为0 0，在血浆样品凝固完全后在血浆样品凝固完全后, ,散射光强度最强散射光强度最强将散射光强度置为将散射光强度置为1001

16、00，0 0100100之间的光强度变化描成一条之间的光强度变化描成一条曲线，仪器可设定一个点曲线，仪器可设定一个点( (比如比如5050) )所对应的时间为凝血时间。所对应的时间为凝血时间。3132仪器的抗干扰功能仪器的抗干扰功能 黄疸、溶血标本黄疸、溶血标本 仪器选择的检测波长与仪器选择的检测波长与BIL、Hgb的吸收波峰不重叠的吸收波峰不重叠就可避开干扰就可避开干扰。 （CA凝固法检测波长凝固法检测波长660nm）HgbBIL40033Scattered LightTimeNormalLow Fbg PlasmaLipemia PlasmaNormal Plasma0%100%100%0

17、%TimeScattered Light100%0%Abnormal散射光检测散射光检测+ +百分比原理百分比原理-消除本底影响，抗干扰能力强消除本底影响，抗干扰能力强结果精确度高结果精确度高.以牺牲有效信号为代价，以牺牲有效信号为代价，对高浊度标本未必有效对高浊度标本未必有效34透射比浊法透射比浊法根据待测样本在凝固过程中吸光度的变化确定凝固根据待测样本在凝固过程中吸光度的变化确定凝固终点终点光源与光探测器呈直线安排光源与光探测器呈直线安排样本与试剂快速混合的初始：吸光度极弱样本与试剂快速混合的初始：吸光度极弱随着纤维蛋白凝块的形成：吸光度强度渐增加随着纤维蛋白凝块的形成：吸光度强度渐增加完

18、全凝固：吸光度的强度稳定完全凝固：吸光度的强度稳定35透射比浊法示意图透射比浊法示意图36反应体系中浊度增加时，透光度减少（吸光度增加）反应体系中浊度增加时，透光度减少（吸光度增加）透射比浊法示意图透射比浊法示意图 纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白：纤维蛋白： 纤维蛋白凝集，反应体系的浊度发生变化纤维蛋白凝集，反应体系的浊度发生变化37凝血常见检测方法凝血常见检测方法l 光学法2. 透射光37透過光检出部38一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理39啊？为何在啊？为何在50%50%？ Optical detectionOptical detection Light scatter Clo

19、t reaction Clot reaction progress progress Increased Scattered light intesity Light scater Light Light transmission Clot reaction Clot reaction progress progress Decreased Transmitted light detectionlight Transmitted light40散射比浊法散射比浊法/ /透射比浊法比较透射比浊法比较浊度测量原理：散射法合理准确，透射法仪浊度测量原理：散射法合理准确，透射法仪器简单，精度较差器简单

20、，精度较差散射法：光源，样本与接收器成散射法：光源，样本与接收器成直角排列直角排列，接，接收器得到的完全是浊度测量所需的散射光收器得到的完全是浊度测量所需的散射光透射法：光源，样本与接收器成透射法：光源，样本与接收器成直线排列直线排列，接，接收器得到的是很强的透射光和较弱的散射光，收器得到的是很强的透射光和较弱的散射光，前者有效，后者需扣除，要进行校正前者有效，后者需扣除，要进行校正41（2 2）光学法）光学法血液凝固导致光强度变化判断凝固终点血液凝固导致光强度变化判断凝固终点比浊法比浊法：散射比浊法：散射光散射比浊法：散射光 弱弱 强强透射比浊法：吸光度透射比浊法：吸光度 弱弱 强强光电磁珠

