荧光光度法测定中核黄素的含量课件
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1、荧光光度法测定样品中核黄素的含量 基础化学实验 (仪器分析实验)化学国家级实验教学示范中心化学国家级实验教学示范中心Northwest University实验技能训练要点实验技能训练要点一、实验目的二、实验原理三、实验步骤四、结果处理五、思考题六、实验延伸S0基态物质分子S0基态物质分子吸收吸收能量能量S1S1S2S2内转换内转换内转换内转换振动弛豫振动弛豫振动弛豫振动弛豫发发射射荧荧光光发发射射荧荧光光先激发先激发(激发光谱)(激发光谱)后发射后发射(发射光谱)(发射光谱) 固定发射光波长进行激发光波长扫描,找出最大激发固定发射光波长进行激发光波长扫描,找出最大激发光波长,然后固定激发光波
2、长进行荧光发射波长扫描,找光波长,然后固定激发光波长进行荧光发射波长扫描,找出最大荧光发射波长。出最大荧光发射波长。激发光波长和发射荧光波长的选择激发光波长和发射荧光波长的选择是本实验的关键。是本实验的关键。荧光分析法荧光分析法KcIF CbIkIFf030. 2 荧光分析法的特点荧光分析法的特点荧光分析仪器荧光分析仪器 光源的要求:光源的要求:M1M2出出射射狭狭缝缝光屏光屏透透镜镜平面透平面透射光栅射光栅M1M2出出射射狭狭缝缝光屏光屏透透镜镜平面透平面透射光栅射光栅O核黄素(VB2)光黄素1日立F-4500型荧光光度计及其附件。2容量瓶:50 mL。3维生素B2标准贮备液(20gmL-1):准确称取20mg维生素B2,用1/10(v/v)的醋酸定容至1000mL容量瓶中,保存于冰箱中。 醋酸:1/10(v/v)。exmaxexmaxexmaxexmax emmax 1激发波长与荧光波长有何关系?为什么?2测定过程中应注意哪些问题? 1、杨建男 徐大庆 马勇 FIA荧光光度法测定粮食中的核黄素。分析仪器1990,V04,p11.2、荧光分析原理(影印) (美)拉科维兹 编著,科学出版社 2008年03月第三版3、仪器分析教程叶宪曾,张新祥 等编著,北京大学出版社2007年01月第2版
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