现代生物技术题后

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1、绝密启用前2013-2014学年度?学校8月月考卷现代生物技术考试范围：xxx；考试时间：100分钟；命题人：xxx题号一二总分得分注意事项：1答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息2请将答案正确填写在答题卡上第I卷（选择题）请点击修改第I卷的文字说明评卷人得分一、选择题（题型注释）1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是A都需用培养箱 B都须用液体培养基C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性【答案】C【解析】动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行，动物成体的体细胞离体培养用液体培养基，不能体现细胞的全能性，植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能体

2、现细胞的全能性。故C正确。2将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新置入大肠杆菌的细胞内，通过发酵就能大量生产人生长激素。下列叙述正确的是A.发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初级代谢产物B.大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传C.大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤与尿嘧啶含量相等D.生长激素基因在转录时需要解旋酶和DNA连接酶【答案】B【解析】初级代谢产物是指微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素等。生长激素是蛋白质是大分子，不是初级代谢产物，A错；大肠杆菌质粒是小型环状DNA分子，所以不会出现尿嘧啶，C错；DNA连接酶是连接磷酸二

3、酯键的，在转录是不需要，所以D错；答案B。考点定位：主要考查微生物培养过程中的一些基础知识。3下列关于基因工程的叙述，错误的是 ( )A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达【答案】D【解析】试题分析：目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因，可来自动、植物或微生物，受体细胞是指表达目的基因的细胞，可来自动、植物或微生物；限制性核酸内切酶和DNA连接酶在获取目的基因和构建基因表达载体必要的工具酶；大肠杆菌属于原核生物，没

4、有内质网和高尔基体，不能对核糖体上合成的人胰岛素原进行加工修饰，所以胰岛素原没有生物活性；载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞，但不能促进目的基因的表达。考点：本题考查基因工程的知识。点评：本题难度中等，属于考纲理解层次。解答本题的关键是理解载体上的抗性基因的目的是用于检测目的基因是否导入受体细胞，即用于筛选含重组DNA的细胞。4下列事实能体现细胞全能性的是A棉花根尖细胞经诱导形成幼苗B单细胞的DNA在体外大量扩增C动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体D小鼠体细胞经诱导培育成小鼠【答案】AD【解析】B单细胞DNA体外扩增是DNA的扩增，不能说明细胞具有全能性，动物杂交瘤细胞不能产生生物个体，所

5、以，也不能说明细胞具有全能性，答案AD。考点定位：考查细胞全能性知识。5下列有关基因工程中限制性内切酶的描述，错误的是 （ ）A.一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列B.限制性内切酶的活性受温度影响C.限制性内切酶能识别和切割RNA D.限制性内切酶可从原核生物中提取【答案】C【解析】生物体内有能识别并切割特异性双链DNA序列的一种核酸内切酶，它是一种可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故叫限制性内切酶（简称限制酶）。限制性内切酶只能识别和切割D

6、NA，不能识别和切割RNA。6“猪沼茶”是华南山地丘陵地区常见的生态农业模式，有种植（茶树）、养殖（猪）、农户（人）和沼气生产（微生物）四个子系统构成。该生态农业模式（ ）。A. 是由茶树、猪、人和微生物组成的生态系统B. 实现了物质和能量在系统中的多级循环利用C. 使整个生产过程进入了废物资源化的良性循环D. 注重系统内部的自身调节作用，不需要外部投入【答案】C【解析】本题考查的知识点是生态系统的结构与功能和生态工程的基本原理，生态系统是生物群落与无机环境的有机结合体，生态系统中的物质可以多级循环利用，但能量流动是单向不循环和逐级递减的，生态农业就是运用了以上生态学原理使整个生产过程进入了废

7、物资源化的良性循环。此外生态系统还是一个开放的系统，它总是与外界进行物质、能量与信息的交流，不断有能量和物质的进入和输出，对于生态农业而言，还必须有人力的介入。7下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，正确的是A绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性B卵裂球细胞的体积随分裂次数增加而不断增大C囊胚的滋养层细胞具有发育全能性D原肠胚发育分化形成内外两个胚层【答案】A【解析】同种动物精子、卵细胞表面存在的特异性受体蛋白，决定了只有同种动物精卵才能结合，A正确。受精卵随着分裂的进行，其细胞的体积在逐渐变小，B错误。囊胚期的细胞开始出现分化，其外表的一层细胞即滋养层，只能发育成胚胎的附属结构或胚外结构

