精品资料（2021-2022年收藏的）生物制药学

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1、生物制药学试题1一、名词解释。本题共10小题，满分20分。1、生物制药2、Cytokine3、互补决定区4、接触抑制现象5、Immobilized enzyme6、转化细胞7、愈伤组织8、HAMA9、t-PA10、包含体二、填空题。本题共7小题，满分20分。 1、抗体同抗原结合决定于抗体分子的 区，异种免疫原性则决定于抗体的 区。2、按照生物工程学科范围的不同，生物制药分为 、 、 和 。3、常用的克隆载体有 、 、 和 。4、用木瓜蛋白酶处理抗体将得到1个 片段和2个 片段。5、固定化酶的方法有 、 和 。6、野生型农杆菌Ti质粒包括 、 和 三个区。7、检测基因工程药物中的内毒素，传统上采

2、用 法，现在多采用 法。三、单项选择题。本题共10小题，满分10分。 1、（）在动物免疫时需要添加佐剂。A、颗粒性抗原 B、细胞性抗原C、可溶性抗原D、半抗原2、下列何种细胞不是用于生产的动物细胞？（ ）A、原代细胞 B、传代细胞C、转化细胞D、胚性细胞3、（）发现发酵是由微生物引起的，从而使发酵技术成为一门科学。A、詹纳 B、弗莱明C、巴斯德D、班廷4、下列不属于多糖类药物的是（ ）。A、干扰素 B、硫酸软骨素C、透明质酸D、肝素5、下列哪个选项不属于固定化酶的优点。（ ）A、可反复使用 B、不影响酶的活性C、易与产物分离D、容易实现反应的连续化6、插入失活筛选重组子是利用了载体上的（）。A

3、、抗性基因 B、lacZ基因C、荧光素标记D、放射性标记7、能使肝素失去活性的药物是（ ）。A、鱼精蛋白 B、硫酸软骨素C、透明质酸D、弹性蛋白酶8、免疫球蛋白不包括（ ）。A、IgA B、IgMC、IgDD、IgF9、适于花粉、花药培养的培养基是（ ）。A、 MS培养基B、基础培养基C、N6培养基D、B5培养基10、直接利用噬菌体DNA为载体以质粒转化方式导入到受体细胞中，此种基因导入宿主细胞的方式称为（ ）。A、转化B、转导C、转染D、感染四、简答题。本题共6小题，满分30分。 1、克隆载体应具备的条件有哪些？2、基因工程制药时获取目的基因的方法有哪些？3、动物细胞培养时需要的条件有哪些？

4、4、现代生物工厂是如何来生产酶制剂的？5、举例说明蛋白质类药物的分离纯化方法。6、HAT选择培养基筛选杂交瘤细胞的机理是什么？五、论述题。本题共2小题，满分20分。 1、在基因工程制药中要想提高外源基因在工程菌中的表达量应该从哪些方面考虑？2、请画出抗体分子的结构，并据此说明鼠源性单克隆抗体药物的改造。答案1一、 名词解释1、 生物制药是指利用生物体、生物组织及其代谢产物或生物过程生产药物的技术。2、 细胞因子是由机体各种组织细胞分明的高活性的多肽或蛋白质，能调节机体的生理功能，调控细胞的生长、分化、调亡，并参予免疫和病理反应。3、 在抗体可变区内高度可变的区域，决定了抗体和抗原的特异结合。4

5、、 接触抑制现象：贴壁细胞在体外培养时从接种到长满器壁底面后，由于细胞繁殖数量增多相互接触，密度不再增加。5、 固定化酶，通过物理、化学方法处理使酶限制或固定于特定空间位置，使酶不易随水流失而又能发挥催化作用。6、 动物细胞经自然或人为因素转化为异倍体后，细胞寿命由有限转为无限，这样的细胞即为转化细胞。7、 在人工培养基上由外植体长出的一团无序生长的薄壁细胞。8、 人抗鼠抗体，是由于人体内引入了鼠源蛋白产生的。9、 组织型纤溶酶原激活剂，抗凝血药，抑制纤溶酶的产生。10、 当原核生物表达真核基因时由于原核生物与真核生物在蛋白质修饰机制上的差异造成表达的蛋白产物一级结构正确而不能正确折叠，使蛋白

