最新大学考研笔记教案基因工程电子教案

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1、肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆

2、芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁

3、肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇

4、莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂

5、膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆

6、羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀

7、芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅

8、肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿

9、莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆

10、膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀

11、羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄

12、芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿

13、肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃

14、节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇

15、膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁

16、莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈

17、芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃

18、聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇

19、节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁

20、膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅

21、莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀

22、膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇

23、聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁

24、芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅

25、膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿

26、莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈肀莄蚃肃荿莃螅袆芅莂袈肂膁莂薇袅肇蒁蚀肀羃蒀螂袃节葿蒂肈芈蒈蚄羁膄蒇螆膇聿蒆衿罿莈蒆薈螂芄蒅蚁羈膀薄螃螁肆薃蒂羆羂薂薅蝿莁薁螇肄芇薀衿袇膃薀蕿肃聿蕿蚁袅莇薈螄肁芃蚇袆袄

27、腿蚆薆聿肅芃螈袂肁节袀膇莀芁薀羀芆芀蚂膆膂艿螅罿肈芈袇螁莆莈薆羇节莇虿螀膈莆袁羅膄莅薁袈 教案课程:基因工程学时:30学时班级:植保、农学、园艺教师: 黑龙江八一农垦大学基因工程电子教案一、教学进度计划教学进度表周次学时教学内容备注12绪 论22DNA的组成、结构32天然DNA的制备、限制性核酸内切酶及DNA的片段化42特异性DNA片段的PCR扩增52DNA片段的化学合成及凝胶电泳检测62分子克隆的载体及质粒克隆的载体72病毒(噬菌体)克隆载体及染色体定位整合克隆载体82人工染色体克隆载体及特殊用途克隆载体92目的基因、目的基因的制备及目的基因的分离102受体细胞及重组DNA分子转入原核生物1

28、12重组子的筛选122基因表达的机制132基因表达的调控元件及外源基因表达系统(前部分)142外源基因表达系统(后部分)及基因表达产物的检测与分离纯化152基因工程应用二、授课内容及学时分配授课内容及学时分配章节各章名称理论课周次理论课时数实验课时数总课时数1绪论212DNA重组883基因工程克隆的载体664目的基因的制备235目的基因导入受体细胞446外源基因的表达667基因工程的应用22 合 计3030三、单元教学计划名 称第一章 绪论目 的要 求使学生清晰基因工程的基本概念,知道基因工程的研究范围和内容,了解基因工程的诞生与发展状况。重 点难 点基因工程的含义、理论依据、研究的基本技术路

29、线以及基因工程研究的内容。时 间教学组织 教学方法2学时一、引言1.基因工程含义1)广义含义2)狭义含义2.基因工程理论依据1)DNA分子的切割与连接2)核酸分子杂交3)凝胶电泳4)细胞转化5)DNA序列结构分析以及基因人工合成、基因定点突变和PCR扩增技术3.基因工程研究的基本技术路线1)从大大原核生物细胞中提取克隆的载体;2)从真核生物细胞中提取外源DNA;3)用限制性内切酶将载体打开,并用限制性内切酶消化真核生物DNA;4)用DNA连接酶将真核生物DNA片断接到载体上,获得重组体;5)用原核或真核生物细胞作为受体,使重组体进入并得至扩增,通过特定手段,能找到含有理想重组体的受体细胞。4.

30、基因工程研究发展史1)50年代以前2)50年代以后3)最近20年二、基因工程研究内容 1.从复杂的生物有机体基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等步骤发,分离出带有目的基因的DNA片断。2.在体外将带有目的基因的外源DNA片断连接到能自我复制的并具有选择记号的载体分子上,形成重组DNA分子。3.将重组DNA分子转移到适当的受体细胞,并与之一起增殖4.从大量的细胞繁殖群体中,筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆。5.从这些筛选出来的受体细胞克隆,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分析研究使用。6.将目的基因克隆到表达载体上,导入寄主细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的

