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1、11级 郭月凤、郭丹婷 第一章 组织学绪论第一章 组织学绪论一、组织学的内容和意义组织学 定义：研究机体微细结构及其相关功能的科学。又称显微解剖学。内容 组织 概念：形态相近、功能相关的细胞群与细胞外基质共同组成。构成：细胞群和细胞外基质。 细胞：机体结构和功能的基本单位，成人约有1015个、200余种。 细胞外基质：细胞间质。由细胞分泌形成。类型：上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织。生物大分子 亚细胞 细胞 组织 器官 系统 有机体意义：属于基础医学的形态学课程；是解剖学、细胞生物学等课程的深化；是生理学、病理学等课程的基础；与临床各科相关联。二、组织学的发展简史1、19世纪中叶以前：光学
2、显微镜的发明与细胞、组织概念的提出2、19世纪后叶20世纪前半叶：细胞学说提出、组织学建立描述组织学3、20世纪50年代80年代初 ：电子显微镜发明功能组织学4、20世纪80年代中期以后 ：分子形态学三、组织学的研究技术A.光镜标本制作技术1、石蜡切片术paraffin sectioning：取材、固定、脱水、包埋、切片、染色、透明、封片。新鲜，结构完整，约1.0cm大小。取材 蛋白质凝固剂（常用甲醛）浸泡固定，保存组织的原有结构。梯度浓度酒精脱水，二甲苯置换出酒精（透明），石蜡包埋。切片机切片，510cm厚。贴片、二甲苯脱蜡、苏木精-伊红（HE）染色。脱水、滴加树胶、盖玻片密封保存。切片观察
3、封片染色固定脱水和包埋光镜观察。2、苏木精- 伊红染色法（HE染色法）：苏木精为碱性染料，使染色质和核糖体着紫蓝色(嗜碱性) ；伊红为酸性染料，使胞质和细胞外基质着红色（嗜酸性);对两种染料着色均不显著为中性。3、异染性：某些结构成分如肥大细胞的胞质颗粒，当用碱性染料如甲苯胺蓝等染色时，不是呈现染料的蓝色而是呈紫红色，这种染色特性为异染性。4、亲银性：用硝酸银染色时，有些组织结构可直接使银离子还原为银颗粒而呈黑色，称之。5、嗜银性：有些组织结构需加入还原剂才能显色，称之。6、冰冻切片术：用于制作较大组织块。（或应火棉胶包埋）7、涂片：用于血液、体液、培养细胞等。8、铺片：用于疏松结缔组织、肠系
4、膜等。9、磨片：用于骨、牙等硬组织。 B. 光镜技术1、特殊染色 苏木精- 伊红染色法（HE染色法）镀银染色法：亲银性、嗜银性 醛复红染色法 甲苯胺兰染色：异染性 2、特殊的光镜技术 荧光显微镜技术：用于观察组织、细胞中有自发荧光、诱发荧光或经荧光染料染色或标记的结构。 倒置相差显微镜技术：用于观察细胞培养中活细胞的形态结构及生长变化情况。 暗视野显微镜技术：用于观察反差太小或小于普通光学显微镜分辨率的微小颗粒。 偏振光显微镜技术：是一种鉴定微细结构的光学性质的显微镜。 激光共聚焦扫描显微镜技术：是一种高光敏度与高分辨率的生物学仪器。 C.电镜技术1、透射电镜：制备程序与石蜡切片相似，但要求极
5、其严格。固定及时，树脂包埋，超薄切片（50 80nm)，电子染色（醋酸铀和柠檬酸铅），电子束激发，荧光屏显像（黑或深灰色：电子密度高，浅灰色：电子密度低）。2、扫描电镜：用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感，无需制备切片。 3、冷冻蚀刻法：观察细胞断裂表面形态结构。4、X-射线显微分析术D. 原子力显微镜术 通过尖锐探针在样品表面扫描、检测二者的原子间相互作用力来获得样品表面结构信息。E. 放射自显影术 通过研究机体对放射性核素的摄入和代谢过程来显示其功能状态的，可分别在整体、细胞和超微结构水平进行研究。F. 组织化学与细胞化学术 应用化学反应原理检测组织和细胞的化学成分并进行定位和定量
6、的技术。1、糖类：碘酸-Schiff反应2、脂类：苏丹染料、四氧化锇3、核酸：Fleugen反应、甲基绿-派诺宁4、酶类：G. 免疫细胞化学（又称免疫组织化学） 根据免疫学原理，应用带有可见标记的特异性抗原-抗体反应，检测组织、细胞中抗原性物质的一种技术。H. 集素细胞化学 细胞表面的糖链或寡糖是重要的识别标志，与细胞的分化、成熟、行为、恶性变等有关。此技术可敏感地鉴定和定位这些糖链。I. 原位杂交 是一种在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术。敏感度高、特异性强。G. 体组织和活细胞研究方法 1细胞培养术与组织工程 2.活体染色与或细胞染色 3.细胞分离素：差速离心法、密度梯度离心法。 H. 形态学研究定量术： 1.形态计量术；2.显微分光光度术；3.图像分析术；4.流式细胞术四、组织学的学习方法 1、审视角度 生物大分子亚细胞细胞组织器官系统有机体。 基本组织学（上皮、结缔、肌、神经组织） 组织学 器官组织学（循环、免疫、消化等系统） 胚胎学 2、形态结构 机能； 3. 平面切面 立体结构（理论与实验）4、静止 动态； 5. 分析归纳比较6、前期基础； 7. 综合运用各种教材、教具3
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