核桃多酚对酪氨酸酶活性和黑色素合成的影响及其化妆品的试制

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1、核桃多酚对酪氨酸酶活性和黑色素合成的影响及其化妆品的试制核桃富含多酚,有很好的抗紫外线、抗氧化、清除自由基等功效,核桃多酚提取物及部分单体能够通过影响酪氨酸酶活性来改变黑色素的合成量,而黑色素的合成与黄褐斑及白癜风的形成息息相关。研究核桃多酚提取物及其单体对酪氨酸酶活性和黑色素合成的影响及作用机理,寻求酪氨酸酶抑制剂,有利于开发更为安全高效的祛斑化妆品原料和白癜风治疗药物。本研究主要得到以下结论：1、核桃粕提取物的多酚含量为9.09%,核桃粕提取物对酪氨酸酶活性的IC50为16.2mg/mL,是酪氨酸酶的非竞争型抑制剂,抑制常数为3.97mg/mL。此外,核桃粕提取物具有较好的还原性和抗氧化性

2、,提取物对DPPHB由基、羟基自由基、超氧阴离子、ABTS皆由基的ICs0值分别为64.43Ng/mL、104.31Ng/mL、7.12仙g/mL、149.45仙g/mL2、核桃种皮提取物的多酚含量为42.3%,是酪氨酸酶的混合型抑制剂,且IC50、KIs和KI值分别为3.74mg/mL.4.67mg/mL、1.76mg/mL。荧光光谱研究表明核桃种皮提取物对酪氨酸酶具有荧光猝灭作用,同时提取物改变了发生荧光猝灭的氨基酸残基的疏水性环境，这与ANSB&氨酸酶荧光探针法的研究结果一致。此外,圆二色谱法显示核桃种皮提取物也会使酪氨酸酶的结构和构象发生轻微的改变。3、酶动力学研究表明核桃多酚单体红景

3、天苷对酪氨酸酶活性的抑制率可达33.04%,是酪氨酸酶的竞争型抑制剂,它作为酪氨酸酶的底物类似物与之反应,生成可使紫外-可见吸收峰增强的醌类物质。而且,红景天苷不与酪氨酸酶活性中心的铜离子发生螯合。分子对接结果表明红景天苷和酪氨酸酶之间的弱相互作用力主要为氢键和范德华力,由此可以推测酪氨酸酶抑制剂的抑制能力不仅与抑制剂与底物的相似性有关,也与抑制剂与酪氨酸酶活性中心铜离子的螯合程度有关。4、核桃多酚单体阿魏酸、咖啡酸和香草酸对小鼠B16黑色素瘤细胞的增殖有激活作用，阿魏酸和咖啡酸主要通过激活酪氨酸酶活性从而增加细胞中的黑色素含量,而香草酸对酪氨酸酶活性的激活作用较弱。桑色素和对羟基苯甲酸对小鼠

4、B16黑色素瘤细胞的增殖表现出抑制作用。桑色素对细胞中酪氨酸酶活性的影响非常显著，当桑色素浓度为400nM/L时，对黑色素瘤细胞中酪氨酸酶活性的抑制率达到45.87%,对黑色素瘤细胞中黑色素合成的抑制率达到33.47%,而对羟基苯甲酸对小鼠B16黑色素瘤细胞中酪氨酸酶活性的抑制作用与浓度无依赖性关系,但对羟基苯甲酸对黑色素合成的抑制率与其浓度呈正相关。核桃叶、核桃壳、核桃青皮提取物的多酚含量分别为10.26%、13.92%、9.93%。核桃提取物对细胞中黑色素合成均有一定抑制作用,核桃叶提取物对细胞增殖的影响最为明显，核桃壳提取物对小鼠B16黑色素瘤中黑色素合成的抑制作用较低但对细胞增殖的影响最弱。核桃种皮提取物对黑色素合成的抑制效果最为明显,且主要通过抑制酪氨酸酶活性以降低黑色素合成量。5、以核桃粕多酚提取物为主要有效成分试制了核桃多酚淡斑乳液,并进行了相应的效果评价实验。核桃多酚淡斑稀释乳液对酪氨酸酶活性的抑制率可达92.86%,对DPPHg由基的清除率也达到了88.46%,表明核桃多酚淡斑乳液具有较强的抑制黑色素生成和清除自由的作用,是一款安全有效的祛斑化妆品。