31、物质。三、基因工程研究发展前景理论讲授;举例并借助课件进行辅助教学。名 称第二章 DNA重组目 的要 求使学生了解DNA的组成、结构和DNA的重组类型;理解DNA的浓缩及纯化,限制性核酸内切酶的特异性及作用机制,聚合酶链式反应技术的原理及其应用;掌握大肠杆菌质粒DNA的提取以及噬菌体DNA的提取,琼脂糖凝胶电泳的原理及方法,限制性内切酶的反应系统;E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶的连接机理。重 点难 点天然DNA的提取,限制性核酸内切酶和连接酶的作用机理及方法, PCR扩增DNA片段的基本原理和方法,琼脂糖凝胶电泳技术的原理和方法。DNA的纯化与浓缩,DNA片段的化学合成,DNA片段

32、的连接。时 间教学组织 教学方法8学时第一节 DNA的组成和结构一、DNA的组成.1组成元素2基本单位3化学结构二、DNA的空间结构规则的双螺旋结构1空间结构ADNA的结构BDNA的结构2碱基互补配对原则3DNA分子的特点三、DNA复制起始位点和复制子的结构1复制的基本机理2复制起始位点3复制子及复制子的结构4复制的特点四、DNA的转录启动子的定义1 启动子启动子的基本结构 转录所需酶的种类2转 录 转录区的结构 转录的过程第二节 天然DNA的制备一、天然DNA的来源和用途. 1天然DNA的来源 2天然DNA的用途二、天然DNA的提取 天然DNA的提取方法与原理三、DNA的纯化四、DNA的浓缩

33、 DNA浓度的测定方法 第三节 限制性核酸内切酶和DNA片段化一、限制性核酸内切酶1 定义2 功能 二、限制性核酸内切酶的类型及作用机制1 限制性核酸内切酶的类型2限制性核酸内切酶的作用机制三、限制性核酸内切酶命名规则及识别序列1 限制性核酸内切酶的命名规则2限制性核酸内切酶的识别序列四、限制性核酸内切酶切割DNA的位点五、限制性核酸内切酶反应系统第四节 特异性DNA片段的PCR扩增一、PCR基本原理1 PCR扩增的定义2 PCR扩增的基本原理二、PCR扩增特异性DNA片段的主要条件 1模板核酸 2引物 3缓冲液 4Mg2+ 5三磷酸脱氧核苷酸(dNTP) 6耐热DNA聚合酶 7温度循环参数1

34、)变性温度与时间2)复性温度与时间3)延伸温度与时间4)循环数三、PCR扩增DNA片段的方法1试剂1)引物2)耐热的DNA聚合酶3)10PCR缓冲液4)5mmol/L dNTP贮备液5)DNA模板2基本反应步骤PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成1)模板DNA的变性2)模板DNA与引物的退火(复性)3)引物的延伸四、常用的DNA片段PCR扩增系统1兼并引物(Degenerate Primer)PCR2套式引物(Nested Primer)PCR3复合PCR(Multiplex PCR)4反向PCR(Inverse PCR或Reverse PCR)5不对称PCR(Asymmetric P

35、CR)6标记PCR(LP-PCR)和彩色PCR7加端PCR8锚定PCR或固定PCR第五节 DNA片段的化学合成一、苷酸片段的化学合成方法1原位合成2直接点样二、化学方法合成的DNA片段1历史2基本原理3基本原料4合成步骤第六节 DNA片段大小的凝胶电泳检测一、实验室中常用的电泳参数1. 琼脂糖凝胶电泳参数2. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳参数3. 脉冲场凝胶电泳参数 二、DNA片段的连接及重组类型1DNA重组的概念及作用2DNA片段的连接重组3DNA连接酶4DNA片段之间的连接5DNA重组类型以理论讲授为主;配合课件进行讲授为辅;名 称第三章 基因克隆的载体目 的要 求使学生了解与构建克隆载体相关

