高考二轮复习全攻略 1614《生物技术实践》课件 新人教版

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1、专题整合六专题整合六 选修教材内容选修教材内容（6个常考点，不同省份按考纲要求选用）个常考点，不同省份按考纲要求选用）第十四讲第十四讲 生物技术实践（选修一）生物技术实践（选修一） 【考纲点击】 1微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。5.运用发酵加工食品的基本方法。6.测定食品加工中可能产生的有害物质。7.从生物材料中提取某些特定的成分。8.植物的组织培养。9.酶的存在和简单制作方法。10.酶活力测定的一般原理和方法。11.酶在食品制造和洗涤等方面的应用。12.制备和应用固定化酶。13.PCR

2、技术的基本操作和应用。14.蛋白质的提取和分离。 知识互联网点击进入点击进入word常考点常考点19 微生物的利用和生物技术在微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用食品加工中的应用 （5年年23考考 ） A不同种类细菌的生长均需要相同碳源 B常用液体培养基分离获得细菌单菌落 C细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期 D培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选 解析：细菌的碳源与其新陈代谢的类型有关，A错误；菌落的形成需要固体培养基，B错误；芽孢大量形成与衰亡期，C错误。金黄色葡萄球菌能耐高盐，D正确。 答案：D高考经典高考经典1(2012全国卷全国卷，5)关于细菌的叙述中

3、，正确的是关于细菌的叙述中，正确的是 ()。 2(2012江苏，21)(多选)下列关于制作果酒、果醋和腐乳的 叙述，合理的是 ()。 A在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长 B条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸 C果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小 D将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加 大用盐量 解析：果酒发酵的后期，营养物质减少，酵母菌代谢减慢，产生的CO2量减少，可以间隔较长的时间再拧开瓶盖；糖源充足时，醋酸菌可以将葡萄糖分解成醋酸；糖源不足时，则利用酒精与氧反应合成醋酸和水；由于发酵液的酒精比例越来越高，因而发酵液的密度逐渐减小，制腐乳时，在摆放豆腐的同时，应逐层加

4、盐，随层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。 答案：ABC A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上 解析：考查微生物的培养及应用，实验分析能力。将转基因植物叶片接种到无菌培养基上，是进行植物组织培养，必需严格的无菌操作，否则会失败。 答案：C3(2012北京卷北京卷，5)高中生物学实验中，在接种时不进行严高中生物学实验中，在接种时不进行严格格 无菌操作对实验结果影响最大的一项是无菌操作对实验结果影响最大的一项是 ()。4(2011课标全国卷，39)有些细菌可分解原油，从而

5、消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答问题。 (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于_培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和_。 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_。 (4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 解析：(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，使用的培养基应是以

6、原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这种营养成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生长。 (2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。 (3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。 (4)实验室培养微生物的过程中，常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌；用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌；用干热灭菌法对玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等进行灭菌。实验操作应在酒精灯火焰旁进行，因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境，可防止微生物的

7、污染。 答案：(1)原油选择 (2)平板划线法稀释涂布平板法 (3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰 本考点往往以发酵食品加工为背景考查微生物的分离、纯化和培养过程以及在食品加工中所起的作用，果酒、果醋和泡菜的制作方法和流程，植物有效成分的提取都是命题重点，不同省份对本考点的命题不一样，有的只出选择题，有的只出非选择题，有的题型不限！ 【押题1】 从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从_环境采集。 (2)富集培养指创设仅适合待

8、分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在_条件下培养。命题猜想命题猜想考查微生物的纯化培养和分离技术考查微生物的纯化培养和分离技术 (3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种方法是_，获得图B效果的接种方法是_。 (4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。 破题关键 解析(1)嗜盐菌就生活在高盐环境中，如：海滩等环境。(2)耐高温淀粉酶应存