8、，不具有发育的全能性，C错误。囊胚可继续分化城的原肠胚具有三个胚层，D错误。考点定位:本题结合受精作用及早期胚胎的发育综合考查胚胎工程的有关知识，属于识记层次的考查。8天然的玫瑰没有蓝色花，这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B，而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰，下列操作正确的是A提取矮牵牛蓝色花的mRNA，经逆转录获得互补的DNA，再扩增基因BB利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D将基因B直接导入大肠杆菌，然后感染并转入玫瑰细胞【答案】A【解析】控制蓝色色素合成的基因B即为我们所需要的

9、目的基因，可通过逆转录法获得基因B，再进行扩增以增加其数量；基因文库中保存的是各基因片段，提取时无须使用限制性核酸内切酶；为使目的基因在受体细胞中稳定存在且能向下一代遗传，应先在体外使用DNA连接酶构建基因表达载体，然后再导入大肠杆菌。考点定位:通过特定的实例考查基因工程的相关概念及操作要领，属于对识记、理解层次的考查。9为了解决粮食生产和环境保护问题，实现农业可持续发展，当前科学、有效的途径是（ ）合理开发海洋，寻找新的粮食资源控制人口增长，协调人与自然和谐发展增加化肥和农药的使用，提高作物产量开荒辟地，围湖造田，扩大粮食种植面积利用现代生物技术，培育具有较高光合效率的作物品种A. B. C

10、. D. 【答案】B【解析】本题考查的知识点是人口增长对环境的影响和生态农业、生态工程的有关知识点。“可持续发展”的战略思想是指经济发展不仅要满足当代人的需要，还要不危害后代人的发展能力；生态利益应和社会利益与经济的增长协同考虑。增加化肥和农药的使用提高作物产量的同时又造成严重的农产品污染和环境污染，而开荒辟地、围湖造田扩大粮食种植面积的同时又破坏了生态环境甚至导致洪涝灾害等问题。10动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息不能获得的结论是A. 正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B. 有无血清对正常细胞培养的影响不

11、同C. 培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D. 培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大【答案】A【解析】从题图中曲线可看出培养基中有无血清对癌细胞的培养影响不大，二者在细胞数曲线上差不多。正常细胞的培养过程中有无血清所获得的细胞数差距较大，有血清的培养基在相同时间内培养得到的细胞数远远多于无血清的培养基所获得的细胞数。癌细胞培养与正常细胞培养二者的差距比较大，正常细胞达到一定的数目后不再增加，而癌细胞却能不断增加。11在社会主义新农村建设中，四川某地通过新建沼气池和植树造林，构建了新型农业生态系统（如图所示），下列有关叙述不正确的是（ ）。A. 该生态系统中，处于第二营养级的生物有人和家

12、禽家畜B. 该生态系统中，人的作用非常关键，植物是主要成分C. 该生态系统的建立，提高了各营养级间的能量传递效率D. 沼气池的建造和植树造林，提高了该生态系统的稳定性【答案】C【解析】新型的农业生态系统的建立仅仅是实现了能量的多级利用,但还是人工建立的生态系统,它的稳定性与自然的生态系统相比还是要差些,在人工建立的生态系统中,人的作用是非常关键,离开了人的作用,生态系统就会崩溃，而在一个生态系统中，生产者和分解者是必不可少的两个因素，生产者为消费者提供食物的来源，分解者把生产者的残枝和落叶以及消费者的排遗物分解，为生产者进行光合作用提供原料。所以植物是主要成分，也提高了生态系统的稳定性，人和家

13、禽家畜都可以农作物为食，是第二营养级的生物 ，该生态系统的建立，不能提高各营养级的能量传递效率，可以实现能量的多级利用。第II卷（非选择题）请点击修改第II卷的文字说明评卷人得分二、综合题（题型注释）12肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图。请回答：（）进行过程时，需用酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为。（）进行过程时，需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。（）研究

14、发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图。据图分析，可从细胞提取进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中（RASmRNA/RAS蛋白）含量减少引起的。【答案】（10分）（1）限制性核酸内切酶（或限制） 启动子（2）胰蛋白（3）RNA RAS蛋白【解析】（1）过程表示基因表达载体的构建，在该过程中需要用限制酶对载体进行切割以便于目的基因的插入（限制性核酸内切酶，简称限制酶，写其他的不得分）；启动子是一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶结合和识别的位点，RNA聚合酶结合到该位点，可驱动转录过程。（2）过程表示动物细胞培养，培养过程中出现接