6、质溶解度下降，活性丧失。二、 填空1、V，C2、基因工程制药、发酵工程制药、细胞工程制药、酶工程制药。3、质粒、噬菌体、粘粒（考斯质粒）、人工染色体4、Fc； Fab5、载体结合法、共价交联法、包埋法6、T-DNA区、Vir区和冠瘿碱代谢酶编码区7、家兔热原法、鲎试剂法三、 选择题1、C；2、D；3、C；4、A；5、B；6、A；7、A；8、D；9、C；10、C四、 简答题1、 克隆载体应具备的条件有哪些？1具有针对受体细胞的亲缘性或亲和性（可转移性） 2具有复制起始位点，能够自主复制3具有较高的外源DNA的装载能力 4具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点 5具有合适的筛选标记 2、基因工程制药

7、时获取目的基因的方法有哪些？1. 从生物体内提取DNA，构建基因组DNA文库，从中分离基因2. 以mRNA为模板，反转录成cDNA，构建 cDNA文库3. 聚合酶链反应4. 化学合成法3、动物细胞培养的条件一、细胞的生存环境1) 所有的与细胞接触的设备、器材和溶液, 都必须保持无菌, 避免细胞外微生物的污染；无毒绝对不可有有害的物质, 避免即使是极微量的有害离子的掺入；2) 温度: 37 3) O2：保证有适量的氧气供应4) CO25) 细胞培养的用水必须进行特殊的处理,才能使用。6) pH: 7.2-7.47) 渗透压二、细胞的营养需要培养基：动物细胞对培养基的要求较高, 而且随着细胞的种系

8、不同, 要求有很大差异。大致可以分成3类:天然培养基、合成培养基和无血清培养基。4、现代生物工厂是如何来生产酶制剂的？1) 微生物发酵 2) 从发酵液中提取酶 用真空转鼓过滤机将酶与发酵液的其他成分分离开来。过滤机外涂有厚厚的一层硅藻土，水和酶可以渗透过去，而培养基和微生物却被黏着在硅藻土表面上。3) 制剂 在工厂里，对酶做最后的剂型选择。酶的最终用途决定产品以何种剂型出厂，液体酶或固体酶。液体洗涤剂一般用液体型酶。而多数酶制剂为固态酶，称作酶粒。4) 废料处理5、举例说明蛋白质类药物的分离纯化方法。（1）按溶解度不同进行分离的方法 蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。蛋白质形成胶体的稳定因素：

9、水化层和同种电荷，打破即沉淀。常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法（如抗体抗原）等。（2）按分子大小分离的方法 这类方法有超滤法和透析法、分子筛层析法、密度梯度离心法等。其中透析法可用于生物大分子物质的浓缩、分级和脱盐。（3）按所带电荷不同进行分离的方法 氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解质，它们具有等电点，在离开等电点的pH时不同蛋白便会带不同的电荷。利用带电性质进行分离。利用电学性质进行分离的方法有离子交换柱层析法、电泳法（醋酸纤维薄膜电泳、PAGE、等电聚焦）等。（4）亲和层析法 大部分生物活性物质都有其作用的靶物质（配基 ），如酶与底物（或抑制剂）、抗原与

10、抗体、激素与受体等，利用化合物的之间的特异的亲合作用设计的层析分离技术称为亲和层析。蛋白质能与配基特异结合，亲和层析分离专一性强，操作简便。6、细胞融合后可以产生脾脾、脾瘤、瘤瘤杂交细胞以及未融合的细胞，故需采用HAT选择培养基筛选出脾瘤杂交细胞。HAT选择培养基的成份H：次黄嘌呤 A：氨基喋呤T：胸腺嘧啶骨髓瘤细胞中不含HGPRT酶和TK酶，无法通过补救途径合成DNA，而正常合成DNA的途径又被阻断，因此瘤瘤融合细胞和瘤细胞因无法合成DNA而死亡。脾细胞中含有这两种酶，但脾脾融合细胞和脾细胞不能在体外增殖。只有脾瘤融合细胞才能既能合成DNA又能体外生长，故可以在HAT培养基上存活。五、论述题