9、在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内。(3)从不同菌落之间的关系可以看出，A纯化微生物的接种方法是稀释涂布平板法，B纯化微生物的接种方法是平板划线法。(4)培养基配制时应先溶化，再调整pH，灭菌。 答案(1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源高温 (3)稀释涂布平板法平板划线法 (4)pH调整高压蒸汽灭菌无菌 1微生物培养技术中的消毒和灭菌消毒消毒灭菌灭菌区区别别使用使用手段手段较为温和的物理或化学方法较为温和的物理或化学方法强烈的理化因素强烈的理化因素结果结果杀死表面或内部的部分微生物杀死表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子不包括芽孢和孢子)杀死包括芽孢和杀死包括芽孢和孢子

10、在内的所有孢子在内的所有微生物微生物常用常用方法方法煮沸消毒法、化学药剂消毒煮沸消毒法、化学药剂消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法等法等灼烧灭菌法、干灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压热灭菌法、高压蒸汽灭菌法等蒸汽灭菌法等联系联系都借助理化性质，营造微生物难以生存的不良都借助理化性质，营造微生物难以生存的不良环境；环境；作用实质都是通过使蛋白质变性来抑制作用实质都是通过使蛋白质变性来抑制微生物生命活动或杀死微生物微生物生命活动或杀死微生物 2.平板划线操作的注意事项 (1)每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。 (2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免 温度太高杀死菌种。

11、 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基 划破。 【押题2】 下图所示是果酒和果醋制作的实验流程以及某 同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下 列问题。考查果酒、果醋的制作工艺及注意事项考查果酒、果醋的制作工艺及注意事项 (1)完成图1中的制作流程。 (2)冲洗的主要目的是_，冲洗应特别注意不能_，以防止菌种的流失。 (3)图2装置中的充气口在_过程中要关闭，某同学在实验时为了密闭装置特意将瓶塞使劲塞紧，并将充气口和排气口用夹子夹紧，以便于发酵。但第二天观察时，发现瓶塞松了，他不明白其中的原因，请帮助解释说明其原因。_。 (4)在醋酸

12、发酵时，排气口排出的气体的来源是_。 (5)若在果汁中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时期，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。_。 解析本题主要考查了果酒、果醋制作的基本过程和原理。因酵母菌是兼性厌氧菌，在发酵初期需要氧气，进行大量繁殖，等酵母菌繁殖到一定数量时，关闭充气口，让其进行无氧呼吸；酵母菌无氧呼吸除产生酒精外，还产生CO2，所以瓶塞会松；醋酸菌是需氧型细菌，醋酸发酵过程中，充气口要连接充气泵不停地充气，排气口则不停地排气，排出的气体成分不仅有空气，还有醋酸菌有氧呼吸产生的CO2；酒精发酵与醋酸发酵的条件不同，酒精发酵时是无氧环境，而在无氧状态下，醋酸菌受到抑制。 答案(1)醋酸发

13、酵(2)洗去浮尘反复冲洗 (3)酒精发酵酵母菌进行无氧呼吸产生的二氧化碳使瓶中气体压强增大(答细胞呼吸或有氧呼吸产生二氧化碳不可) (4)剩余的空气、醋酸菌有氧呼吸产生的二氧化碳 (5)不能。因为酒精发酵时缺氧，会抑制醋酸菌的生长，醋酸菌的发酵条件是氧气充足 (1)从概念上判断：发酵是利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体及各种不同代谢产物的过程。无氧呼吸是生物在无氧条件下的一种细胞呼吸方式。 (2)从分类上判断：发酵据产物不同可分为：酒精发酵(无氧呼吸)、乳酸发酵(无氧呼吸)和抗生素发酵等；据对氧的需求不同可分为：厌氧发酵(无氧呼吸)和需氧发酵；据培养基的物理状态不同可分为：

14、固体发酵和液体发酵。判断发酵与无氧呼吸的方法判断发酵与无氧呼吸的方法 特别提醒果酒、果醋制作过程中防止杂菌污染的措施。 榨汁机和发酵瓶等都需清洗干净，且发酵瓶要进行消毒。清洗葡萄时要先清洗后除枝梗。发酵瓶排气管用曲颈管，不用直管。一、微生物的基本技术1制备培养基：计算称量溶化灭菌倒平板。2无菌技术：主要指消毒和灭菌。3倒平板操作：待培养基冷却至50 左右时，在酒精灯火焰旁倒平板。4平板划线操作：平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。考点探源考点探源5稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一

