植物叶绿素测定方法
![植物叶绿素测定方法_第1页](https://file2.zhuangpeitu.com/fileroot2/2022-2/9/78333cd9-c0c0-43b5-a4e3-3e69f5d758cc/78333cd9-c0c0-43b5-a4e3-3e69f5d758cc1.gif)
![植物叶绿素测定方法_第2页](/images/s.gif)
《植物叶绿素测定方法》由会员分享,可在线阅读,更多相关《植物叶绿素测定方法(2页珍藏版)》请在装配图网上搜索。
1、叶绿素含量的测定一、原理根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收,利用分光光度计在某一特定波长测定其吸光度,即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯比尔定律,某有色溶液的吸光度A与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比,即A=aCL式中:a比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位,液层厚度为1cm时,a为该物质的吸光系数。各种有色物质溶液在不同波长下的吸光系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的吸光度而求得。如果溶液中有数种吸光物质,则此混合液在某一波长下的总吸光度等于各组分在相应波长下吸光度的总和。这就是吸光度的加和性。今欲测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量,只需测定该提取
2、液在三个特定波长下的吸光度A,并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的吸光系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰,所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。二、材料、仪器设备及试剂(一)材料:新鲜(或烘干)的植物叶片(二)仪器设备:1)分光光度计;2)电子顶载天平(感量0.01g);3)研钵;4)棕色容量瓶;5)小漏斗;6)定量滤纸;7)吸水纸;8)擦境纸;9)滴管。(三)试剂:1)95%醇(或80%5酮)(v丙酮:v乙醇=2:1的95%水溶液);2)石英砂;3)碳酸钙粉。暗中2h,0.5g,25ml三、实验步骤1 )取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,
3、擦净组织表面污物,剪碎(去掉中脉),混匀。2 )称取剪碎的新鲜样品0.2g,共3份,分别放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及23ml95%乙醇,研成均再加乙醇10ml,继续研磨至组织变白。静置35min。3)取滤纸1张,置漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,过滤到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。4)用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至25ml,摇匀。5)把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内,以95叱醇为空白,在波长663nm和645nm下测定吸光度。在波长663nm、645nm下或652nm测定吸光度。四、实验结果计算叶绿素a的含量=12.7xOD663-2.69父OD645叶绿素a的含量=22.9mOD6454.86父OD663叶绿素a、b的总含量=8.02义OD663+20.20父OD645
- 温馨提示:
1: 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
2: 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
3.本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
5. 装配图网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。