11、1、1、外源基因的拷贝数一般来说细菌内基因拷贝数增加，基因的表达产物也增加。将外源基因克隆到高拷贝数的表达载体上，导致其上的外源基因拷贝数的增高。2、外源基因的表达效率 欲实现外源基因在原核细胞中高效地表达，应考虑表达载体、外源基因的性质、原核细胞启动子和SD序列、阅读框架及密码子组成等基本条件。3、表达产物的稳定性当外源基因表达时，细胞内降解该蛋白质的酶由于应急反应其产量会迅速增加。所以，即使原始表达量很高，由于很快在细胞体内被降解，因而实际产量很低。 为提高表达产物在菌体内的稳定性，可以采用下列几种方法： 组建融合基因，产生融合蛋白。许多融合蛋白与天然的真核蛋白相比较，在细菌体内比较稳定，

12、不易被细菌酶类所降解。 利用大肠杆菌的信号肽或某些真核多肽中自身的信号肽，把真核基因产物运输到胞浆周质的空隙中，而使外源蛋白不易被酶降解。4、宿主细胞的代谢负荷外源基因的大量表达，需利用宿主细胞内的原料，会打破宿主细胞的生长平衡，造成宿主的负荷，影响细胞的生长，进而又影响基因的表达。另外，外源基因的表达产物属于异己物质，并可能对宿主细胞有毒性。可将细胞的生长和外源基因的表达分成两个阶段，先不让基因表达，当宿主细胞的生物量达到饱和时，再诱导基因产物的合成，以减低宿主细胞的代谢负荷。5、工程菌的培养条件外源基因的高效表达，不仅涉及宿主、载体和克隆基因三者之间的相互关系，而且与其所处的环境条件息息相

13、关，所以必须优化基因工程菌的发酵条件，进一步提高基因表达工程水平。2、McAb 在免疫导向疗法中存在的问题（障碍）： A、McAb均是鼠源性抗体，应用于人体内可产生人抗鼠抗体（HAMA），加速了排斥反应，在人体内的半衰期只有56h，维持有效药物作用靶组织时间； B、完整的抗体分子的相对分子质量过大，难以穿透实体肿瘤组织，达不到有效的治疗浓度。故要利用基因工程技术对McAb进行改造以降低McAb的免疫源性；降低McAb的相对分子质量。制备出了人鼠嵌合抗体、改型抗体、单链抗体、单域抗体、最小识别单位等多种类型，基本上消除了抗体的鼠源性（免疫源性），相对分子质量只有完整抗体分子的1/801/3。原理

14、：抗体同抗原结合的功能决定于抗体分子的可变区（V），同种性免疫源性则决定于抗体分子的稳定区（C）。一、 人鼠嵌合抗体（chimeric antibody）在基因水平上把鼠源性单克隆抗体的H和L链的V区基因分离出来，分别与人Ig的H链和L链的C区基因连接，即成为人鼠嵌合抗体的H和L链基因，再共转染骨髓瘤细胞，就能表达出完整的Chimeric Antibody.二、 改型抗体(Reshaping antibody)Ig分子中参与构成抗原结合部位的区域是 H和L链 V区中的互补性决定区 (CDR区)。如果用鼠源性单克隆抗体的CDR序列替换人 Ig分子中的CDR序列，则可使人的 Ig分子具有鼠源性单克

15、隆抗体的抗原结合特异性。抗体分子中鼠源部分只占很小比例，可基本消除免疫源性。这种改型抗体也称CDR移植抗体 (CDR grafting antibody)。三、 小分子抗体基因工程小分子抗体仅表达鼠源性单克隆抗体的V区片段，其相对分子质量仅为原抗体的1/801/3。(1) Fab片段抗体：VH+CH1 (3)单链抗体：VH-Linker-VL(2) FV抗体：VH+VL (4)单域抗体：VH或VL生物制药学试题2一、名词解释。本题共10小题，满分20分。1、生物药物2、McAb3、基因治疗4、基因文库5、Immobilized enzyme6、转化细胞7、植物组织培养8、抗原决定簇9、IFN1

