分子生物学实验操作方法与技巧

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1、会计学1分子生物学实验操作方法与技巧分子生物学实验操作方法与技巧研究生从事分子生物学研究工作的研究生从事分子生物学研究工作的原则与方法；原则与方法；1质粒的提取技术；质粒的提取技术；3DNADNA和和RNARNA提取方法；提取方法；4酶切与连接；酶切与连接；5新生在实验室最容易犯的错新生在实验室最容易犯的错误；误；2第1页/共53页电泳技术；电泳技术；6PCRPCR技术；技术；8SouthernSouthern、NorthernNorthern和和WesternWesternblotblot杂交；杂交；9酶联免疫技术（酶联免疫技术（ElisaElisa）；）；10分子生物学常用转化技术；分子生

2、物学常用转化技术；7第2页/共53页文库的建立与筛选；文库的建立与筛选；11宏基因组技术；宏基因组技术；13酶的定向进化技术；酶的定向进化技术；14克隆基因的策略；克隆基因的策略；12第3页/共53页第4页/共53页幻灯片发送方式 选举一个愿意为大家服务的同学任课程班长，每次上完课后，当次课的幻灯片可以拷贝给课程班长，然后由他（她）负责通过邮件发送给其他同学。第5页/共53页第6页/共53页第7页/共53页第8页/共53页技术，而不要一味追求高新技术技术，而不要一味追求高新技术，也是增加实验效应（实验成功率），降低风险的一个方法。第9页/共53页第10页/共53页己实验的产出和投入的比值，这个

3、比值越大越好，当然是以你所拥有的实验条件你所拥有的实验条件作基础的。 （量力而为，看米下锅！）第11页/共53页第12页/共53页第13页/共53页第14页/共53页第15页/共53页也只能表明作者的无知。第16页/共53页检查，结果酶制剂中果然含有腺嘌呤脱氨酶作为杂质，辅基虽然与蛋白部分共价连接，但仍然是核黄素腺嘌呤二核苷酸，次黄呤嘌是在酶纯化过程中腺嘌呤的水解产物。这就避免了在论文发表时出现重大错误。第17页/共53页第18页/共53页第19页/共53页第20页/共53页左右才能完成这样一个工作。所以，轻视心理也是必须纠正的。总之，对待分子生物学实验对待分子生物学实验，引用伟人毛泽东的一句

4、话在战略上藐视它，在战术上重视它在战略上藐视它，在战术上重视它才是正确的态度。n分子生物学实验面前人人平等，没有一本、二本和三本分子生物学实验面前人人平等，没有一本、二本和三本的区别！的区别！第21页/共53页第22页/共53页第23页/共53页第24页/共53页所以在这里一再强调这一点，是因为这方面犯错误的人太多太多，有经验的和没经验的人都不例外。第25页/共53页第26页/共53页第27页/共53页第28页/共53页第29页/共53页第30页/共53页n4 4、看分子克隆等经典实验操作手册中实验的原理和、看分子克隆等经典实验操作手册中实验的原理和关键步骤关键步骤，提高自己n的理论水平。n5

5、、跟师兄师姐做实验的时侯，应保持谦虚谨慎，不懂的地方及时请教。n6、认真学习防盗、防水、放电、防爆、防辐射、防污染的安全常识安全常识。n7、接触浓盐酸、浓硫酸、苯酚、EB实验时，必须小心谨慎，防止受伤防止受伤。第31页/共53页第32页/共53页第33页/共53页n（4，以免影响蒸n汽流通，影响灭菌效果。第34页/共53页第35页/共53页第36页/共53页第37页/共53页第38页/共53页第39页/共53页第40页/共53页第41页/共53页第42页/共53页第43页/共53页第44页/共53页第45页/共53页文库的建立与筛选；文库的建立与筛选；11宏基因组技术；宏基因组技术；13酶的定

6、向进化技术；酶的定向进化技术；14克隆基因的策略；克隆基因的策略；12第46页/共53页文库的建立与筛选；文库的建立与筛选；11宏基因组技术；宏基因组技术；13酶的定向进化技术；酶的定向进化技术；14克隆基因的策略；克隆基因的策略；12第47页/共53页己实验的产出和投入的比值，这个比值越大越好，当然是以你所拥有的实验条件你所拥有的实验条件作基础的。 （量力而为，看米下锅！）第48页/共53页检查，结果酶制剂中果然含有腺嘌呤脱氨酶作为杂质，辅基虽然与蛋白部分共价连接，但仍然是核黄素腺嘌呤二核苷酸，次黄呤嘌是在酶纯化过程中腺嘌呤的水解产物。这就避免了在论文发表时出现重大错误。第49页/共53页检查，结果酶制剂中果然含有腺嘌呤脱氨酶作为杂质，辅基虽然与蛋白部分共价连接，但仍然是核黄素腺嘌呤二核苷酸，次黄呤嘌是在酶纯化过程中腺嘌呤的水解产物。这就避免了在论文发表时出现重大错误。第50页/共53页第51页/共53页第52页/共53页