36、的质粒和噬菌体的性质;启动子探针型克隆载体和诱导型表达克隆载体等特殊用途的克隆载体。掌握大肠杆菌质粒克隆载体pBR322的构建。熟练掌握构建噬菌体克隆载体的基本策略,并了解其应用。重 点难 点大肠杆菌质粒克隆载体pBR322的构建。构建噬菌体克隆载体的基本策略及其应用。时 间教学组织 教学方法6学时引 言 一、分子克隆的载体1载体的定义2作为载体应该具备的基本条件 第一节 质粒克隆载体一、质粒定义与构型1定义2构型二、质粒克隆载体的特性1 具有独立复制起点2具有较小的相对分子质量3具有较高拷贝数4具有选择性标记5易于导入细胞6具有安全性三、构建质粒克隆载体时预处理的主要问题、基本策略和具体实例

37、 1构建一种质粒载体时预处理的主要问题 2质粒克隆载体构建的基本策略3以常用的pBR322为例说明载体构建的步骤1)pBR322的定义2) pBR322质粒载体的特点3)pBR322质粒载体构建的步骤4)pBR322质粒载体的优点 第二节病毒(噬菌体)克隆载体一、噬菌体克隆载体 1关于噬菌体的简介2噬菌体的构建二、cosmid克隆载体1cosmid克隆载体的特征2cosmid克隆载体的构建三、M13噬菌体克隆载体 1M13 DNA 2M13 DNA的复制和 M13噬菌体的增殖 3构建M13噬茵体克隆载体的策略和途径 4M13克隆载体的应用四、SV40克隆载体 1SV40DNA的复制和 SV40

38、的增殖2构建SV40克隆载体的基本策略和途径1)取代型克隆载体 2)病毒质粒重组克隆载体。五、反转录病毒克隆载体1定义2劳斯肉瘤病毒的生物学特性3构建RSV反转录病毒克隆载体的策略和途径第三节 染色体定位整合克隆载体一、定位整合克隆载体的几种模式 1内源平台双交换置换克隆载体 2外源平台双交换置换克隆载体 3内源平台双交换插入克隆载体 4内源平台单交换插入克隆载体二、定位整合克隆载体 1植物染色体定位整合克隆载体 2动物染色体定位整合克隆载休第四节 人工染色体克隆载体一、人工染色体克隆载体的含义和特点1 含义2 特点二、人工染色体克隆载体的构建三、人工染色体克隆载体的应用1构建基因组文库2基因

39、治疗3基因功能的鉴定第五节 特殊用途克隆载体一、启动子探针型克隆载体1启动子探针型克隆载体的定义2类型和相应内含简介1)Kanr标记的启动子探针克隆载体。2)gfp标记的启动子探针克隆载体。 3)hPh标记的启动于探针克隆载体。4)Kanr标记的自动子探针克隆载体。二、诱导型表达克隆载体 1诱导型表达克隆载体的定义2类型和相应内含简介1)二价金属离子诱导表达克隆载体。 2)干旱诱导表达克隆载体。 3)红光诱导表达克降载体。三、反义表达克隆载体 1反义表达克隆载体2类型及相应内含简介1)SOD基因反义表达更隆载体 2)NHE1基因反义表达克隆载体。 采用引导式的教学讲授法,并辅助多媒体课件名 称

40、第四章 目的基因的制备目 的要 求了解原核细胞和真核细胞的基因组成,理解基因组文库、cDNA基因文库的概念,掌握cDNA基因文库的构建及目的基因的分离,并能利用聚合酶链式反应技术扩增目的基因。重 点难 点cDNA基因文库的构建及目的基因的分离;利用聚合酶链式反应技术扩增目的基因,基因组文库的构建以及筛选目的基因片段的差别杂交及减法杂交技术。时 间教学组织 教学方法2学时第一节 目的基因及目的基因的制备一、基本概念及组成 1目的基因 2结构基因的组成 3原核生物基因的组成 4真核生物基因的组成 5其它基因的组成二、直接分离法 1限制性核酸内切酶酶切分离法 2双抗体免疫法分离编码蛋白的基因 3利用

41、酶促反转录法直接从特定mRNA分离基因三、构建基因组文库分离法四、cDNA基因文库的构建及目的基因分离五、利用聚合酶链式反应技术扩增目的基因六、基因的化学合成第二节 目的基因的分离一、目的基因的功能克隆 1.根据特异蛋白分离目的基因 2.功能互补法克隆基因二、序列克隆法三、筛选目的基因片段的差别杂交及减法杂交技术四、利用差示分析法分离目的基因克隆五、功能结合法筛选目的基因六、DNA插入诱变法分离目的基因采用引导式的教学讲授法,并辅助多媒体课件名 称第五章 目的基因导入受体细胞目 的要 求理解受体细胞、转化、转导、感受态细胞、转化率、体外包装等相关概念;掌握感受态细胞的制备方法,核酸分子杂交检测