16、0、GMP二、填空题。本题共6小题，满分20分。 1、体外培养的动物细胞根据其生长方式可分为 、 和 三类。2、单个细胞基因表达产物的产量与 、 、 和 等因素有关。3、在HAT选择培养基中，H代表 ； A代表 ； T代表 。4、用木瓜蛋白酶处理抗体将得到 个 片段和 个 片段。5、 单克隆抗体体外培养的方法有 、 和 。6、野生型Ti质粒包括 、 和 三个区。三、单项选择题。本题共10小题，满分10分。 1、（）在动物免疫时需要添加佐剂。A、颗粒性抗原 B、细胞性抗原C、可溶性抗原D、半抗原2、下列何种细胞不是用于生产的动物细胞？（ ）A、原代细胞 B、传代细胞C、转化细胞D、胚性细胞3、单

17、子叶植物转基因最常用到的方法是（）。A、农杆菌转化法 B、基因枪转化法C、叶盘法D、花粉管导入法4、下列何种药物属于抗肿瘤的酶类药物（ ）。A、谷氨酰氨酶 B、链激酶C、过氧化物酶D、弹性蛋白酶5、在原核表达时核糖体的结合位点是（ ）。A、启动子 B、转录终止子C、SD序列D、AUG起始密码子6、原核表达时利用信号肽序列的表达方式是（ ）。A、融合表达 B、非融合表达C、分泌表达D、包含体表达7、能使肝素失去活性的药物是（ ）。A、鱼精蛋白 B、硫酸软骨素C、透明质酸D、弹性蛋白酶8、免疫球蛋白不包括（ ）。A、IgA B、IgMC、IgDD、IgF9、下列属于生长素类的植物激素是（ ）。B、

18、 2，4DB、玉米素C、腺嘌呤D、6BA10、下列载体按携带外源基因的能力从小到大的顺序排列，顺序正确的是（）。A、Plasmid Cosmid Phage YACB、Plasmid Phage Cosmid YACC、Plasmid Cosmid YAC PhageD、Plasmid YAC Cosmid Phage四、简答题。本题共5小题，满分30分。 1、表达载体应具备的条件有哪些？2、与真核生物相比，原核生物基因表达的特点有哪些？3、植物细胞培养基的主要成分有哪些？4、简述ELISA实验的原理和步骤。5、动物细胞培养时的培养基可分为哪几种？各有何特点？五、论述题。本题共2小题，满分20

19、分。 1、试述制备单克隆抗体药物的工艺流程。2、请写出溶血和凝血的过程，并说明抗凝血药物的作用机理。答案2五、 名词解释11、 用微生物、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等直接制备或经加工制成的，作为预防、诊断、治疗疾病的制剂通称为生物制品。12、 单克隆抗体，针对一个抗原决定簇产生的抗体，由一个B淋巴细胞产生。13、 是指采用一定的技术和方法将目的基因导入体内以纠正病源基因从而达到治疗效果的方法。 14、 人工构建的大量含有特定生物个体全部基因的DNA片段的克隆。15、 固定化酶，通过物理、化学方法处理使酶限制或固定于特定空间位置，使酶不易随水流失而又能发挥催化作用。McAb1

20、6、 动物细胞经自然或人为因素转化为异倍体后，细胞寿命由有限转为无限，这样的细胞即为转化细胞。17、 在无菌条件下利用人工培养基和环境对植物体的器官、组织和细胞进行离体培养的技术。18、 抗原分子表面能与其抗体结合的部位。19、 干扰素，是人体细胞分泌的一类活性蛋白质，可以抗病毒、抗肿瘤、提高人体的免疫功能。20、 GMP：药品质量管理规范，国家规定的药品生产企业的行业标准。六、 填空1、贴壁细胞、悬浮细胞（非粘附型细胞）、兼性贴壁细胞2、外源基因拷贝数、基因表达效率、表达产物稳定性、宿主细胞代谢负荷3、次黄嘌呤、氨基喋呤、胸腺嘧啶4、2 Fab；1 Fc5、悬浮培养、包埋培养、微囊化培养6、