15、起的微生物将被分散到培养基的表面，从而在培养基表面形成单个菌落。如图： 特别提醒平板冷凝后，培养皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。二、某种微生物的分离与计数1分离选择培养基2计数 (1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。 筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。 计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。 过程：土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。 (2)分解纤维素的微生物的分离。 实验原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 流程：土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。

16、3鉴定方法鉴定分解尿鉴定分解尿素的细菌素的细菌含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基细菌细菌指示剂变红，则该菌能分解尿素指示剂变红，则该菌能分解尿素鉴定纤维素鉴定纤维素分解菌分解菌 特别提醒平板划线法适用于微生物的纯化，但不能用于微生物的计数。 稀释涂布平板法常用于活菌计数法，而显微镜直接计数法不能区分细菌的死活。用稀释涂布平板法进行计数时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300的平板进行计数。 土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。 三、微生物在传统发酵技术中的应用项目项目内容内容果酒和果醋的制作果

17、酒和果醋的制作腐乳制作腐乳制作制作泡菜并检测亚硝制作泡菜并检测亚硝酸盐含量酸盐含量菌种菌种及来及来源源酵母菌：葡萄皮上野生型酵母菌：葡萄皮上野生型酵母菌与醋酸菌、空气或酵母菌与醋酸菌、空气或人工接种人工接种毛霉、青霉、曲毛霉、青霉、曲霉、酵母菌等真霉、酵母菌等真菌，空气中的生菌，空气中的生殖孢子殖孢子乳酸菌、空气中的孢乳酸菌、空气中的孢子子原理原理无氧：无氧：酿酒酿酒C6H12O62CO22C2H5OH有氧：酿有氧：酿醋醋C2H5OHO2 CH3COOHH2O蛋白质蛋白质 小小分子肽氨基酸分子肽氨基酸脂肪脂肪 甘油甘油脂肪酸脂肪酸亚硝酸盐对氨基苯亚硝酸盐对氨基苯磺酸磺酸 重氮化合重氮化合物物N

18、1萘基乙二萘基乙二胺盐酸盐胺盐酸盐玫瑰红玫瑰红色染料色染料原料原料选择选择新鲜、无烂籽粒葡萄新鲜、无烂籽粒葡萄(或或苹果苹果)豆腐豆腐大白菜、花椰大白菜、花椰菜等新鲜干净菜等新鲜干净的蔬菜的蔬菜实验实验流程流程挑选葡萄挑选葡萄冲洗冲洗榨汁榨汁酒精酒精发酵发酵果酒果酒醋酸醋酸发酵发酵 果醋果醋豆腐上长出毛豆腐上长出毛霉霉加盐腌制加盐腌制加卤汤装瓶加卤汤装瓶密封腌制密封腌制制泡菜：选材制泡菜：选材配制盐水配制盐水装坛装坛发酵发酵成品成品测亚硝酸盐含测亚硝酸盐含量：配制溶液量：配制溶液制备标准显制备标准显色液色液制备样制备样品处理液品处理液比比色色操作操作注意注意事项事项(1)材料选择与处理材料选择

19、与处理(2)防止发酵液污染，控防止发酵液污染，控制好发酵条件制好发酵条件(1)材料用量材料用量(2)防止杂菌污防止杂菌污染染(3)控制温度及控制温度及酒精含量酒精含量(1)泡菜坛的选泡菜坛的选择择(2)腌制条件腌制条件(无无氧氧) (3)测定亚硝酸测定亚硝酸盐含量的操作盐含量的操作共同共同点点都是天然的发酵，利用了微生物新陈代谢过程中代谢产都是天然的发酵，利用了微生物新陈代谢过程中代谢产物的作用或直接获取代谢产物物的作用或直接获取代谢产物 四、植物有效成分的提取 1植物芳香油提取方法的比较提取提取方法方法水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法压榨法压榨法有机溶剂萃取法有机溶剂萃取法实验实验原理原理利用水蒸气