42、法来筛选重组子,重组噬菌体DNA分子转导大肠杆菌;了解重组DNA分子转入真核细胞。重 点难 点感受态细胞的制备,重组质粒DNA分子转化大肠杆菌,重组噬菌体DNA分子转导大肠杆菌,核酸分子杂交检测法。时 间教学组织 教学方法4学时第一节 受体细胞一、原核生物细胞 1原核生物细胞成为理想受体细胞类型的原因? 2为什么说有为数不少的真核生物基因不能在大肠杆菌中表达出具有生物活性的功能蛋白?二、真菌细胞 1为什么说酵母菌是最理想的真菌受体细胞?三、植物细胞四、动物细胞第二节 重组DNA分子转入原核生物一、重组质粒DNA分子转化大肠杆菌 1以革兰氏阳性细茵为例,细菌转化的一种可能基本步骤,即原生质体化假

43、说。 2.支持该假说的理由及证据二、重组入噬菌体DNA分子转导大肠杆菌 1体外包装 2入噬菌体DNA体外包装的主要过程三、受体细胞的选择 1受体细胞的选择依据四、重组DNA分子转入真核细胞 1重组DNA分子转入植物细胞 农杆菌介导的Ti质粒载体转化法2重组DNA分子导入哺乳动物细胞第三节 重组子的筛选一、遗传表型直接筛选法 1根据载体选择标记初步筛选转化子 1)抗药性筛选 2)插入失活筛选法 3)插入表达筛选法 4)显色互补筛选法 5)利用报告基因筛选植物转化细胞 6)利用遗传选择标记筛选哺乳动物转基因细胞2. 依赖于重组子结构特征分析的筛选法二、核酸分子杂交检测法三、免疫化学检测法四、转译筛

44、选法采用启发式与问答式相结合的教学方法,并通过网络查阅相关的文献资料使教学内容不段创新。 名 称第六章 外源基因的表达目 的要 求理解启动子、增强子、终止子、衰减子、绝缘子、反义子等概念;掌握外源基因在大肠杆菌基因表达系统中的表达形式、酵母表达系统中酵母基因表达载体即其种类、免疫学检测法,而在基因表达产物的分离纯化上只掌握柱层析法;对芽孢杆菌表达系统和链霉菌表达系统等原核生物基因表达系统仅作了解。重 点难 点基因表达的机制,外源基因表达系统,包括原核生物表达系统和真核生物表达系统;基因表达的调控序列;酵母基因表达载体,哺乳动物基因表达载体。时 间教学组织 教学方法6学时第一节 基因表达的机制一

45、、外源基因的起始转录二、mRNA的延伸与稳定性三、外源基因mRNA的有效翻译四、表达蛋白在细胞中的稳定性五、目的基因沉默第二节 基因表达的调控元件一、启动子二、增强子三、终止子四、衰减子五、绝缘子六、反义子第三节 外源基因表达系统一、大肠杆菌基因表达系统二、芽孢杆菌表达系统三、链霉菌表达系统四、蓝藻表达系统五、酵母表达系统六、哺乳动物细胞基因表达系统七、植物细胞基因表达系统第四节 基因表达产物的检测与分离纯化一、基因表达产物的检测二、基因表达产物的分离纯化采用启发式与问答式相结合的教学方法,并通过网络查阅相关的文献资料使教学内容不段创新。 名 称第七章 基因工程应用目 的要 求了解基因工程在制