21、T-DNA区、Vir区和冠瘿碱代谢酶编码区七、 选择题1、C；2、D；3、B；4、A；5、C；6、C；7、A；8、D；9、A；10、B八、 简答题1、表达载体1. 具有强启动子，能为RNA聚合酶所识别 2具有强终止子，使RNA聚合酶只转录目的基因而不转录其它无关基因。3所产生的mRNA 必须具有翻译起始信号（原核细胞须有起始密码AUG和SD序列），以便转录后能顺利翻译。4具有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录，以获得外源蛋白质表达合成的最佳时机。 2、1) 原核生物只有一种RNA聚合酶(真核生物有3种)，仅能识别原核基因启动子，而不能识别真核基因启动子。因而利用原核细胞表达真核

22、基因时，一般应使用原核启动子。2) 原核基因一般不含有内含子(intron)，在原核细胞中缺乏mRNA转录后的加工系统。因此，在原核细胞中表达真核基因时，目的基因必须无内含子序列，应使用cDNA或人工合成基因。3) 原核基因的mRNA含有SD序列，该序列位于mRNA的5端起始密码子的上游，能与16S核糖体RNA 3端互补结合，起始蛋白质的合成。在真核生物的基因则缺乏该序列。 4) 原核细胞缺乏真核细胞对蛋白质的翻译后加工能力，利用原核细胞表达的目的蛋白不能进行糖基化、磷酸化修饰，也不能进行正确的折叠等，因而表达蛋白的生物学活性和功能并不能得到完全保证。在原核细胞表达外源基因，尤其是利用大肠杆菌

23、高效表达真核生物基因时，表达产物通常在胞浆聚集，形成包含体(inclusion body)。包含体蛋白不具有该蛋白的所有生物学活性。 3、一、盐：调节PH、渗透压，酶的组成元素，包括大量和微量必需元素 大量元素：使用浓度大于30mg/L, N、P、K、Na、Ca等微量元素：使用浓度低于30mg/L, Cu、Mn、Zn、Co、Mo等铁盐：容易同其它盐发生沉淀，单独配制。二、营养物： 主要有糖、氨基酸和维生素。 糖为培养物提供所需要的碳源，并有调节渗透压的作用。常用的是2%4%的蔗糖，有时也加入葡萄糖和果糖等。 维生素植物自身合成维生素的量很少，必须加入B族维生素主要有硫胺素（维生素B1）、吡哆素

24、（维生素B6）、烟酸（维生素B3）、泛酸（维生素B5）氨基酸甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和水解酪蛋白等。三、生长物质 调节植物生长发育的微量化学物质，常用的有生长素类和细胞分裂素两类。4、抗原和抗体特异结合成复合物后，再与酶标记的二抗结合，酶又催化底物发生化学反应，产生特定的颜色。利用细胞培养板检测不同的样本，当某样本含有特定蛋白时，该孔即显示特定的颜色，从而判断为阳性。包括以下步骤：包板；洗涤；加一抗；洗涤；加二抗；洗涤；显色。5、一、天然培养基v 动物血清、组织提取液、鸡胚胎汁、水解乳蛋白、胶原等v 优点：营养价值高, 培养效果好v 缺点：来源有限、成本较高、不适合大规模生产。成分复杂，影响

25、对某些实验产物的提取和实验结果的分析。 易发生支原体污染。 二、合成培养基主要成分：氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、核苷酸等v 优点：组分和含量相对固定、易控制，可标准化生产；成本低，可大量生产供应。 v 缺点：无法替代天然培养基中的一些未知成分，不能完全满足体外细胞生长需要。 解决途径合成培养基中添加小牛血清，彼此互补三、无血清培养基无血清细胞培养基的使用保证了实验结果的准确性、可重复性和稳定性，减少了细胞污染，简化了提纯和鉴定各种细胞产物的程序。适用于某种细胞株的培养液，很可能不适合另一种细胞株的生长。即使同源组织的不同细胞株，所需补加物也不同。 因此，无血清培养基尚处于研究阶段，难以

