《刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究（8页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究 作者：幸奠霞 刘志高 薛存宽 许明旺 张芹 熊亮 杨琼芳【摘要】 目的 探讨刺芒柄花素对去势大鼠的雌激素样作用及其对血脂的影响。方法 雌性大鼠40只，随机分为5组，即假手术组、模型组、尼尔雌醇组、刺芒柄花素低、高剂量组。去势成功后，予以高脂饮食，同时分别灌胃不同剂量的刺芒柄花素，并以尼尔雌醇和生理盐水作对照，连续用药8 w，第8周前5 d连续作阴道冲洗脱落细胞涂片。第8周末断头处死大鼠，取子宫并进行子宫指数的测定，同时取血作血脂测定。结果 与模型组比较，高剂量刺芒柄花素组阴道细胞涂片可见动情周期变化，促使去势后萎缩的子宫指数回升，子宫内膜增生，血清总
2、胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)降低，且这些作用弱于尼尔雌醇;而刺芒柄花素低剂量组无此变化。结论 刺芒柄花素在体内具有雌激素样作用，能够改善高脂饮食大鼠的血脂紊乱。 【关键词】 刺芒柄花素;雌激素样作用;血脂动脉粥样硬化(AS)所致心脑血管病变是威胁人类健康的首位疾病，雌激素对心脑血管的保护作用受到国内外学术界的关注。绝经后妇女应用激素替代疗法(HRT)能显著降低心脑血管疾病的发病率。然而，HRT所带来的不良后果如乳腺癌、子宫内膜癌1、静脉血栓2，3等，在一定程度上限制其推广应用并促使人们转而寻求更加安全有效的雌激素替代品。植物雌激素是一类和雌二醇结构相似，具有弱雌激素样作用的非
3、甾体样的植物成分，主要包含异黄酮、木酚素和香豆雌酚。红车轴草中含有鹰嘴豆芽素A、刺芒柄花素、染料木素和大豆黄素等多种异黄酮类植物雌激素4，刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A及其甙类占红车轴草总异黄酮的80%以上。本研究首次以刺芒柄花素灌胃去势后高脂食饵喂食的大鼠，初步观察提纯的刺芒柄花素在体内是否具有雌激素样效应，以及对大鼠血清脂质水平的影响。1 材料与方法1.1 主要药品、试剂及仪器1.1.1 刺芒柄花素制备 红车轴草经乙醇热回流提取，水解处理，活性氧化铝吸附后酸性醋酸乙酯洗脱，再经硅胶柱层析分离，高效液相色谱分析刺芒柄花素含量为82%;尼尔雌醇：上海医药(集团)有限公司华联制药厂(批号060501)
4、。1.1.2 其他试剂与仪器 丙硫氧嘧啶：上海复星朝晖药业有限公司(批号060901);胆固醇、胆盐：武汉亚法生物技术有限公司;蛋黄粉：浙江长兴艾格生物制品有限公司;猪油：武汉中百连锁仓储超市有限公司;AU400全自动生化分析仪：日本OLYMPUS公司。1.2 实验动物 健康成年雌性SD大鼠40只，体重在150200 g之间，购于武汉大学实验动物中心,合格证号：SCXK(鄂)20032005。1.3 实验方法1.3.1 造模及分组 采取随机方法将大鼠分为5组，每组8只。第1组为假手术组，打开腹腔切除卵巢周围小块儿脂肪后关腹。后4组采取经背双侧卵巢切除术。术后第510天连续进行阴道冲洗细胞涂片，
5、确定假手术组有正常动情周期变化而后4组无变化则为造模成功。第11天起，各组饲以高脂饮食(含猪油10%，蛋黄粉5%，胆固醇1.5%，胆盐0.2%，丙硫氧嘧啶0.2%)。与此同时，假手术组及模型组每日灌胃生理盐水1 ml/100 g，尼尔雌醇组每周一灌胃尼尔雌醇2.5 mg/kg，刺芒柄花素低剂量及高剂量组每日分别灌胃刺芒柄花素20、100 mgkg-1d-1，连续8 w。1.3.2 取材 第8周周一开始行阴道冲洗脱离细胞涂片，第8周末断头处死大鼠，取血0.2 ml，待其自然凝固后采用全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和高密度脂蛋白胆固醇(H
6、DLC)含量。同时立即取出子宫并剥离周围结缔组织，称重后将标本置于10%甲醛中固定，石蜡包埋切片后进行HE染色，光镜下观察子宫内膜上皮变化。1.4 统计学分析 数据以xs表示，采用SPSS14.0统计软件，用单因素方差分析进行多组均数比较，再用最小有意义差异法(LSD法)进行两两比较。2 结 果2.1 大鼠阴道细胞涂片 假手术组和尼尔雌醇组呈现正常的动情周期变化，可见动情期大量无核角化上皮细胞;模型组及刺芒柄花素低剂量组无动情周期变化，表现为动情间期的大量白细胞。刺芒柄花素高剂量组亦可见动情期变化，镜下见无核角化上皮，且互相融合。见图1。2.2 各组子宫系数比较 按照公式子宫系数=子宫重量/体
7、重(g/kg)各组大鼠子宫指数的均值比较中，假手术组最高，尼尔雌醇组和刺芒柄花素高剂量组其次，刺芒柄花素低剂量组和模型组最低。模型组与假手术组子宫指数比较，差异有统计学意义(P<0.01);尼尔雌醇组子宫指数较模型组明显升高(P<0.01)，与假手术组差异无统计学意义(P>0.05);低剂量刺芒柄花素使子宫指数有所提高，但与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05);高剂量刺芒柄花素可提高去势大鼠的子宫指数(P<0.01)，但该作用弱于尼尔雌醇组(P<0.01)。见表1。表1 各组子宫指数比较与假手术组比较：1)P<0.01;与模型组比较：2)P&l