46、药工业上、动物、植物等方面的应用;了解基因工程疫苗、肿瘤的基因治疗。重 点难 点基因工程疫苗的制备,肿瘤的基因治疗时 间教学组织 教学方法2学时一、 基因工程药物1.基因工程激素类药物2.基因工程细胞因子类药物3.基因工程抗体4.基因工程受体5.基因工程疫苗二、转基因植物1.抗病虫害转基因植物2.抗逆转基因植物3.药用转基因植物4.转基因植物食品三、转基因动物1.利用转基因动物改良动物品种2.转基因动物作为生物反应器3.转基因动物筛选药物4.转基因动物应用于人体器官移植四、基因治疗1.肿瘤的基因治疗2.分子遗传病的基因治疗3.心血管病的基因治疗4.艾滋病的基因治疗五、基因芯片1.基因芯片原理及

47、技术2.基因芯片的应用采用启发式与问答式相结合的教学方法,并通过网络查阅相关的文献资料使教学内容不段创新。 四、教案内容课 目第一章 绪 论目 的要 求使学生清晰基因工程的基本概念,知道基因工程的研究范围和内容,了解基因工程的诞生与发展状况。重 点难 点基因工程的含义、理论依据、研究的基本技术路线以及基因工程研究的内容。主要内容一、引言1.基因工程含义1)广义含义:是指包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程等。2)狭义含义:所谓的基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒和其它载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞内,而能持续稳定的繁殖。2.基因工程理论依据(每一

48、点只讲概要)1)DNA分子的切割与连接2)核酸分子杂交3)凝胶电泳4)细胞转化5)DNA序列结构分析以及基因人工合成、基因定点突变和PCR扩增技术3.基因工程研究的基本技术路线1)从大大原核生物细胞中提取克隆的载体;2)从真核生物细胞中提取外源DNA;3)用限制性内切酶将载体打开,并用限制性内切酶消化真核生物DNA;4)用DNA连接酶将真核生物DNA片断接到载体上,获得重组体;5)用原核或真核生物细胞作为受体,使重组体进入并得至扩增,通过特定手段,能找到含有理想重组体的受体细胞。4.基因工程研究发展史1)50年代以前主要从细胞染色体水平上进行研究,属于基因的染色体遗传学阶段;2)50年代以后则

49、主要从DNA大分子水平上进行研究,属于基因的分子生物学阶段;3)最近20年由于重组DNA技术的完善和应用,人们已经改变了从表型到基因型的传统研究基因的途径,而能够直接从克隆目的基因出发,研究基因的功能及其与表型间的关系,使基因的研究进入了反向生物学阶段。二、基因工程研究内容 1.从复杂的生物有机体基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等步骤发,分离出带有目的基因的DNA片断。2.在体外将带有目的基因的外源DNA片断连接到能自我复制的并具有选择记号的载体分子上,形成重组DNA分子。3.将重组DNA分子转移到适当的受体细胞,并与之一起增殖4.从大量的细胞繁殖群体中,筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞

50、克隆。5.从这些筛选出来的受体细胞克隆,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分析研究使用。6.将目的基因克隆到表达载体上,导入寄主细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的物质。三、基因工程研究发展前景1.阐明了基因是遗传信息的载体,没有基因也就没有生命。2.关于基因组核苷酸全序列的测定与分析,是重组DNA技术促进基础生物学研究的又一出色的范例。3.1984年美国科学家首先提出了研究人类基因组的设想。4.我国自1992年开始执行的水稻基因组作图和测序计划也已经取得了良好的进展。5.转基因动物的一种潜在的利用是,有可能将它作为专门生产一些特殊药物的“生物工厂”(bio-fact

51、ories)。课 目第二讲 DNA的组成、结构目 的要 求使学生了解DNA的组成、结构;理解DNA的转录与复制,掌握复制的机理,复制子、启动子的结构和定义。重 点难 点 复制的机理,复制子、启动子的结构和定义。Z-DNA结构的生物学意义。主要内容第一节 DNA的组成和结构一、DNA的组成.1组成元素:C、H、O、N、P2基本单位:脱氧核苷酸(4种)3化学结构:脱氧核苷酸链二、DNA的空间结构(一)、空间结构1)规则的双螺旋结构 a.两条反式平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕 b.嘌呤和嘧啶碱位于比螺旋的内侧。 c.双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻的碱基对之间相距的高度,即碱基堆积距离为0