26、推广。五、论述题1、单克隆抗体的基本过程以研究的抗原对鼠进行免疫，取脾细胞培养骨髓瘤细胞细胞融合（PEG 融合）HAT培养基筛选融合细胞针对融合细胞产生的抗体进行筛选克隆培养，分离，再克隆培养对单克隆抗体进一步鉴定，大量制备2、抗血栓药包括凝血因子抑制剂（肝素抑制凝血酶原激活剂的产生）和纤溶酶原激活剂 (尿激酶、tPA)生物制药学试题3一、名词解释（每题2分，共20分）1、 生物制药2、 tPA3、 McAb4、 IFN5、 rHu CSF6、 细胞因子7、 IL8、 脱分化9、 佐剂10、CDR二、填空题（每题2分，共20分）1、 生物药物包括 、 和 。2、 按学科领域的不同，生物制药可分

27、为 、 、 和 。3、 植物培养基中含有 、 、 、 、 、 等成分。4、 植物激素包括 、 、 、 、 等五类。5、 农杆菌包括 和 两类。6、 体外培养的动物细胞根据其生长方式可分为 、 和 三类。7、根据复制的方式（拷贝数）的不同，质粒可分为两大类型 和 ，其中 是基因工程中常用的类型。8、原核表达载体可分为 、 和 三种类型。9、筛选单克隆抗体阳性克隆的方法有 、 和 。10、抗体的恒定区与 有关，而抗体的可变区与 有关。三、单项选择题（每题1分，共10分）1、 基因工程制药中常用的限制性内切酶是（）。A、I型 B、II型C、III型 D、IV型2、 Klenow酶与DNA聚合酶I相比

28、不具有()的活性。A、53核酸内切酶活性B、35核酸内切酶活性C、53核酸外切酶活性D、35核酸外切酶活性3、 下列何种激素不属于生长素？A、2,4DB、IBAC、NAAD、6BA4、 植物激素（ ）是从经过高压灭菌处理的鲱鱼精细胞DNA中发现的。A、腺嘌呤 B、玉米素C、6苄基腺嘌呤D、激动素5、下列何种DNA聚合酶是不依赖模板的DNA聚合酶？（）A、DNA聚合酶IB、DNA聚合酶I大片段C、逆转录酶D、末端转移酶6、在下列酵母克隆载体中（）不能在染色体外自主复制。A、YIp质粒 B、YRp质粒C、YEp质粒D、YCp质粒7、（）在动物免疫时需要添加佐剂。A、颗粒性抗原 B、细胞性抗原C、可

29、溶性抗原D、半抗原8、人鼠嵌合抗体是由（）组成的？A、人源抗体的V区+鼠源抗体的C区 B、人源抗体的Fab区+鼠源抗体的Fc区C、人源抗体的C区+鼠源抗体的V区 D、人源抗体的Fv区+鼠源抗体的Fc区9、下列何种药物不属于人工牛黄的成分？（ ）A、胆酸 B、胆红素C、胆碱D、胆固醇10、能使肝素失去活性的药物是（ ）。A、鱼精蛋白 B、硫酸软骨素C、透明质酸D、弹性蛋白酶四、简答题（每题5分，共20分）1 用于工业生产的动物细胞有哪几类？各有何特点？2 与克隆载体相比表达载体应具备哪些条件？3 试述溶血和凝血的过程，并请说明抗凝血药物是如何发挥作用的？4请列举第二代抗体药物单克隆抗体药物的优缺

30、点。五、论述题（每题10分，共30分）1、 试列举蛋白质类药物分离纯化的方法。2、 试述研制单克隆抗体的工艺流程。3、 请说明HAT选择培养基筛选脾瘤杂交瘤细胞的机理。答案3一、名词解释1、 生物制药是指利用生物体、生物组织及其代谢产物或生物过程生产药物的技术。2、 组织型纤溶酶原激活剂，抗凝血药，抑制纤溶酶的产生。3、 单克隆抗体，针对一个抗原决定簇产生的抗体，由一个B淋巴细胞产生。4、 干扰素(Interferon)是人体细胞分泌的一类活性蛋白质，可以抗病毒、抗肿瘤、提高人体的免疫功能。5、 重组人集落刺激因子，是一组控制粒细胞、单核巨噬细胞及造血细胞增殖和分化的糖蛋白。6、 细胞因子是由

