抗癌解毒方抗肿瘤作用的实验研究

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1、抗癌解毒方抗肿瘤作用的实验研究 作者:何燕清,郑作文,陆桂喜【关键词】 抗癌解毒方摘要: 目的: 评价抗癌解毒方的抗肿瘤作用、对免疫功能的影响作用。 方法: 用昆明种小鼠,灌胃给药,环磷酰胺造模,60 Co照射,肝癌H22 瘤株模型,脾淋巴细胞增殖测定,血清溶血素测定,碳廓清实验,迟发超敏试验等方法观察相关指标。 结果: 抗癌解毒方能明显延长60 Co照射小鼠的生存时间;可明显抑制H22 小鼠瘤体的生长,对H22 小鼠的生存时间有一定延长作用;与环磷酰胺合用对H22 小鼠瘤体有一定协同抑制作用;对环磷酰胺引起的H22 小鼠溶血素的降低有明显提高作用,但对环磷酰胺引起的H22 小鼠碳廓清率的降低

2、拮抗作用不明显;对H22 小鼠迟发超敏反应作用不明显;对小鼠脾淋巴细胞有明显的增殖作用。 结论: 抗癌解毒方有抗肿瘤、促进免疫的作用。 关键词: 抗癌解毒方; 抗肿瘤; 免疫“抗癌解毒方”(以下简称KAF),为广西柳州市肿瘤医院所研制,临床对放疗、化疗癌症患者有明显提高白细胞及一定抗肿瘤作用。该方主要由生晒参、黄芪、茯苓、当归、枸杞、白花蛇舌草等中药组成。为此我们对该方进行了抗肿瘤、促进免疫的药理实验,现将结果报告如下。 1 实验材料 1.1 药物制备 KAF方中,生晒参第1次用8倍量95%乙醇回流2h,第2次用6倍量95%乙醇回流1h,回收乙醇,浓缩备用;醇提后的生晒参及处方中黄芪、茯苓、当

3、归、枸杞、白花蛇舌草等药物第1次用10倍水提取2h,第2次用8倍水提取1h,两次药液合并浓缩,浓缩液与生晒参乙醇浓缩液合并混匀,浓缩至药物浓度为2g生药/ml备用。 1.2 试剂 参芪片(由11味中药组成),吉林恒和制药股份有限公司生产,批号:20020303;氟尿嘧啶(5-FU)注射液,上海旭东海普药业有限公司生产(上海市浦东金桥金沪路879号),批号:010807;环磷酰胺(CPA),上海华联制药有限公司生产,批号:010914;盐酸左旋咪唑,吉林南药股份有限公司,批号:020301;刀豆蛋白(ConA),Sigma公司,批号:030808;2,4-二硝基氯苯(DNCB),上海试剂仪器厂,

4、批号:982021。 1.3 动物 昆明种小鼠,普通级(CV),由广西中医学院实验动物中心提供,动物合格证号:桂医动字第11004号。 1.4 仪器 722型分光光度计,上海第三分析仪器厂制造;遥控酶标仪,型号:SUNRISE,奥地利生产;CO60 765型远距离治疗机,加拿大生产; 2 方法及结果 2.1 对60 Co射线照射小鼠生存时间的影响1 取小鼠50只,体重(20±2)g,兼用,随机分为5组。ig给药,给药容积为30ml/kg。1次/d连续14d。空白对照组、照射对照组给生理盐水。给药后第8天 60 Co射线7.5Gy1次性全身照射,照射时间6min52s。观察小鼠的存活天

5、数(从照射至死亡日期),结果见表1。 表1 KAF对60 Co射线照射小鼠生存时间的影响 (略)结果显示,KAF高剂量组小鼠存活时间比照射对照组长,差异有显著性意义,提示KAF可明显延长60 CO射线照射小鼠的生存时间。 2.2 对H22 瘤株小鼠生存时间的影响2 取小鼠55只,体重(20±2)g,兼用,随机分为5组。ig给药,给药容积为30ml/kg,1次/d连续14d,空白对照组给生理盐水。给药后第8d无菌条件下取H22 瘤液,以生理盐水15稀释,各组小鼠均腹腔接种H22 瘤细胞悬液0.2ml/只,观察小鼠存活天数,结果见表2。 表2 KAF对H22 瘤株小鼠生存时间的影响 (略

6、) 结果显示,KAF高、中剂量组对H22 瘤株小鼠生存时间较对照组长,但差异无显著性意义,提示KAF对H22 瘤株小鼠生存时间有一定延长作用。 2.3 对荷瘤H22 小鼠瘤体生长的影响2 取体重1722g小鼠52只,兼用,无菌条件下取H22 瘤液,以生理盐水15稀释,每只小鼠腋窝皮下注射0.2ml,将接种小鼠随机分为5组。于接种瘤株24h后开始ig给药,给药容积为30ml/kg,1次/d连续10d,空白对照组给生理盐水。第11d脱颈椎处死动物,取瘤块称重,计算肿瘤及肝脾抑制率,结果见表3。 结果显示,KAF高剂量组瘤重及瘤重系数小于对照组,中剂量组瘤重系数小于对照组,差异有显著性意义,提示KA