20、将利用水蒸气将挥发性较强的挥发性较强的植物芳香油提植物芳香油提取出来取出来通过机械加压，压通过机械加压，压榨出果皮中的植物榨出果皮中的植物芳香油芳香油使芳香油溶解在有使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶机溶剂中，蒸发溶剂获得植物芳香油剂获得植物芳香油方法方法步骤步骤(1)水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏(2)分离油层分离油层(3)除水过滤除水过滤(1)石灰水浸泡、漂石灰水浸泡、漂洗洗(2)压榨、过滤、压榨、过滤、静置静置(3)再次过滤再次过滤(1)粉碎、干燥粉碎、干燥(2)萃取、过滤萃取、过滤(3)浓浓缩缩适用适用范围范围适用于提取玫适用于提取玫瑰油、薄荷油瑰油、薄荷油等挥发性强的等挥发性强的芳香油芳香油适用

21、于柑橘、柠檬适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提等易焦糊原料的提取取适用范围广，要求适用范围广，要求原料的颗粒要尽可原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸能细小，能充分浸泡在有机溶剂中泡在有机溶剂中优点优点简单易行，便简单易行，便于分离于分离生产成本低，易保生产成本低，易保持原料原有的结构持原料原有的结构和功能和功能出油率高，易分离出油率高，易分离局限局限性性水中蒸馏会导水中蒸馏会导致原料焦糊和致原料焦糊和有效成分水解有效成分水解等问题等问题分离较为困难，出分离较为困难，出油率相对较低油率相对较低使用的有机溶剂处使用的有机溶剂处理不当会影响植物理不当会影响植物芳香油的质量芳香油的质量 2. 实验流程设计

22、 特别提醒(1)水蒸气蒸馏的三种常用方法比较 基本原理相同，但原料位置不同。 水中蒸馏：原料放于蒸馏容器的水中，水完全浸没原料。水上蒸馏：容器中水的上方有筛板，原料置于筛板上，水量以沸腾时不浸湿原料为宜。水气蒸馏：蒸馏容器下方有一排气孔，连接外源水蒸气，上方有筛板，上面放原料。 (2)提取植物有效成分时注意的事项 水蒸气蒸馏过程中可用明火加热，萃取过程应该避免明火加热，采取水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，直接用明火加热容易引起燃烧、爆炸。用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去杂质，否则会影响芳香油的质量。在用水蒸气蒸馏法制取玫瑰精油的过程中油水混合物中加入氯化钠的目的是增大盐水的密度，有利

23、于玫瑰精油与水的分层。加入无水Na2SO4的目的是吸收精油中残留的水分。橘皮精油的提取过程中，橘皮洗净晾干后，要浸泡在石灰水中10 h以上，其目的是防止橘皮压榨时滑脱，从而提高出油率。常考点常考点20 酶的应用和生物技术在酶的应用和生物技术在其他方面的应用其他方面的应用 （5年年18考考 ） A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D.用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少 解析：本题考查DNA提取和鉴定。DNA溶解度与洗涤剂无关，DNA与二苯胺水浴加热变蓝，不需要冷却；

24、用玻璃棒搅拌，使DNA吸附在玻璃棒上，且DNA量不会减少，所以答案为C。 答案：C高考经典高考经典1.（2012江苏江苏，18）下列关于）下列关于“DNA粗提取与鉴定实验粗提取与鉴定实验”的叙的叙 述，正确的是述，正确的是 （）。（）。 2.（2011广东理综，5）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不 正确的是 （）。 A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋 白移动慢 解析：猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少，是提

25、纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析，其中洗涤红细胞时，要用生理盐水反复洗涤，既要将红细胞洗涤干净，又要不破坏红细胞，然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，释放出血红蛋白。分离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质移动速度较快；血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况，并据此判断分离效果。故D不正确。 答案：D3.（2010江苏生物，25）（多选）图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，下列叙述正确的是 （）。 A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的