21、法：光学与凝块检测结合光电磁珠法：光学与凝块检测结合吸光度吸光度 强强 弱弱42光电磁珠法光电磁珠法原理：原理：样本样本+ +试剂（有一定浊度）试剂（有一定浊度）+ +磁珠磁珠磁珠：在检测过程中始终匀速运动（起搅拌作用磁珠：在检测过程中始终匀速运动（起搅拌作用/ /将纤维蛋白粘附于磁珠上），使液体变清，将纤维蛋白粘附于磁珠上），使液体变清，吸光度下降吸光度下降通过测定吸光度的减少推算出相应凝血物质通过测定吸光度的减少推算出相应凝血物质的浓度的浓度4344评价：评价：采用光学动态速率比浊做为检测基础，能采用光学动态速率比浊做为检测基础，能部分避免黄疸、溶血和脂血等对测定的影部分避免黄疸、溶血和脂

22、血等对测定的影响。响。对于低浓度的凝血物质其浊度的减少（反对于低浓度的凝血物质其浊度的减少（反应液由浊变清）比其浊度的增加更易观察。应液由浊变清）比其浊度的增加更易观察。仍基于吸光度原理，无法从根本上抗干扰仍基于吸光度原理，无法从根本上抗干扰45（2 2）光学法）光学法散射散射/ /透射比浊法透射比浊法光电磁珠法光电磁珠法优点：灵敏度高，仪器结构简单，易于自动化优点：灵敏度高，仪器结构简单，易于自动化缺点：易受干扰（如：样本的光学异常，测试缺点：易受干扰（如：样本的光学异常，测试杯的光洁度，加样中的气泡等）杯的光洁度，加样中的气泡等）46（2 2）光学法）光学法血液凝固导致光强度变化判断凝固终

23、点血液凝固导致光强度变化判断凝固终点比浊法比浊法：散射比浊法：散射光散射比浊法：散射光 弱弱 强强透射比浊法：吸光度透射比浊法：吸光度 弱弱 强强光电磁珠法：光学与凝块检测结合光电磁珠法：光学与凝块检测结合吸光度吸光度 强强 弱弱47一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理 （3）双磁路磁珠法原理）双磁路磁珠法原理48磁珠法原理：磁珠法原理：49当纤维蛋白原没有转变成当纤维蛋白原没有转变成纤维蛋白凝块，磁珠可在纤维蛋白凝块，磁珠可在血浆中转动血浆中转动 纤维蛋白原转变成纤纤维蛋白原转变成纤维蛋白块，磁珠不能维蛋白块，磁珠不能再转动再转动一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理5

24、0双磁路磁珠法原理双磁路磁珠法原理 与光电磁法有何不同？与光电磁法有何不同？测试杯的两侧测试杯的两侧各有一组驱动各有一组驱动线圈，产生恒线圈，产生恒定的交替电磁定的交替电磁场，使杯内去场，使杯内去磁小钢珠保持磁小钢珠保持等幅振荡运动；等幅振荡运动；凝血激活剂加凝血激活剂加入后，随着纤入后，随着纤维蛋白的增多，维蛋白的增多，血浆黏稠度增血浆黏稠度增加，小钢珠运加，小钢珠运动振幅逐渐减动振幅逐渐减弱，将运动幅弱，将运动幅度衰减到度衰减到50时确定为凝固时确定为凝固终点终点 凝血常见检测方法凝血常见检测方法l 磁珠法2. 方法二电磁石高频波高频波37凝固反应的进行血浆与试剂磁珠振动电磁石粘稠度的増加

25、磁珠振幅减少51一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理双磁路磁珠法与光学法原理主要区别双磁路磁珠法与光学法原理主要区别 双磁路磁珠法：双磁路磁珠法：检测血浆凝固过程检测血浆凝固过程磁电磁电信信号变化号变化 光学法：光学法：检测血浆凝固过程检测血浆凝固过程光光信号变化信号变化52磁珠法磁珠法 抗干扰抗干扰 完全不受干扰溶血，黄疸，高脂血症，测试杯完全不受干扰溶血，黄疸，高脂血症，测试杯的光洁度，加样中的气泡等影响的光洁度，加样中的气泡等影响 节约试剂节约试剂 手工法手工法1 1，光学法，光学法1/21/2，磁珠法，磁珠法1/41/453一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理5

