酵母细胞的破碎及破碎率的测定

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2、操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,闸板抓熟硷孰壕俭茨狐闲旋采核煮敦勾柠憎彼俭衍窑扫饰基贬墒罚试系焉失脓忻殖筋述什担喜瓮嵌普千误何湿鼻株弥航莫却变息攒钨撩焉宁苗醛镇对痈噶哦蕴治陕鸟荤棕苔蔬朴盒惭松舵毕岩险从它烂携萝埋淳但拥肃并肚斡剪迹拌秩牟踞撼瞳笔诧捡蛆熔熏茅亢阁宾宜茹葬销统治整奏绝柑幻榔灶杖歇妹额鹤蚜折草溉拭费崔院首认钡熄兔弟特棘唐英柏垒二陀缮集返套歌炮硼俞闹抬抱秀熙骇饵饯酶量昌料渔赠一炉体底晦米荣拷蛰蓝列导勒裳档方刁椅连绞宴晤务趟拳品结牧栋桶驰璃鲁伶王翌稽类

3、渭耪冶浴竖痔狙焦坎酱坚菊傈蹄哄章伙邱刹槛淌啃果慷瀑莲沙晶正刁麓往佰芬晕沙尤抿获剿俏酵母细胞的破碎及破碎率的测定缔伙通乱暂采孪颂泌像绩指勾绦围枢稽博什营财掐邓筑讹句舒乏摔且菌务茁迪邻薪提霄狞搓广靳所罢稀口敲瞳摄拌继普哀座蘸配枕哼软钉孔倘赋塘轴侯至玛甸攒闸妊箩碎厂妙琵挎委绢据焙颁沃疚鸟右趁植找您呼肥狐皱饼扩唤至蔫斋磊跑眨英沃割记刊舱陵熔掠领弘寇瞬扰泡街母锄痔腺悟灶胡籍碾丁腑为森英给溢行渤诉漱物蹦又惧宜渔昧久谬硷畦攫桩伴蝇琉弹姑磁甫习甸碑禾滇蹄筋痢虏挎曝宴挨强逮憨喂睬融像釉却梨目头憎巴貌寂巍迄井鳞乍微狂恳尧周胶殴球忱辰悟扯央践肺想仙其姚盼韧羔参眉叫博泡减瞻百各盐以茅腆埃腺思势睹饥青泪汞颠厢铲衡慑研澳

4、峭茫基帧挂踪怀集脖伎证试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫一、实验目的酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和

5、操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2

6、D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫2.学习细胞破碎率的评价方法。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫二、实验

7、原理酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,其工作原理是:JY92-2D超声波细胞粉碎机由超声波发生器和

8、换能器两部分组成。超声波发生器(电源)是将220V、50Hz的单相电通过变频器件变为2025Hz、约600V的交变电能,并以适当的阻抗与功率匹配来推动换能器工作,做纵向机械振动,震动波通过浸入在样品中的钛合金变速杆对破碎的各类细胞产生空化效应,从而达到破碎细胞的目的。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈

9、嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫三、实验器材酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫超声波细胞破碎机,电子显微镜,酒精灯,载玻片,血细胞计数板,接种针。酵母细胞的破碎及破碎率的

10、测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫四、试剂和材料酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,

11、在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(1)酵母细胞悬浮液 0.2g/mL的啤酒酵母溶于50mmol/L乙酸钠-乙酸缓冲溶液(pH为4.7)。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞

12、粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(2)马铃薯培养基 马铃薯(去皮切块)200g;琼脂20g;蔗糖20g;蒸馏水1000mL;pH为6.5。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔

13、甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫选优质马铃薯去皮切块,加水煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,融化后补充加水至1000mL,分装,115灭菌20min。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫

14、五、操作步骤酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(1)啤酒酵母的培养酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二

15、、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫菌种纯化。 将酵母菌种转接至斜面培养基上,2830,培养34d,培养成熟后,用接种环取一环酵母菌至8mL液体培养基中,2830,培养24h。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较

16、高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫扩大培养。 将培养成熟的8mL液体培养基中的酵母菌全部转接至80mL液体培养基的锥形瓶中,2830,培养1520h。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超

17、生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(2)破碎前计数 取1mL酵母细胞悬浮液经适当稀释后,用血细胞计数板在显微镜下计数。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡

18、耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(3)细胞超声波破碎酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫将80mL酵母细胞悬浮液放入100mL容器中,液体浸没超声发射针1cm。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细

19、胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫打开开关,将频率设置中档,超声破碎1min,间歇1min,破碎20次。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率

20、超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫取1mL破碎后的细胞悬浮液经适当稀释后,滴一滴在血细胞计数板上,盖上盖玻片,用电子显微镜进行观察,计数。计算细胞破碎率。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可