26、酵母菌混合制备混合液 B.图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接 触 D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中 解析：溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合，A项错误。海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中，以制备凝胶珠；凝胶珠用蒸馏水冲洗23次后，可转移到发酵装置中；搅拌可使酵母菌与培养液充分接触，有利于发酵的顺利进行，故B、C、D三个选项正确。 答案：BCD 高考命题常考知识点有： （1）酶活力测定的一般原理和方法；（2）酶在食品制造和洗涤等方面的应用；（3）植物的组织培养；（4）蛋白

27、质的提取和分离；（5）PCR技术的基本操作和应用。命题多以实验分析或应用实例分析的形式呈现。【押题1】 在日常洗涤中，普通洗衣粉已经逐渐被加酶洗衣粉所代替，加酶洗衣粉中的碱性蛋白酶、纤维素酶、脂肪酶、淀粉酶等可以将粘附在衣物上的奶渍、汗渍、血渍等快速、彻底地清除掉，因此非常受人们的欢迎。 （1）某班同学为探究某复合加酶洗衣粉的最佳洗涤温度，设计了一个探究实验，该实验的自变量应为。实验过程中，不同的小组选用了含不同污染物的衣物作为实验材料，最终结果汇总如下表：命题猜想命题猜想酶的研究与应用酶的研究与应用 不同温度下除去不同污渍所需的时间/min水温水温/51525354555657585植物油植

28、物油225110987849352246109牛奶牛奶220103704211344991100浆糊浆糊143996531216349714由上表可知，在洗涤含不同污染物的衣物时要由上表可知，在洗涤含不同污染物的衣物时要。（2）从生物体中提取出的酶首先要检测）从生物体中提取出的酶首先要检测，以便更好，以便更好 地将酶应用于实践。地将酶应用于实践。（3）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的，遇水后）加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用，请说明包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用，请说明这是否运用了酶的固定化技术及其理由。这是否运

29、用了酶的固定化技术及其理由。_ 解析（1）探究温度对酶活性的影响时，自变量应为温度。由表格可知，清除不同污染物时所需的最适温度不同，因此洗涤含不同污染物的衣物时应选用不同温度的水。（2）只有酶具有活性才能将酶应用于实践。（3）固定化酶需要把酶固定在一定载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离，可以反复利用，本题中未运用固定化酶技术。 答案（1）温度使用不同温度的水（2）酶的活性 （3）未运用酶的固定化技术，因为酶未固定在不溶于水的载体上，也不能重复利用1. 判断加酶洗衣粉洗涤效果的方法：可在洗涤后比较污物的残留状况，如已消失、颜色变浅、面积缩小等。2. 加酶洗衣粉的洗涤效果的探究方法：实验

30、设计遵循的原则是对照原则和单一变量原则，如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有何不同时，以控制洗衣粉的种类为变量，其他条件完全一致；同时，普通洗衣粉处理污物与加酶洗衣粉处理污物形成对照实验。生物信息题的解答技巧生物信息题的解答技巧3. 变量的分析和控制：影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量、衣物的材质、衣物大小、浸泡时间、洗涤的方式和洗涤的时间等。在选择适宜的变量作为探究课题的时候，应注意切合实际，如选择水温时，我们可以选择一年中冬季、春季、秋季和夏季的实际常温5 、15 、25 和35 进行实验。【押题2】 .某生物兴趣小组在学习完“蛋白质的提取和分离”后

31、，联系相关实验，准备从猪肝脏研磨液中初步提取过氧化氢酶，设计的“过氧化氢酶提取、分离流程”（如下图）。考查蛋白质的提取和分离及考查蛋白质的提取和分离及PCR技术技术 请据图回答下列有关问题。 （1）向肝细胞悬液中加入一定量的pH7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎肝细胞，破碎细胞的原理是_。 与使用蒸馏水相比，使用缓冲液的优点是 _。 （2）蛋白质粗分离阶段透析的目的是 _。 （3）电泳利用了待分离样品中各种分子的 等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。 （4）实验小组以3%过氧化氢溶液和获得的过氧化氢酶为材料进行温度对酶催化活性影响的探究，得到下图所示的结果，根据实验结果得出“过氧