26、4 血凝仪检原理血凝仪检原理（二）底物显色法（二）底物显色法 生物化学法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子（一）凝固法（一）凝固法 生物物理法生物物理法电流法电流法纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白导电导电光学法光学法散射比浊法散射比浊法凝固过程中散射光变化凝固过程中散射光变化透射比浊法透射比浊法凝固过程中吸光度变化凝固过程中吸光度变化浊度变化浊度变化光度变化光度变化双磁路磁珠法双磁路磁珠法钢珠振幅衰减程度判断终点钢珠振幅衰减程度判断终点光电磁珠法光电磁珠法吸光度衰减程度判断终点吸光度衰减程度判断终点超声波法超声波法超声波衰减程度判断终

27、点超声波衰减程度判断终点（三）免疫学法（三）免疫学法 抗原抗体抗原抗体免疫扩散法免疫扩散法火箭电泳火箭电泳双向免疫电泳双向免疫电泳免疫比浊免疫比浊ELISA法法直接比浊直接比浊乳胶比浊乳胶比浊散射比浊散射比浊透射比浊透射比浊一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理55 （二）血凝仪检测原理（二）血凝仪检测原理主要检测方法：主要检测方法：凝固法、凝固法、底物显底物显色法、色法、免疫学法、干化学法等。免疫学法、干化学法等。 彼此有何彼此有何不同？不同？一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理2.底物显色法原理：底物显色法原理： 实质为光电比色原理，实质为光电比色原理，是通过测定产色

28、底物的吸光度变化来推测是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性，也称所测物质的含量和活性，也称生物化学法生物化学法 56基本原理基本原理待检样品：含有活性酶或加入活性酶待检样品：含有活性酶或加入活性酶人工合成化合物人工合成化合物（含酶裂解位点（含酶裂解位点 连接产色物质）连接产色物质）解离产色物质解离产色物质 对硝基苯胺对硝基苯胺(PNA)(PNA)样品颜色变化样品颜色变化推出被检物质的含量推出被检物质的含量57凝血因子对发色底物作用后所产生颜色的深浅，可计算凝血因子对发色底物作用后所产生颜色的深浅，可计算所测酶的含量。目前多使用自动化的血凝仪来完成。所测酶的含量。目前多使用自

29、动化的血凝仪来完成。58发色底物法：发色底物法：1.对酶的检测对酶的检测检测凝血酶：检测凝血酶： 凝血酶凝血酶 产色物质产色物质 多肽多肽PNA 在含酶的样品中直接加入产色物质，因为酶可裂解产色在含酶的样品中直接加入产色物质，因为酶可裂解产色物质释放物质释放PNA，监测由于，监测由于PNA释放而导致被检样品在释放而导致被检样品在405nm处光吸收的变化，就可推算样品中酶的活性。如处光吸收的变化，就可推算样品中酶的活性。如对凝血酶、纤溶酶等的检测。对凝血酶、纤溶酶等的检测。 592.对酶原的检测对酶原的检测检测蛋白检测蛋白C： 过量激活剂过量激活剂蛋白蛋白C 活化蛋白活化蛋白C 产色物质产色物质

30、 多肽多肽PNA激活剂激活酶原，活化位点暴露，将产色物质上的激活剂激活酶原，活化位点暴露，将产色物质上的PNAPNA裂解下来。裂解下来。激活剂过量，酶原全部激活，酶原的量同样品中酶的活性成一激活剂过量，酶原全部激活，酶原的量同样品中酶的活性成一定的数量关系。定的数量关系。酶的活性可通过酶的活性可通过PNAPNA释放，即样品吸光度的变化反应出来，推算释放，即样品吸光度的变化反应出来，推算出样品中酶原的含量。出样品中酶原的含量。603.对酶抑制物检测对酶抑制物检测检测检测AT-：AT-过量肝素过量凝血酶过量肝素过量凝血酶 AT-肝素复合物肝素复合物凝血酶剩余凝血酶凝血酶剩余凝血酶 产色物质产色物质