15、触抑制后可以用胰蛋白酶处理，使之分散成单个的细胞，之后分装到其他培养瓶里面进行传代培养。（3）判断目的基因是否在受体细胞中转录，可用分子杂交技术来进行，从细胞中提取mRNA和用放射性同位素或者荧光标记的目的基因单链DNA片段进行杂交。根据题中信息“肺组织细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达就增强，引发肺癌”导入let7基因后，肺癌细胞受到抑制，说明RAS基因表达减弱，导致细胞中的RAS蛋白质含量减少进而导致癌细胞受抑制。考点定位：本题主要考查有关基因工程和细胞工程中的知识，涉及的知识点主要有表达载体的构建、目的基因的检测、动物细胞培养等。属于对识记层次的考查。13为扩大可耕地面积，

16、增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处，DNA连接酶作用于处。（填“a”或“b”）。（2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和法。（3）由导入目的基因的水稻细胞培育成植株需要利用 技术，该技术的核心是和。（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要用的方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。【答案】(1)a a (2)基因枪（花粉管通道）（3）植物组织培养 脱分化（去分化） 再分化（4）耐盐基因（

17、目的基因） 一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）【解析】 限制性内切酶的切点选择很严格，只会切断某段特定DNA序列中的某个特定位点磷酸二酯键，而DNA连接酶可以将该键连接起来。重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法除了农杆菌转化法外，还有基因枪法和花粉管通道法。导入外源基因的细胞需要利用植物组织培养技术将其培养为植株，过程为：取材、去分化（或脱分化）形成愈伤组织、再分化形成试管苗、移栽培育成完整植物体。转基因是否成功，可测定是否有转基因产物产生，也可通过改变条件观察植物性状的变化来加以确定。14已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS

18、病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：（1）实验步骤所代表的反应过程是 。（2）步骤构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和 酶，后者的作用是将限制性内切酶切割的 和 连接起来。（3）如果省略步骤而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能 ，也不能 。（4）为了检验步骤所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用 与 进行抗原抗体特异性反应实验，从而得出结论。（5）步骤和的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S

19、蛋白的氨基酸序列 （相同、不同），根本原因是 。【答案】（1）逆转录 （2）DNA连接载体 S基因（3）复制合成S基因的mRNA（4）大肠杆菌中表达的S蛋白SARS康复病人血清（5）相同表达蛋白质所用的基因相同【解析】本题考查了基因工程的工具、步骤、应用和基因的功能等相关知识。题（3）中把S基因直接导入大肠杆菌，S基因很难把自己整合到细菌的DNA上，这样的S基因是无法复制和转录的；要想检验大肠杆菌中表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同作用，必须要获得病毒S蛋白，根据免疫知识，SARS康复病人血清应该含有该物质；第（5）小题考查了基因与性状相关知识，由于基因相同，所表达的蛋白质中氨基酸序列也应相同

20、。15天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是，用将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子，以完成工程菌的构建。（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用检测；将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，该现象发生的原因是。（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利

21、用淀粉能力的大小？ （4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？ 【答案】（1）限制酶（限制性内切酶） DNA连接酶 导入受体细胞（2）DNA分子杂交技术 抗原抗体杂交或淀粉酶活性 该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，产生透明圈（3）测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量（4）工具酶主要来自微生物；最重要的目的基因供体库之一；目的基因的载体之一；作为受体细胞；提供用于发酵的工程菌【解析】基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体；基因工程操作的步骤为提取目的基因目的基因与运载体结合将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与表达。目的基因

22、的检测有多种手段，如用基因探针对目的基因进行标记，然后在宿主细胞中检测。DNA分子杂交技术：利用被标记DNA单链与目的基因中的DNA链进行碱基互补配对的原理组成DNA双链，如果双链出现杂交带就表明目的基因已导入。抗原抗体杂交技术：检测目的基因是否能翻译出蛋白质，利用抗体对抗原的专一性。全基因组PCR检测（前提是宿主细胞没有该基因）：看是否有目的基因上目的大小片段，再做琼脂糖电泳鉴定。微生物在基因工程具有重要的作用，如获取运载体，用来生产多肽药物等。16白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。以白菜为母本、甘蓝为父本。经人工授粉后，将雌蕊离体培养，可得到“白菜甘蓝”杂种幼苗。请回