32、化氢酶能耐受100 高温”的结论，请问这一结论是否可靠？为什么？ _。 .如图表示体外和体内的DNA复制过程。请据图分析回答问题。 （1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中用_。 （2）图1中的DNA聚合酶一般选用从水生耐热细菌Taq中分离的。 其功能是_。 （3）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在中才能进行。 （4）图2E过程中的碱基互补配对方式与图1C过程中的不同之处是。假设图1中的一个模板DNA分子中有 800个碱基对，其中含有腺嘌呤600个，若通过PCR技术共消耗周围环境中游离的胞嘧啶脱氧核苷酸6 200个，则该模板DNA在PCR扩增仪中已经复制了次。 （5

33、）下列各项过程中，遵循UA配对方式的有_。 DNA复制RNA复制转录翻译 逆转录 解析.（1）酶的活性受酸碱度、温度等条件的影响。使用缓冲溶液达到细胞因吸水而涨破的目的，又不会因溶液酸碱度不适宜而影响酶的活性。（2）透析是去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离。（3）电泳技术就是在电场的作用下，利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。（4）在该实验中温度应是实验变量，所以为了确保实验结果的可靠性，应该排除其他能导致过氧化氢分解的因素。 .PCR是一种体外快速扩增DNA的技术，其DNA复制的原理和体

34、内基本相同，不同的是PCR通过高温使DNA分子热变性而解旋，一般用耐高温的TaqDNA聚合酶催化脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键。PCR需要模拟体内pH等环境，故需在一定的缓冲溶液中进行。DNA复制、RNA复制、转录、翻译和逆转录均存在碱基互补配对，而遵循UA配对方式的只有RNA复制、翻译和逆转录。 答案.（1）渗透原理（当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破）可以保证酶溶液pH基本稳定，避免因pH变化影响过氧化氢酶活性 （2）除去小分子化合物（杂质） （3）带电性质、分子大小、形状 （4）不可靠，高温也能使过氧化氢分解 .（1）高温使DNA分子热变性 （2）TaqDNA聚合酶催化脱氧

35、核苷酸之间形成磷酸二酯键 （3）一定的缓冲溶液 （4）E过程中是UA，C过程中是TA5 （5）,（2）样品的预处理及粗分离 一、酶的研究及应用 1.酶活性（酶活力）测定的一般原理和方法 （1）酶活性（酶活力）的含义：酶的活性（酶活力）是指酶 催化一定化学反应的能力。 （2）酶活性（酶活力）测定的一般原理和方法：酶的活性（酶活力）通常以单位时间内底物的消耗量或者在单位时间内 产物的生成量来表示。考点探源考点探源 2. 酶在食品制造和洗涤等方面的应用 （1）纤维素酶与果胶酶组成组成作用作用纤维素纤维素酶酶C1酶酶CX酶酶葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶纤维素在纤维素在C1酶、酶、CX酶的酶的作用下分解成纤维二

36、作用下分解成纤维二糖，再在葡萄糖苷酶的糖，再在葡萄糖苷酶的作用下将纤维二糖分解作用下将纤维二糖分解为葡萄糖为葡萄糖果胶酶果胶酶多聚半乳糖醛、酸酶、多聚半乳糖醛、酸酶、果胶分解酶果胶酯酶果胶分解酶果胶酯酶都能将不溶性果胶分解都能将不溶性果胶分解成可溶性半乳糖醛酸成可溶性半乳糖醛酸 （2）加酶洗衣粉 概念：指含酶制剂的洗衣粉，目前常用的酶制剂有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶四类。 洗涤原理种类种类洗涤原理洗涤原理洗涤的物质种类洗涤的物质种类蛋白蛋白酶酶可将蛋白质水解为易溶解或分可将蛋白质水解为易溶解或分散于洗涤液中的小分子的肽或散于洗涤液中的小分子的肽或氨基酸氨基酸血渍、奶渍及各种食血渍、奶渍及