31、免疫细胞或相关细胞分泌的高活性的多肽或蛋白质，能调节机体的生理功能，参与各种细胞的生长、增殖、分化、凋亡。包括细胞生长因子和细胞生长抑制因子。7、 白细胞介素，由白细胞或其它体细胞产生又在白细胞和其它细胞间起调节和介导作用，是一类重要的免疫调节剂，能刺激淋巴细胞的增殖，抗肿瘤。8、 在离体条件下，外植体分化的细胞转变成分生状态，形成胚性细胞团（胚性愈伤组织）的现象。9、 佐剂定义：又称免疫增强剂，伴随抗原物质注射机体，可增强抗原的免疫原性，佐剂可使弱抗原物质成为有效的抗原。10、 互补决定区，在抗原V区上有三个，决定了抗体和抗原的特异结合。二、填空题11、 天然生化药物、生物制品和生物技术药物

32、。12、 发酵工程制药、基因工程制药、细胞工程制药和酶工程制药13、 大量元素、微量元素、铁盐、碳源、维生素、氨基酸14、 生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸和乙烯。15、 根癌农杆菌、发根农杆菌16、 贴壁依赖型、非贴壁依赖型和兼性贴壁细胞17、 严谨型质粒和松弛型质粒，松弛型质粒18、 融合型表达载体、非融合型表达载体和分泌型表达载体19、 放射免疫、酶联免疫、免疫荧光技术10、异种抗原性、与抗原的特异结合三、选择题1、B； 2、C； 3、D； 4、C； 5、D； 6、A； 7、C； 8、C； 9、C ； 10、A 四、简答题1、原代细胞：组织、器官粉碎消化获得，很难保证细胞一致性，含多种

33、细胞，费时费力，获得数目有限二倍体细胞：原代细胞经传代、筛选、克隆化后得到了纯化的单形细胞。可传代扩增，但寿命有限转化细胞：染色体异倍化，细胞具有无限增殖的能力，更适于工业化生产，但有致癌的危险。2、1. 具有强启动子，能为RNA聚合酶所识别 2具有强终止子，使RNA聚合酶只转录目的基因而不转录其它无关基因。3所产生的mRNA 必须具有翻译起始信号（原核细胞须有起始密码AUG和SD序列），以便转录后能顺利翻译。4具有阻遏子，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录，以获得外源蛋白质表达合成的最佳时机。3、抗血栓药包括凝血因子抑制剂（肝素抑制凝血酶原激活剂的产生）和纤溶酶原激活剂 (尿激酶、t

34、PA)4、具有良好的均一性和高度的特异性，单克隆抗体在疾病的诊断中得到广泛应用。但用于治疗时有缺陷：（1） 是鼠源性的，在人体内反复应用会引起人抗鼠抗体（HAMA）反应，发生排斥，从而降低疗效，甚至可引起过敏反应。（2） 分子量大，难以进入相关组织发挥药效。五、论述题1、（1）按溶解度不同进行分离的方法 蛋白质、酶的初步纯化往往用沉淀法。蛋白质形成胶体的稳定因素：水化层和同种电荷，打破即沉淀。常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、与靶物质结合沉淀法（如抗体抗原）等。（2）按分子大小分离的方法 这类方法有超滤法和透析法、分子筛层析法、密度梯度离心法等。其中透析法可用于生物大分子物质的浓缩

35、、分级和脱盐。（3）按所带电荷不同进行分离的方法 氨基酸、多肽、蛋白质、酶均为两性电解质，它们具有等电点，在离开等电点的pH时不同蛋白便会带不同的电荷。利用带电性质进行分离。利用电学性质进行分离的方法有离子交换柱层析法、电泳法（醋酸纤维薄膜电泳、PAGE、等电聚焦）等。（4）亲和层析法 大部分生物活性物质都有其作用的靶物质（配基 ），如酶与底物（或抑制剂）、抗原与抗体、激素与受体等，利用化合物的之间的特异的亲合作用设计的层析分离技术称为亲和层析。蛋白质能与配基特异结合，亲和层析分离专一性强，操作简便。2、以研究的Ag对鼠进行免疫，取脾细胞培养骨髓瘤细胞细胞融合（PEG 融合）选择培养基筛选融合