31、 多肽多肽PNA加入过量对应的酶，中和该抑制物加入过量对应的酶，中和该抑制物剩余的酶裂解产色物质释放剩余的酶裂解产色物质释放PNAPNA监测由于监测由于PNAPNA释放而导致光吸收的变化，测出酶的活性释放而导致光吸收的变化，测出酶的活性推算出样品中抑制物的含量。推算出样品中抑制物的含量。61一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理62 血凝仪检测原理血凝仪检测原理（二）底物显色法（二）底物显色法 生物化学法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子（一）凝固法（一）凝固法 生物物理法生物物理法电流法电流法纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋

32、白导电导电光学法光学法散射比浊法散射比浊法凝固过程中散射光变化凝固过程中散射光变化透射比浊法透射比浊法凝固过程中吸光度变化凝固过程中吸光度变化浊度变化浊度变化光度变化光度变化双磁路磁珠法双磁路磁珠法钢珠振幅衰减程度判断终点钢珠振幅衰减程度判断终点光电磁珠法光电磁珠法吸光度衰减程度判断终点吸光度衰减程度判断终点超声波法超声波法超声波衰减程度判断终点超声波衰减程度判断终点（三）免疫学法（三）免疫学法 抗原抗体抗原抗体免疫扩散法免疫扩散法火箭电泳火箭电泳双向免疫电泳双向免疫电泳免疫比浊免疫比浊ELISA法法直接比浊直接比浊乳胶比浊乳胶比浊散射比浊散射比浊透射比浊透射比浊一、血凝仪分型与检测原理一、血

33、凝仪分型与检测原理63 （二）血凝仪检测原理（二）血凝仪检测原理主要检测方法：主要检测方法：凝固法、底物显凝固法、底物显色法、色法、免疫学法免疫学法、干化学法等。、干化学法等。 彼此有何彼此有何不同？不同？一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理3.免疫学法原理免疫学法原理 以纯化的被检物质为以纯化的被检物质为抗原，制备相应的抗体，然后利用抗抗原，制备相应的抗体，然后利用抗原抗体反应对被检物进行定性或定量原抗体反应对被检物进行定性或定量测定。血凝仪使用测定。血凝仪使用免疫比浊法免疫比浊法64三三. .免疫学方法免疫学方法以被检物质为抗原以被检物质为抗原, ,制备相应抗体制备相应抗体抗原

34、抗体特异性反应抗原抗体特异性反应主要方法：主要方法：免疫扩散，火箭电泳，双向电泳，免疫扩散，火箭电泳，双向电泳，ELISAELISA，免疫比浊等免疫比浊等65免疫比浊法免疫比浊法透射比浊法透射比浊法散射比浊散射比浊66透射比浊法透射比浊法光源的光通过待测样本时，由于待测样本中光源的光通过待测样本时，由于待测样本中的的抗原与其对应的抗体反应形成复合物抗原与其对应的抗体反应形成复合物使使其浊度增加，透过光减弱。其减弱的程度其浊度增加，透过光减弱。其减弱的程度与抗原的量成一定的数量关系，通过这一与抗原的量成一定的数量关系，通过这一数量关系，从透射光的强度变化求知抗原数量关系，从透射光的强度变化求知抗

35、原的量。的量。67散射比浊散射比浊 光光AgAg（待测样本）（待测样本）+Ab+Ab（试剂）（试剂） AgAb AgAb 浊度浊度，透过光，透过光 透过光减弱与抗原的量成数量关系，透过光减弱与抗原的量成数量关系，通过这一数量关系，从透射光的强度变化求知通过这一数量关系，从透射光的强度变化求知抗原的量。抗原的量。68一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理69 血凝仪检测原理血凝仪检测原理（二）底物显色法（二）底物显色法 生物化学法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子以底物释放产色基团量的变化测定有关因子（一）凝固法（一）凝固法 生物物理法生物物理法电流法电流法纤维蛋白原纤