37、各种食品类的蛋白质污垢品类的蛋白质污垢脂肪脂肪酶酶把脂肪水解为较易溶解的甘油把脂肪水解为较易溶解的甘油和脂肪酸和脂肪酸食品的油渍、人体皮食品的油渍、人体皮脂、口红脂、口红淀粉淀粉酶酶能使淀粉分解为可溶性的麦芽能使淀粉分解为可溶性的麦芽糖、葡萄糖糖、葡萄糖来自面条等的污垢来自面条等的污垢纤维纤维素酶素酶使纤维的结构变得蓬松，从而使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，达垢能够与洗衣粉充分接触，达到更好的去污效果到更好的去污效果 3.制备和应用固定化酶、固定化细胞 （1）直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的差异直接使用酶直接使用酶固定化酶

38、固定化酶固定化细胞固定化细胞酶的种类酶的种类一种或几种一种或几种一种一种一系列酶一系列酶常用载体常用载体氧化铝、高岭氧化铝、高岭土、硅胶、二土、硅胶、二氧化钛、硅藻氧化钛、硅藻土等土等明胶、琼脂明胶、琼脂糖、海藻酸糖、海藻酸钠、醋酸纤维钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰素、聚丙烯酰胺等胺等常用方法常用方法包埋法、化学包埋法、化学结合法、物理结合法、物理吸附法吸附法包埋法包埋法营养物质营养物质不需要不需要不需要不需要需要需要化学反应化学反应一种或几种一种或几种一种一种一系列一系列底物底物各种物质各种物质各种物质各种物质能进入载体的能进入载体的小分子物质小分子物质优点优点效率高、耗能效率高、耗能低、无污染低

39、、无污染可回收反复使可回收反复使用用成本低、易操成本低、易操作，可催化一作，可催化一系列化学反应系列化学反应缺点缺点环境因素影响环境因素影响大，酶难以回大，酶难以回收利用收利用不利于催化一不利于催化一系列化学反应系列化学反应反应物与细胞反应物与细胞内的酶不容易内的酶不容易接触，催化效接触，催化效率下降率下降 特别提醒纤维素酶在洗涤剂中的应用可以说是一项重要的发明。它的作用对象不是衣物上的污垢，而是织物表面因多次洗涤而在主纤维上出现的微毛和小绒球，添加纤维素酶的洗衣粉具有增白、柔软两个独特功能。 二、DNA和蛋白质技术 1.DNA的粗提取和鉴定方法 （1）材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物

40、组织。 （2）破碎细胞 动物的红细胞，吸水破裂。 植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。 （3）除去杂质的方法 方法一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不 同，通过调节NaCl溶液的浓度除去溶于和不溶于NaCl溶液 中的杂质。 方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。 方法三：利用DNA对高温的耐受性，将滤液放在6075 的恒温水浴箱中保温1015 min，使蛋白质变性沉淀而DNA分子还未变性。 （4）DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2

41、3 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物。 （5）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。 2.血红蛋白的提取和分离 （1）凝胶色谱法的原理相对分子质量大相对分子质量大相对分子质量小相对分子质量小直径大小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动途径运动途径 从凝胶颗粒间隙向下移动从凝胶颗粒间隙向下移动从凝胶颗粒内部空隙向从凝胶颗粒内部空隙向下移动下移动运动路程运动路程较短较短较长较长移动速度移动速度较快较快较慢较慢洗脱次序洗脱次序先从凝胶柱洗脱出来先从凝胶柱洗脱出来后从凝胶柱洗脱出来后从凝胶柱

42、洗脱出来 （2）样品的预处理及粗分离 特别提醒影响DNA提取的因素 对生物材料研磨不充分或加入蒸馏水量不够，导致核物质没有充分释放出来。在破碎细胞或溶解DNA时搅拌太剧烈，使DNA分子断裂，不易提取。 实验中最好使用塑料器皿，因为DNA易吸附在玻璃器皿上，容易造成损失。 3.PCR反应的原理、过程及结果 （1）PCR原理 在一定的缓冲溶液中通过控制温度并提供模板和原料，使 DNA复制在体外反复进行。 （2）PCR反应过程 变性：当温度上升到90 以上时，双链DNA解聚为单 链，如图所示： 复性：当温度下降到50 左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，如图所示： 延伸：当温度上升到72 左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，如图所示： （3）结果 PCR一般要经历三十多次循环，每次循环都要包括变性、复性、延伸三步。 两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。