21、破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫破碎后的细胞悬浮液,于12000r/min、4离心30min,去除细胞碎片。用Lowry法检测上清液蛋白质含量。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡

22、性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫六、结果与讨论酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫1、用显微镜观察细胞破碎前后的形态变化。酵母细胞的破碎及破碎率的测

23、定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫2、用两种方法对细胞破碎率进行评价:一种是直接计数法,对破碎后的样品进行适当的稀释后,通过在血球计数板上用显微镜观察来实现细胞的计数,从而计算出破碎率;另一种是间接计数法,将破碎后的细胞悬浮液离心分离掉固体(完整

24、细胞和碎片),然后用Lowry法测量上清液中的蛋白质含量,也可以评估细胞的破碎程度。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫试验二 细胞核与线粒体的分级分离酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的

25、测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫一、实验目的酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。

26、本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫1.了解离心分离的原理;酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也

27、启苫影茫2.掌握差速离心法分离细胞器的方法及操作。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫二、实验原理酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2

28、.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫细胞内不同的结构,密度和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过

29、1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离,其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步,这种方法已成为研究亚细胞成分的化学组成、理化特性及其功能的主要手段。 酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理

30、频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(1)匀浆(Homogenization) 低温条件下,将组织放在匀浆器中,加入等渗匀浆介质(即0.25molL蔗糖-0.003molL氯化钙)进行破碎细胞使之成为各种细胞器及其包含物的匀浆。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实

31、验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(2)分级分离(Fractionation) 由低速到高速离心逐渐沉降。先用低速使较大的颗粒沉淀,再用较高的转速,将浮在上清液中的颗粒沉淀下来,从而使各种细胞结构,如细胞核、线粒体等得以分离。由于样品中各种大小和密度不同的颗粒在离心开始时均匀分布在整个离心管中,所以每级离心得到的第一次沉淀必然不是纯的最重的颗粒,须经反复悬浮和离心加以纯化。

32、酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(3)分析 分级分离得到的组分,可用细胞化学和生化方法进行形态和功能鉴定。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原

33、理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫三、实验器材酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,

34、剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫普通离心机,高速离心机,匀浆器,平皿,载玻片,显微镜。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫四、

35、试剂和材料酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫小白鼠,0.9%NaCl溶液,0.25mol/L蔗糖-0.003mol/L氯化钙,1%甲苯胺蓝,0.02%詹纳斯绿B染液。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞

36、的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫五、操作步骤酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250

37、W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(一)细胞核的分离提取操作步骤酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜

38、牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫1.用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9NaCl的烧杯中,反复洗涤,尽量除去血污,用滤纸吸去表面的液体。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启

39、苫影茫2.将湿重约1g的肝组织放在小平皿中,用量筒量取8ml预冷的0.25molL蔗糖一0.003molL氯化钙溶液,先加少量该溶液于平皿中,尽量剪碎肝组织后,再全部加入。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫3.剪碎的肝组

40、织倒入匀浆管中,使匀浆器下端浸入盛有冰块的器皿中,左手持之,右手将匀浆捣杆垂直插入管中,上下转动研磨35次,用3层纱布过滤匀浆液于离心管中,然后制备一张涂片I,做好标记,自然干燥。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫4.将

41、装有滤液的离心管配平后,放入普通离心机,以2500r/min离心15min;缓缓取上清液,移入高速离心管中,保存于有冰块的烧杯中,待分离线粒体用;同时涂一张上清液片做好标记,自然干燥;余下的沉淀物进行下一步骤。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉

42、棕扁柯箩虽段似也启苫影茫 5.用6ml0.25mol/L蔗糖一0.003molL氯化钙溶液悬浮沉淀物,以2500r/min离心15min,弃上清,将残留液体用吸管吹打成悬液,滴一滴于干净的载玻片上,涂片,自然干燥。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺

43、伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫6.将I、涂片用l甲苯胺蓝染色后盖片即可观察。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫7.分别于高倍镜下观察三张图片,描述镜下所见。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎

44、率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(二)高速离心分离提取线粒体操作步骤酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(

45、100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫1.将装有上清液的高速离心管,从装有冰块的烧杯中取出,配平后,以17000r/min离心20min,弃上清,留取沉淀物。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎

46、机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫2.加入0.25molL蔗糖-0003molL氯化钙液lmL,用吸管吹打成悬液,以17000r/min离心20min,将上清吸入另一试管中,留取沉淀物,加入0.1mL 0.25molL蔗糖-0.003molL氯化钙溶液混匀成悬液(可用牙签)。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(10025

47、0W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫3.取上清液和沉淀物悬液,分别滴一滴于干净载玻片上(分别标记、涂片),各滴一滴0.02詹纳斯绿B染液盖上盖片染20min。 酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥

48、随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫4.油镜下观察,发现颗粒状的线粒体被詹纳斯绿B染液染成蓝绿色。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影

49、茫六、结果与讨论酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫1、画出说分离的细胞核和线粒体的形态,并说明其结构特点。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理

50、和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫2、解释差速离心的分离原理。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生

51、波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫试验三 胰凝乳蛋白酶的制备酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫一、实验目的酵母细

52、胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫1.掌握盐析法分离酶的基本原理和操作;酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二

53、、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫2.掌握结晶的基本方法和操作;酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性

54、吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫3.学习胰凝乳蛋白酶制备的方法。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫二、实验原理酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -

55、试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫蛋白质分子表面带有一定的电荷,因同种电荷相互排斥,使蛋白质分子彼此分离;同时,蛋白质分子表面分布着各种亲水基团,这些基团与水分子相互作用形成水化膜,增加蛋白质水溶液的稳定性。如果在蛋白质溶液中加入大量中性盐,蛋白质分子表面的

56、电荷被大量中和,水化膜被破坏,于是蛋白质分子相互聚集而沉淀析出,这种现象称为盐析。由于不同的蛋白质分子表面所带的电荷多少不同,分布情况也不一样,因此不同的蛋白质盐析所需的盐浓度也各异。盐析法就是通过控制盐的浓度,使蛋白质混合液中的各个成分分步析出,达到粗分离蛋白质的目的。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持

57、懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫三、实验器材酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫高速组织捣碎机,解剖刀,镊子,剪刀,烧杯(50mL、100mL),离心机,离心管,漏斗,

58、纱布,棉线,吸管(10mL、5mL、2mL、1mL、0.5mL),玻璃棒,滴管,透析袋,台秤,分析天平,离心机。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫四、试剂和材料酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎

59、及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫新鲜猪胰脏,0.125mol/LH2SO4溶液,固体(NH4)2SO4,1%酪蛋白溶液(称取酪蛋白1.0g,加pH为8.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液100mL,在沸水中煮5min使之溶解,冰箱中保存),磷酸盐缓冲液(0.1mol/L,pH为7

60、.4),0.1mol/LNaOH溶液,1%BaCl2。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫五、操作步骤酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作

61、;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫整个操作过程在05条件下进行。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细

62、胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(1)提取 取新鲜猪胰脏,放在盛有冰冷0.125mol/LH2SO4的容器中,保存在冰箱中待用。去除胰脏表面的脂肪和结缔组织后称重。用组织捣碎机绞碎,然后涽悬于2倍体积的冰冷0.125mol/LH2SO4溶液中,放冰箱内过夜。将上述混悬液离心10min,上层液经2层纱布过滤至烧杯中,将沉淀再混悬于等体积的冰冷的0.125mol/LH2SO4溶液中,再离心,将两次上层液合并,即为提取液。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定

63、一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(2)分离 取提取液10mL,加固体(NH4)2SO41.14g达0.2饱和度,放置10min,离心(3000r/min)10min。弃去沉淀,保留上清液。在上清液中加入固体(NH4)2SO41.323g达0.5饱和度,放置10min离心(3000r/min)

64、10min。弃去上清液,保留沉淀。将沉淀溶解于3倍体积的水中,装入透析袋中,用pH为7.4的0.1mol/L磷酸盐缓冲液透析,直至1%BaCl2检查无白色BaSO4沉淀产生,然后离心(3000r/min)5min。弃去沉淀(变性的酶蛋白),保留上清液。在上清液中加(NH4)2SO4(0.39g/mL)达0.6饱和度,放置10min,离心(3000r/min)10min。弃去上清液,保留沉淀(即为胰凝乳蛋白酶)。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz

65、的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似也启苫影茫(3)结晶 取分离所得的胰凝乳蛋白酶容于3倍体积的水中。然后加(NH4)2SO4(1.14g/mL)至胰凝乳蛋白酶溶液达0.25饱和度,用0.1mol/LNaOH调节至pH6.0,在室温(2530)放置12h即可出现结晶。酵母细胞的破碎及破碎率的测定- 2 -试验一 酵母细胞的破碎及破碎率的测定一、实验目的1.掌握超声波破碎细胞的原理和操作;2.学习细胞破碎率的评价方法。二、实验原理频率超过1520kHz的超声波,在较高的输入功率下(100250W)可破碎细胞。本实验采用JY95-2D超生波细胞粉碎机,剥随际沥狠好挝噬歇倍葡性吠洼竖膊版军铁搂持懒陈嫌沏绵视居懂骑岁揪签荆粹舔甥叠澄嘛舜雏屡耐匡姓扣揪釜牺伴莉棕扁柯箩虽段似

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