36、维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白导电导电光学法光学法散射比浊法散射比浊法凝固过程中散射光变化凝固过程中散射光变化透射比浊法透射比浊法凝固过程中吸光度变化凝固过程中吸光度变化浊度变化浊度变化光度变化光度变化双磁路磁珠法双磁路磁珠法钢珠振幅衰减程度判断终点钢珠振幅衰减程度判断终点光电磁珠法光电磁珠法吸光度衰减程度判断终点吸光度衰减程度判断终点超声波法超声波法超声波衰减程度判断终点超声波衰减程度判断终点（三）免疫学法（三）免疫学法 抗原抗体抗原抗体免疫扩散法免疫扩散法火箭电泳火箭电泳双向免疫电泳双向免疫电泳免疫比浊免疫比浊ELISA法法直接比浊直接比浊乳胶比浊乳胶比浊散射比浊散射比浊透射比浊透射比浊一、血凝

37、仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理70 （二）血凝仪检测原理（二）血凝仪检测原理主要检测方法：主要检测方法：凝固法、底物显凝固法、底物显色法、色法、免疫学法、免疫学法、干化学法干化学法等。等。 彼此有何彼此有何不同？不同？标本采集标本采集静脉全血静脉全血3ml，加入标，加入标准枸橼酸钠抗凝采血管，准枸橼酸钠抗凝采血管，混匀后离心，分离血浆混匀后离心，分离血浆后检测后检测 干化学方法干化学方法71一、血凝仪分型与检测原理一、血凝仪分型与检测原理72 血凝仪检测原理血凝仪检测原理（二）底物显色法（二）底物显色法 生物化学法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有关因子以底物释放产色基团量

38、的变化测定有关因子（一）凝固法（一）凝固法 生物物理法生物物理法电流法电流法纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白导电导电光学法光学法散射比浊法散射比浊法凝固过程中散射光变化凝固过程中散射光变化透射比浊法透射比浊法凝固过程中吸光度变化凝固过程中吸光度变化浊度变化浊度变化光度变化光度变化双磁路磁珠法双磁路磁珠法钢珠振幅衰减程度判断终点钢珠振幅衰减程度判断终点光电磁珠法光电磁珠法吸光度衰减程度判断终点吸光度衰减程度判断终点超声波法超声波法超声波衰减程度判断终点超声波衰减程度判断终点（三）免疫学法（三）免疫学法 抗原抗体抗原抗体免疫扩散法免疫扩散法火箭电泳火箭电泳双向免疫电泳双向免疫电泳免疫比浊免疫比

39、浊ELISA法法直接比浊直接比浊乳胶比浊乳胶比浊散射比浊散射比浊透射比浊透射比浊返回本节目录二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价 （一）血凝仪基本结构：（一）血凝仪基本结构： 1.半自动血凝仪基本结构半自动血凝仪基本结构 主要由样本预温槽和试剂预温槽、加样主要由样本预温槽和试剂预温槽、加样器、检测系统（光学、磁场）及微机组成器、检测系统（光学、磁场）及微机组成 73全自动呢全自动呢 ？二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价2.全自动血凝仪基本结构全自动血凝仪基本结构 包括样本传送及处理装置、包括样本传送及处理装置、试剂冷藏位、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系

40、统、计算机、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设备及附件等输出设备及附件等74就这么简单？就这么简单？二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价（二）血凝仪评价（二）血凝仪评价 1.一般性评价：产品质量一般性评价：产品质量50%；价格价格25%；厂商评估；厂商评估10%；担；担保保5%；售后服务；售后服务5%；可接受性；可接受性5%。75二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价 2.技术性能评价：技术性能评价： 精密性、准确性、精密性、准确性、线性范围、携带污染线性范围、携带污染率、干扰因素、可比率、干扰因素、可比性分析等几方面性分析等几方面76携便式血凝仪携便式

