分光光度法测定海带中碘的含量

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1、分光光度法测定海带中碘的含量一、实验目的巩固分光光度计的使用和标准曲线的绘制方法。二、实验原理海带是含碘比较丰富的食品,但碘有部分以有机态存在,无法用常量法测定。 常用方法是将样品灰化,然后用维生素C将碘还原成,与金属离子结合成碘化 物,碘化物在酸性条件下与双氧水作用,定量析出碘。当有机溶剂萃取时,碘溶 于有机溶剂CCI4呈粉红色,颜色深浅与含量的大小成正比,故可用分光光度法 离子反应式如下:H2O2+2+2H+I+2H2O三、仪器和试剂1仪器:722型分光光度计、电炉、马弗炉、烘箱、25mL移液管、5mL吸量管、(50mL、250mL)容量瓶、研钵、坩埚、电子天平、漏斗、漏斗架、玻璃棒2试剂

2、:碘酸钾、四氯化碳、维生素 C、20% H2SO4溶液(取10.2mL95%98%浓硫酸加水稀释成50 mL溶液)、30% H2O2溶液四、实验步骤1碘酸钾溶液的配制:称取0.4213g碘酸钾,加水溶解,倒入250mL的容量瓶中, 稀释定容至250mL (1000卩gmL-1),用移液管从里面移取 25 mL试液于250 mL 的容量瓶中,定容至250 mL (100卩gmL-1),此为碘标准溶液。2吸收曲线的测定:取5 mL碘酸钾溶液加入50 mL的容量瓶中,加入适量维生 素C,摇匀后,再加入3滴20% H2SO4溶液(调节溶液的pH为12),5 mL 30 % H2O2溶液,摇匀后放置3m

3、in,然后加入20 mL四氯化碳,振荡1min,静置分 层后,用移液管移去上层溶液,用移液管取下层溶液于1cm比色皿中测定吸收溶液的吸光度,以四氯化碳为参比溶液,波长在450570nm之间,每隔10nm测定一次吸光度,记录数据,绘制成吸收曲线,从而确定测定碘含量的最大吸收 波长。3标准曲线的绘制:在序号为15的5只50 mL容量瓶中,用吸量管分别按下 表由上到下依次加入各试剂。容量瓶编号12345100卩gmL-1的碘标准液/mL2.04.06.08.010.0维生素C适量适量适量适量适量20% H2SO4 溶液 /滴2222230%H2O2 溶液 / mL5.05.05.05.05.0CCI

4、4溶液 / mL20.020.020.020.020.0用1cm比色皿在最大吸收波长处,以四氯化碳为参比液,测15号四氯化碳层液体的吸光度,以碘含量为横坐标,相应吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。 4样品的处理及测定:将海带洗涤以后放在烘箱中干燥,用研钵研碎,在电炉上 炭化后,放入马弗炉(600C)中灰化,灰化后加入热的蒸馏水溶解,趁热过滤, 洗涤34次,加入适量的维生素C,摇匀后,加入25滴20% H2SO4溶液,加入 5.0 mL的30%H2O2溶液。摇匀,放置3min后,加CCI4溶液20.0 mL,振荡1min, 移取下层溶液,在与步骤3相同条件下,测定试样的吸光度,然后由标准曲线计 算试

5、样中碘的含量。五、数据处理表1不同波长下测定碘的吸光度入/nm450460470480490500510520530540550560570A表2标准液的吸光度编 口项目、二12345V/mL2.04.06.08.010.0CI/ 卩 mL-110.2920.5830.8741.1651.45A表3样品数据记录项目数据海带质量/g样品溶液吸光度A0六、注意事项1据有关文献,海带中碘的含量一般在 0.05%0.1 %之间。2在样品处理时,将海带直接灰化,由于单质碘容易升华,导致海带灰中碘的大 量损失。应在海带灰化前,用碱溶液浸泡干海带,破坏海带中的有机质,然后进 行灰化。这时因为在碱性条件下,碘以碘盐形式存在,不易被空气氧化,从而减 少了在灰化过程中碘的损失。

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