8、t;0.01;与尼尔雌醇组比较：3)P<0.012.3 对子宫内膜的影响 假手术组子宫内膜上皮呈柱状，细胞核位于基底部。模型组子宫内膜上皮细胞萎缩呈扁平状。尼尔雌醇组内膜增生形成假复层，内膜上皮细胞呈高柱状，核浆比例增大，可见大量核下空泡，腺体上皮增生，亦可见核下空泡。刺芒柄花素低剂量组内膜上皮较模型组无明显差异，高剂量组的增生程度介于低剂量组和尼尔雌醇组之间，可见内膜上皮呈立方形，未见核下空泡及假复层增生。见图2。2.4 各组血脂水平的比较 模型组TC和LDLC分别较假手术组升高1.74倍和1.52倍(P<0.01),表明去势手术后由于缺乏内源性雌激素可导致TC和LDLC升高，形
9、成高脂血症。在该模型的基础上补充尼尔雌醇和高剂量刺芒柄花素后，TC和LDLC较模型组分别降低45.39%和40.90%(P<0.01)。HDLC和TG在各组之间差异无统计学意义。见表2。表2 各组血脂水平比较3 讨 论绝经后女性由于卵巢功能减退，体内雌激素水平逐渐降低，随之出现阴道、子宫萎缩，血脂代谢紊乱，骨密度降低等改变。红车轴草总异黄酮与内源性雌激素一样具有具有促进子宫增重和阴道上皮细胞角化作用。本研究结果表明，补充高剂量的刺芒柄花素后，阴道冲洗脱落细胞涂片可见大量角化上皮，表明该剂量的刺芒柄花素能够模拟雌激素在体内的作用，促使阴道上皮发生周期性改变。通过各组的子宫指数比较，发现高剂
10、量刺芒柄花素使去势大鼠子宫指数回升，但是这一作用明显弱于尼尔雌醇，病理切片进一步表明，刺芒柄花素使去势后萎缩子宫内膜及肌层增厚，内膜上皮恢复至立方形，但程度较轻，不会出现过度增生形成的假复层改变及核下空泡。但低剂量刺芒柄花素无此作用。因此，初步推断高剂量刺芒柄花素具有雌激素样作用及对生殖系统具有一定的安全性。TC、LDLC、TG及HDLC与冠心病(CHD)的发病风险密切相关5，因此调节血脂是防治CHD的重要切入点。本研究证实，高剂量刺芒柄花素(100 mgkg-1d-1)能够有效降低高脂血症大鼠的TC、LDLC水平,对TG和HDLC则无明显影响。研究表明，植物雌激素能够与雌激素受体(ER)结合
11、，上调肝脏LDL受体的表达6，还可直接抑制胆固醇合成限速酶HMGCoA还原酶7，因此，推测刺芒柄花素对血脂的影响可能主要是通过这两方面来发挥作用的。植物雌激素对TG和HDLC水平的改善，目前各种实验的结果尚不一致，可能用药时间、与物种及同一物种的不同遗传因素有关。【参考文献】 1 Rossouw JE，Anderson GL，Prentice RL，et al.Risks and benefits of estrogen plus progestin in healthy postmenopausal women：principal results from the womens health
12、 initiative randomized controlled trialJ. JAMA,2002;288(3):32133.2 Hulley S，Grady D，Bush T,et al.Randomized trial of estrogen plus progestin for secondary of prevention coronary heart disease in postmenopausal women.Heart and Estrogen/progestin Replacement Study (HERS) Research GroupJ.JAMA,1998;280(
13、7):60513.3 Grady D，Herrington D，Bittner V,et al.Cardiovascular disease outcomes during 6.8 years of hormone therapy：Heart and Estrogen/progestin Replacement Study followup (HERS)J.JAMA，2002;288(1):4957.4 Chen HQ，Jin ZY，Tao GJ,et al.Determination of isoflavones in different parts of Trifolium pratens
14、e by high performance liquid chromatographyJ. Food Sci，2004;25：1503.5 李悦梅，陈慧芳，杨永宗.国际动脉粥样硬化学会预防动脉粥样硬化性心血管疾病临床指南(摘要)J.中国动脉硬化杂志，2003;11(5)：48492.6 Asakura L，Cazita PM，Harada LM，et al. Soy protein containing isoflavones favorably influences macrophage lipoprotein metabolism but not the development of at
15、herosclerosis in CETP transgenic miceJ.Lipids，2006;41(7):65562.7 Yi P，Driscoll MD，Huang J,et al.The effects of estrogenresponsive element and ligandinduced structural changes on the recruitment of cofactors and transcriptional responses by ER alpha and ER betaJ.Mol Endocr,2002;16(4):67493.8 / 8文档可自由编辑打印
刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究