41、血凝仪二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价（三）血凝仪的特点（三）血凝仪的特点 1.半自动血凝仪：半自动血凝仪：手工加样加试剂；手工加样加试剂；操作简便；应用检测方法少；操作简便；应用检测方法少；价格便宜；速度慢；测量精度好价格便宜；速度慢；测量精度好于手工，但低于全自动于手工，但低于全自动77哦？为什么？哦？为什么？二、血凝仪的基本结构与评价二、血凝仪的基本结构与评价（三）血凝仪的特点（三）血凝仪的特点 2.全自动血凝仪：全自动血凝仪：自动化程度高；检自动化程度高；检测方法多；通道多，速度快；项目任测方法多；通道多，速度快；项目任意组合，随机性；测量精度好，易于质意组合，随机

42、性；测量精度好，易于质控和标准化；智能化程度高，功能多；控和标准化；智能化程度高，功能多；价格昂贵；对操作人员的素质要求高。价格昂贵；对操作人员的素质要求高。78返回本节目录三、血凝仪的维护三、血凝仪的维护（一）半自动血凝仪的维护（一）半自动血凝仪的维护 保持测试槽清洁，严禁有异物进入；保持测试槽清洁，严禁有异物进入；避免阳光直晒和远离强热物体；防止受潮和避免阳光直晒和远离强热物体；防止受潮和腐蚀；仪器和加珠器都必须远离强电磁场干腐蚀；仪器和加珠器都必须远离强电磁场干扰源；电源电压为扰源；电源电压为220V10，最好使用稳，最好使用稳压器；使用一次性测试杯及钢珠压器；使用一次性测试杯及钢珠79

43、三、血液凝固分析仪的维护三、血液凝固分析仪的维护（二）全自动血凝仪的维护（二）全自动血凝仪的维护 清洗或更换空气过滤器；检查及清清洗或更换空气过滤器；检查及清洁反应槽；清洗洗针池及通针；检查洁反应槽；清洗洗针池及通针；检查冷却剂液面水平；清洁机械运动导杆和冷却剂液面水平；清洁机械运动导杆和转动部分并加润滑油；及时保养定量装转动部分并加润滑油；及时保养定量装置；更换样品及试剂针；数据备份及置；更换样品及试剂针；数据备份及恢复等恢复等 80返回本节目录四、血凝仪的临床应用与进展四、血凝仪的临床应用与进展（一）临床应用（一）临床应用1.凝血系统的检测凝血系统的检测 2.抗凝系统的检测抗凝系统的检测3

44、.纤维蛋白溶解系统检测纤维蛋白溶解系统检测 4.临床用药的监测临床用药的监测 81四、血凝仪的临床应用与进展四、血凝仪的临床应用与进展（二）进展（二）进展 主要体现在：多方法、多功能、主要体现在：多方法、多功能、快速高效；智能化程度高，软件开快速高效；智能化程度高，软件开发进一步完善；全自动血凝分析仪发进一步完善；全自动血凝分析仪工作站；床旁分析；在临床中的工作站；床旁分析；在临床中的应用日趋广泛应用日趋广泛82返回本节目录了解了解1.了解血凝仪的分类及临床应用。了解血凝仪的分类及临床应用。2.了解血凝仪的进展和性能评价。了解血凝仪的进展和性能评价。熟熟 悉悉1. 熟悉血凝仪各种检测方法的优缺点。熟悉血凝仪各种检测方法的优缺点。 2. 熟悉半自动、全自动血凝仪的特点。熟悉半自动、全自动血凝仪的特点。掌掌 握握掌握血凝仪的检测原理。掌握血凝仪的检测原理。83重点难点重点难点血凝仪检测原理和各种检测方法的比较。血凝仪检测原理和各种检测方法的比较。842013120985