52、.34nm,两个核苷酸这间的夹角为36。 d.两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起。2)ADNA的结构 A-DNA也是由反向的两条多核苷酸链组成的双螺旋,也为右手螺旋,但是螺体较宽而短,碱基对与中轴这倾角也不同,呈19。3)ZDNA的结构 a.定义:在CGCGCG晶体中,磷酸基在多核苷酸骨架上的分布呈Z字形,所以呈它为ZDNA。ZDNA只有一条大沟,而无小沟。b.生物学意义:应当指出ZDNA的形成通常在热力学上是不利的。因为ZDNA中带负电荷的磷酸根距离太近了,这会产生静电排斥。但是,DNA链的局部不稳定区的存在就成为潜在的解链位点。DNA解螺旋却是DNA复制和转录等过程中

53、必要的环节,因此认为这一结构与基因调节有关。比如SV40增强子区中就有此结构,又如鼠类微小病毒DNS复制区起始点附近有GC交替排列序列。此外,DNA螺旋上沟的特征在其信息表达过程中起关键作用。调控蛋白都是通过其分子上特定的氨基酸侧链与DNA双螺旋沟中的碱基对一侧的氢原子供体或受体相互作用,形成氢键从而识别DNA上的遗传信息的。大沟所带的遗传信息比小沟多。沟的宽窄和深浅也直接影响到调控蛋白质对DNA信息的识别。ZDNA中大沟消失,小沟狭而深,使调控蛋白识别方式也发生变化。这些都暗示ZDNA的存在不仅仅是由于DNA中出现嘌呤一啶嘧交替排列之结果,也一定是在漫漫的进化长河中对DNA序列与结构不断调整

54、与筛选的结果,有其内在而深刻的含意,只是人们还未充分认识而已。(二)、碱基互补配对原则:AT,GC(三)、DNA分子的特点:稳定性、特异性、多样性。三、DNA复制起始位点和复制子的结构1复制的基本机理DNA由两条螺旋的多核苷酸链组成,两条链的碱基通过A:T和G:C之间的氢键联结在一起。在复制过程中首先两条链间的氢键破裂并使双链解旋和分开,然后以每条链为模板,按碱基互补配对原则(A:T,G:C),由DNA聚合酶催化合成新的互补链,结果由一条链成为互补的两条链,这样新形成的两个DNA分子与原来的DNA分子的碱基序列完全相同。在此过程中,每个子代DNA的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的。这

55、种复制方式称此过程中,每个子代DNA的一条链来自亲代的DNA,另一条链则是新合成的。这种复制方式称为半保留复制(semi conservation replication)。2复制起始位点DNA复制在生物细胞中要从DNA分子上特定位置开始。这个特定的位置就称为复制起点(Origin of replication),用ori表示。3复制子及复制子的结构a.DNA复制从起点开始双向进行直到终点为止,每一个这样的DNA单位称为复制子或复制单元(replicon)。 b. 在原核生物中,每个DNA分子上就有一个复制子;而在真核生物中,每个DNA分子有许多个复制子,每个复制子长约50-200kb。因此,

56、真核细胞DNA的复制是由许多个复制子共同完成的。c.既然DNA复制不是随机的从DNA分子上的任何一点起始,而是从特定的区域开始,这说明复制起点有其结构上的特殊性。分子遗传学者们利用分子克隆技术,分离出大肠杆菌染色体DNA复制起点oriC。它由422bp的DNA片段组成,其核苷酸序列已经搞清。其结构特点该为(1)在oriC区域内有一系列对称排列的反向重复序列,即回文结构(palindrome),这表明区域与复制酶系统的识别有关(2)在oriC区中还有两个转录启动区(启动子)的核苷酸序列,这暗示了转录可能在大肠杆菌染色体DNA复制起始着重的作用。目前已有许多实验表明转录确实是复制的起始所必需的,但具体的作用机制尚不清楚。4复制的特点a.DNA复制的最主要特点是半保留复制,b.它还是半不连续复制(Semi-ondisctinuous replication)。DNA双螺旋的两条链是反向平行的,因此,在复制起点处两条DNA链解开成单链时,一条是53方向,另一条是

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