常见因素对胰岛素检测的干扰分析.

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1、常见因素对胰岛素检测的干扰分析【摘要】 目的分析常见的因素对胰岛素检测的干扰。方 法分别评价抗凝剂三种可能出现的异常增高的干扰因素胆红素、甘油三酯、 蛋白质,标本溶血以及标本保存温度和时间对结果的影响。结果EDTA?K、2肝素抗凝血,与血清管比较胰岛素检测结果无显著差异;高浓度的胆红素、甘 油三酯、蛋白质对结果没有显著的干扰作用;溶血可造成胰岛素结果的下降, 而且与溶血程度和温度呈正相关,随着放置时间的延长,胰岛素值会进一步下 降。结论 EDTA?K、2 肝素抗凝剂,病理情况下高浓度的胆红素、甘油三酯、 蛋白质不会引起胰岛素检测结果显著的变化;溶血可以引起胰岛素结果的下 降,应加以避免。【关键

2、词】 胰岛素 干扰 溶血 血清胰岛素测定,在糖 尿病的诊断、分型和治疗上有重要的指导作用,然而,常会遇到一些不符合临 床的结果,给诊治带来困难,我们分析了一部分常见的因素,来评价利用化学 发光技术检测胰岛素的干扰作用,现报告如下。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 全自动化学发光分析仪 Abbott i2000 ,使用配套 原装胰岛素检测试剂、标准品、质控品,美国雅培公司生产。胰岛素测定方 法:化学发光免疫分析。标本来源本院新鲜无溶血、脂血及黄疸的病人标本, 胰岛素浓度分布,5.7154.6mU/L,共20例。影响因素的评价方法:(1)抗 凝剂:分别用 EDTA?K,2 肝素抗凝,与血清管比

3、较。( 2)干扰物质:在血清中 加入高浓度胆红素、甘油三酯、蛋白质标准品(均由北京利德曼公司提供), 使成可能出现的不同病理高浓度,对照管中加入等量的生理盐水,与各管比 较。( 3)溶血及标本保存条件在血清中加入血红蛋白(血红蛋白经新鲜血标本 溶血自制),使标本呈轻微溶血和明显溶血,对照管加等量生理盐水,分别于 4C保存1h、4h, 25E保存1h、4h后检测。1.2统计学处理各组数据以xs表示,分别与对照进行配对t检验。2 结果 2.1用EDTA?K2肝素抗凝组与对照血清组比较,无显著差异,结果见表 1。表 1 不同抗凝剂对胰岛素测定的影响(略) 2.2 病理情况下异常增高的胆红素,甘油三酯

4、,蛋白质干扰试验组与对照组 比较,结果没有显著差异,结果见表 2。表 2 三种干扰物对胰岛素测定的影 响(略)2.3正常无溶血标本4C放置1h、4h, 25C放置4h后,与对照比对结果无显著变化,轻微溶血标本(血红蛋白浓度0.5g/L ) 4C放置1h、4h后与对照比较无显著变化,而 25C放置1h与对照比较,P0.05,放置4h后与 对照比较,P0.01,明显溶血标本(血红蛋白浓度 3.0g/L ) 4C放置1h、4h后 与对照比较,P0.05,而25C放置1h、4h与对照比较,P0.01,结果见表3。 表 3 溶血标本保存条件对胰岛素测定的影响(略)3 讨论 胰岛素检测,通常使用血清标本,

5、本实验使用临床常用的EDTA?K、2 肝素抗凝血,结果与血清无显著差异,说明胰岛素检测也可以选择以二者抗凝的血浆标本;评 价了病理情况下出现的高浓度胆红素、甘油三酯、蛋白质的干扰作用,结果表 明,当标本中的总胆红素达到 200卩mol/L,甘油三酯达到10.0mmol/L,蛋白 质达到 120.0g/L 时,结果没有显著差异,没有产生明显的干扰作 用。溶血可以严重影响胰岛素测定值,国内也曾有报道认为溶血标本会影响胰岛素的测定结果 1,这是由于红细胞内存在胰岛素降解酶,能水 解胰岛素成为小分子片段,引起检测结果的下降 2?3。从表 3中可看出,下 降的程度与血红蛋白含量呈正相关,血红蛋白含量越高

6、,胰岛素下降越明显。同一份溶血样本在25C保存与4C保存相比结果更低,说明低温能抑制酶的活 性,样本在4C保存能有效减少溶血干扰。面对临床对免疫检验速度的要求, 胰岛素检测标本会在 4h 内完成标本分离及测试,我们以 4h 为限评价了标本放 置时间对胰岛素检测的影响,结果显示,无溶血样本放置1h、4h 后,胰岛素结果没有显著差异,说明无溶血标本在 4h内完成检测可以满足质量要求,而溶血 标本在室温下放置 4h 后会出现结果明显的下降。标本溶血是造成胰岛素检测结果差异的主要原因,提示在标本采集,处理过程中应该尽可能避 免溶血的发生,已有报道对溶血的原因和对策作了分析4。当然,溶血很难完全避免,一

7、旦发生标本溶血,应重新抽血检测,为了降低不易发现的轻微溶 血造成的结果差异,建议标本尽快进行血清分离并于4C保存,尽快检测,确保胰岛素检测的准确性。【参考文献】1池胜英 .溶血对血清胰岛素测定结果的影响 J. 现代中西医结合杂志 ,2003,12 (9):2092?2093. 2Sapin R.Interferenceof hemolysis and hemoglobin:example of insulin assay J.Ann Biol Clin,2001,59(1):113?117. 3Authier F,Posner BI,Bergeron JJM.Insulin degrading enzyme J .ClinInvest Med,1996,19 (3):149?160.4刘览,姚志祥. 血液标本溶血原因分析与对策J 江西医学检验,2001,19 (6) :394 - 395.

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