23、答问题：白菜和甘蓝是两个不同的物种，存在_隔离。自然条件下，这两个物种间不能通过_的方式产生后代。雌蕊离体培养“白菜甘蓝”杂种幼苗获得，所依据的理论基因是植物细胞具有_。为观察“白菜甘蓝”染色体数目和形态，通常取幼苗的_做临时装片，用_染色。观察、计数染色体的最佳时期是_ 。二倍体“白菜甘蓝”的染色体数为_。这种植株通常不育，原因是减数分裂过程中_。为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜甘蓝”，这种变异属于_。【答案】生殖 杂交（有性生殖） 全能性根尖（茎尖） 醋酸洋红（龙胆紫、碱性） 有丝分裂中期19 没有同源染色体配对的现象 染色体变异【解析】经人工授粉后得到的雌蕊进行离体培养，这样得

24、到的雌蕊主要利用的是融合的受精卵，它是由白菜的卵细胞（n=10）和甘蓝的精子（n=9）结合而来。这样培育得到的“白菜甘蓝”是异源二倍体，染色体数是2n=10+9=19，由于在杂种体内没有同源染色体，在减数分裂时联会紊乱，不能形成正常的配子，所以通常是不育的；可用秋水仙素处理使染色体数目加倍得到可育的四倍体“白菜甘蓝”。幼苗中细胞分裂活动最旺盛的是根尖的分生区，在有丝分裂的中期染色体形态固定、数目清晰可数，是对染色体进行观察和计数的最佳时期。17下图为几种含氮物质相互转化示意图，请据图回答(1)与人体细胞相比，能完成过程生物的细胞结构的主要特点是 。(2)能完成过程生物的可遗传变异来源一般是 。

25、(3)疏松土壤对过程的影响分别是 。(4)若血液中催化图中 (填序号)过程的某种酶含量大增，则医生将认为此人可能患有肝炎。(5)人体细胞通过过程最多约可产生 种氨基酸。(6)不能独立进行过程的生物的遗传物质是 。【答案】(1)无成形的细胞核 (2)基因突变 (3)抑制 促进 (4) (5)12 (6)DNA或RNA【解析】本题以“氮”为中心，涉及的内容有固氮微生物、原核生物、遗传变异、蛋白质代谢、呼吸作用、硝化作用、遗传信息的传递过程等知识。18运用基因工程知识填空：转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有Pst、Sma、EcoR、Apa等四种限制酶切割位点。请回答： （1）构建含抗病基因的

26、表达载体A时，应选用限制酶 ，对 进行切割。（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。【答案】（1）Pst、EcoR 含抗病基因的DNA 、质粒 （2）抗卡那霉素基因（3）全能性 脱分化、再分化【解析】（1）从图可看出，只有Pst、EcoR两种酶能保持抗病基因结构的完整性，所以构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶Pst、EcoR两种酶，对抗病基因的DNA和质

27、粒进行切割。（2）卡那霉素能抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因，以此作为标记基因。（3）香蕉组织细胞具有全能性，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中、依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的脱分化和再分化。19某研究组对籼稻开展了组织培养及相关研究，请回答下列问题：（1）2,4D常用于籼稻愈伤组织的诱导， 对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化，在配制分化培养基时需（填“升高”、“保持”或“降低”）2,4D的浓度。（2）当籼稻愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有

28、分生能力的绿色芽点，但继续出芽，通常在培养基中添加，以促进幼苗形成。（3）研究中用显微镜可以观察到的现象是（填下列序号）。绿色芽点细胞排列松散刚融合的籼稻和稗草杂交细胞发生质壁分离胚状体细胞中有叶绿体分化的愈伤组织的各细胞的形态大小一致（4）经组织培养筛选获得的籼稻叶绿素突变体，其叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照，叶绿素总量不变。某同学用（填序号：绿色红色蓝紫色黄色）光照射突变体和对照叶片，检测到两者光合放氧差异不大。若取等量色素提取液进行层析，会发现突变体第条色素带（自上而下）窄于对照组。（5）胚乳（3n）由一个精子与两个极核受精发育而成。若用籼稻种子的胚乳诱导愈伤组织，培育三倍体，需适

29、时晚年除胚，以免胚的存在影响愈伤组织细胞的，还可避免再生苗中混有。【答案】（1）降低（2）适量的生长素（3）（4）4（5）增殖与分化二倍体幼苗【解析】植物组织培养过程中，需要生长素和细胞分裂素共同作用，才能促进植物幼苗形成，有绿色芽点的细胞应该是脱分化后的细胞，已经高度分化，排列应该紧密，刚融合的杂交细胞，还没有产生细胞壁，不能进行质壁分离，已经分化的细胞形态大小不同，绿光和黄光对光合作用影响不大，所以照射突变体和对照叶片，光合速率变化不大。色素层析滤纸色素带从上到下依次是：胡萝卜素、叶黄素、叶绿素、叶绿素，叶绿素a和b比值变大，总量不变，所以叶绿素b含量减少。考点定位：本题考查植物组织培养技