36、细胞针对融合细胞产生的抗体进行筛选克隆培养，分离，再克隆培养对单克隆抗体进一步鉴定，大量制备3、细胞融合后可以产生脾脾、脾瘤、瘤瘤杂交细胞以及未融合的细胞，故需采用HAT选择培养基筛选出脾瘤杂交细胞。HAT选择培养基的成份H：次黄嘌呤 A：氨基喋呤T：胸腺嘧啶骨髓瘤细胞中不含HGPRT酶和TK酶，无法通过补救途径合成DNA，而正常合成DNA的途径又被阻断，因此瘤瘤融合细胞和瘤细胞因无法合成DNA而死亡。脾细胞中含有这两种酶，但脾脾融合细胞和脾细胞不能在体外增殖。只有脾瘤融合细胞才能既能合成DNA又能体外生长，故可以在HAT培养基上存活。生物制药学试题4一、名词解释（每题2分，共20分）10、

37、生物制药11、 植物细胞和组织培养12、 EPO13、 McAb14、 补体系统15、 TNF16、 生物技术药物17、 细胞因子18、 佐剂10、CDR二、填空题（每题2分，共20分）7、 生物药物包括 、 和 。8、 按学科领域的不同，生物制药可分为 、 、 和 。9、 利用体外培养法大量制备单克隆抗体的方法有 、 和 。10、 干扰素包括 、 、 和 等四种。11、 性抗原在动物免疫时需要添加佐剂。12、 集落刺激因子包括 、 、 和 四种。7、抗体药物的研究经历了三个阶段，分别为 、 和 。8、原核表达载体可分为 、 和 三种类型。9、人鼠嵌合抗体是由 和 组成的10、抗体用木瓜蛋白酶

38、处理后会被分解成 个 片段和 个 片段。三、选择题（每题1分，共10分）5、 按照动物细胞培养基的分类看，动物培养基不包括（）。A、天然培养基 B、基础培养基C、合成培养基 D、无血清培养基6、 Klenow酶与DNA聚合酶I相比不具有()的活性。A、53核酸内切酶活性B、35核酸内切酶活性C、53核酸外切酶活性D、35核酸外切酶活性7、 下列药物中不具有抗凝血作用的是（）A、肝素B、透明质酸C、尿激酶D、tPA8、 植物激素（ ）是从经过高压灭菌处理的鲱鱼精细胞DNA中发现的。A、腺嘌呤 B、玉米素C、6苄基腺嘌呤D、激动素5、下列何种DNA聚合酶是不依赖模板的DNA聚合酶？（）A、DNA聚

39、合酶IB、DNA聚合酶I大片段C、逆转录酶D、末端转移酶6、在下列酵母克隆载体中（）不能在染色体外自主复制。A、YIp质粒 B、YRp质粒C、YEp质粒D、YCp质粒7、能使肝素失去活性的药物是（ ）。A、鱼精蛋白 B、硫酸软骨素C、透明质酸D、弹性蛋白酶8、免疫球蛋白不包括（ ）。A、IgA B、IgMC、IgDD、IgF9、最早被发现的植物天然细胞分裂素是（ ）。C、 激动素B、玉米素C、腺嘌呤D、6BA10、下列载体按携带外源基因的能力从小到大的顺序排列，顺序正确的是（）。A、Plasmid Cosmid Phage YACB、Plasmid Phage Cosmid YACC、Plas

40、mid Cosmid YAC PhageD、Plasmid YAC Cosmid l-DNA Plasmid l-DNA Cosmid Plasmid Plasmid l-DNA Cosmid Cosmid Plasmid l-DNA l-DNA Plasmid Cosmid 6某一重组质粒 （7.5 kb） 的载体部分有2个SmaI酶切位点。用SmaI酶切后凝胶电泳上出现4条长度不同的条带，其长度总和与已知数据吻合，该重组质粒中插入的外源DNA片段上的SmaI酶切位点共有（ D ） 5 个 4 个 3 个 2 个 至少 2 个 7若某质粒带有 lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入( D、E ) 半乳糖 葡萄糖 蔗糖 5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal） 异丙基巯基-b-半乳糖苷（IPTG） 8分子杂交的化学原理是形成（ E ） 共价键