30、术。20（8分）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。请根据以上图表回答下列问题。（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是 。（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？_。（3）图1步骤所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？ 。（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤转基因所用的细菌B通

31、常为 。（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。采用EcoR和Pst酶切，得到_种DNA片断。采用EcoR和Sma酶切，得到_种DNA片断。【答案】（1）耐高温 （2）引物对B （3）否 （4）农杆菌 （5）2 1【解析】 PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶具有耐高温的特性。引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度。多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求。植物基因工程中常用农杆菌做受体细胞。（5）据

32、图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点。因此再用EcoR和Pst酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子。而用EcoR和Sma酶切重组质粒中，如图I-过程只能产生一种DNA片断。21人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：请回答：（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行 。接种前，要对人参根进行 。（2）用于离体培养的根切块，叫做 。培养几天后发现少数

33、培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于 污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于 污染。（3）用少量 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法，操作时应采用 加热。【答案】（1）灭菌 消毒（2）外植体 真菌（霉菌） 细菌（3）果胶（4）萃取 水浴【解析】（1）接种前，要对材料进行消毒（不能填灭菌，灭菌时是采用强烈的因素杀菌），配制培养基并分装后要用灭菌锅灭菌。（2）比较菌落特征：真菌污染：有颜色的绒毛状菌落； 细菌污染：有光泽的黏液状菌落。（3）利用果胶酶处理愈

34、伤组织可以获得单个的细胞。（4）由题干，人参皂苷易溶于亲水性有机溶液，故而采用萃取的方法可以从培养物干粉中提取人参皂苷宜。22（12分）请根据以下提供的实验材料，完善生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用的实验思路，并预测实验结果。实验材料：培养液、正常体细胞、癌细胞、W、胰蛋白酶。（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力，只进行原代培养且培养条件适宜）（1）实验思路： 取培养瓶若干个，分组如下： 。每组设置若干个重复样品。 各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，各取其中的几个样品，加入，摇匀，在显微镜下用血细胞计数板分别计数并记录细胞数。 重复若干次

35、。 。（2）预测实验结果（用坐标系和细胞数变化曲线示意图表示）：【答案】（1）A组：培养液中加入体细胞。B组：培养液中加入体细胞，加入W。C组：培养液中加入癌细胞。D组：培养液中加入癌细胞，加入W。 胰蛋白酶统计并分析所得数据。（2）【解析】（1）本实验的目的是：完善生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用的实验思路，有两个自变量：是否加入生物制剂W、动物细胞的种类。（2）设计时应遵循单一变量及对照实验原则，进行重复实验可减少误差并使实验结果更为准确可靠，故分组时应分4组分别进行实验。（3）胰蛋白酶用来分解组织细胞间的蛋白质，使组织细胞相互分散开来，有利于细胞的分裂。（4）绘制曲线时，应注意

36、横纵坐标及各组合的最终高度。考点定位:本题以实验设计的形式，综合考查了考生的实验设计能力，属于对应用层次的考查。23已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问题：（1）为了获得丙中蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙中蛋白质的 序列，据此可利用 方法合成目的基因。获得丙中蛋白质的基因还可用 、 方法。（2）在利用上述丙中蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需使用 酶和 。（3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养

37、，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗 的危害。（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子 （填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。【答案】（1）基因化学基因文库PCR（每空2分，共8分，其他合理答案也给分）（2）限制 DNA连接（每空1分，共2分）中.教.网z.z.s.tep（3）乙种昆虫 （2分）（4）不含（3分）。【解析】在已知蛋白质的氨基酸序列的情况下，可根据氨基酸和碱基的对应关系，推出合成该蛋白质的mRNA序列，依据碱基互补配对原则再推出DNA的碱基序列，用DNA合成仪通过化学方法来合成目的基因。此外也可以从基因文库中获取目的基因，也可通过PCR方法获取目的基因。构建重组质粒时，需要用同种限制酶将运载体目的基因切开，并用DNA连接酶将目的基因连接到运载体上，从而构建基因表达载体。愈伤组织中含有丙蛋白，所以由愈伤组织培养的植株，乙昆虫食用后会死亡，说明植株可抵抗乙昆虫的危害。直接用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，可在叶片部分细胞中合成丙蛋白，该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒，所以不含有丙中蛋白质的基因。考点定位:本题考查基因工程的相关知识，以识记内容为主。