7、F对H22 小鼠肿瘤生长有明显抑制作用。 表3 KAF对H22 小鼠瘤重的影响 (略) 2.4 KAF和CPA合用对荷瘤H22 小鼠瘤体生长的影响2 取体重2022g小鼠50只,兼用,随机分为5组。ig给药,1次/d连续给药14d,给药容积为30ml/kg,空白对照组给生理盐水。从第6d开始KAF高、中、低剂量组及CPA组隔日腹腔注射1次CPA。第6d给药后1h接种瘤株,第15天脱颈椎处死动物,取瘤块称重,计算肿瘤的抑制率重复2次实验,结果见表4。 表4 KAF对H22 小鼠瘤重的影响 (略)结果显示,KAF高、中、低剂量+CPA组瘤重及瘤重系数均明显小于对照组,提示KAF与CPA合用均有明显

8、的抑制肿瘤作用;KAF高、中剂量+CPA组瘤重及瘤重系数均比CPA组较小,但无显著性差异,提示KAF与CPA合用有一定的协同作用。 2.5 对H22 瘤株小鼠血清溶血素的影响3,4 取体重(20±2)g小鼠60只,兼用,在无菌条件下抽取小鼠H22 瘤液,按16稀释,每只小鼠均腹腔注射0.2ml。接种后随机分为4组。从第6天开始KAF高、低剂量组及CPA组隔日腹腔注射1次CPA,第8天腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液0.2ml/只致敏。结果见表5 表5 KAF对血清溶血素水平的影响 (略) 结果显示,KAF高、低剂量+CPA组溶血素含量比CPA组高,差异有显著性意义,提示KAF对CP

9、A引起的H22 小鼠血清溶血素的降低有明显升高作用。 2.6 对H22 瘤株小鼠碳廓清率的影响3 取体重(20±2)g小鼠60只,兼用,腹腔接种H22 瘤株(方法同5),随机分为5组。灌胃1次/d,给药容积为30ml/kg,连续给药14d,空白对照组灌胃生理盐水。从第6天开始KAF高、中、低剂量组及CPA组隔日腹腔注射1次CPA20mg/kg。结果见表6。表6 KAF对H22 小鼠碳廓清率的影响 (略)结果显示,KAF高、中、低剂量+CPA组吞噬指数和吞噬系数与CPA组比较差异无显著性意义,提示KAF对CPA引起的H22 小鼠碳廓清率的降低无明显提高作用。 2.7 对H22 瘤株小鼠

10、迟发超敏反应的影响5 取小鼠60只,体重(20±2)g,雌雄兼用。随机分为5组。于第4天无菌条件下抽取H22 瘤液,以生理盐水16稀释,每鼠腋下皮下注射0.2ml/只。结果见表7。 表7 KAF对H22 小鼠迟发超敏反应的影响 (略)结果显示,KAF高、中、低剂量组与空白组比较差异无显著性意义,提示KAF对H22 小鼠迟发超敏反应作用不明显。 2.8 对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响6 取小鼠25只,体重(20±2)g,兼用,随机均分为5组。ig给药,给药容积为30ml/kg,除左旋咪唑组隔天给药外,其余各组每天给药一次,连续10d,空白对照组给生理盐水。结果见表8。表8 KAF

11、对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 (略) 结果显示,KAF高剂量组OD值高于对照组,差异有显著性意义,提示KAF对小鼠脾淋巴细胞有明显增殖作用。 3 小结 KAF能明显延长 60 Co照射小鼠的生存时间;可明显抑制H22 小鼠瘤体的生长,对H22 小鼠的生存时间有一定延长作用;与环磷酰胺合用对H22 小鼠瘤体有一定协同抑制作用;对环磷酰胺引起的H22 小鼠溶血素的降低有明显提高作用,但对环磷酰胺引起的H22 小鼠碳廓清率的降低拮抗作用不明显;对H22 小鼠迟发超敏作用不明显;对小鼠脾淋巴细胞KAF有明显的增殖作用。综上所述,KAF有抗肿瘤、促进免疫的作用。 参考文献: 1 陈建业,曾益新,陈小君,等

12、.护生宝口服液对辐射的防护研究J.中华放射医学与防护杂志,2000,20(4):273-273. 2 严茂祥,陈芸芸,项百康,等.金针菇多糖对小鼠移植性肿瘤抗瘤效应的实验研究J.中国中医药科枝,1999,6(6):379-379. 3 李伟芳,韦宝伟,刘宗河,等.金蒲抑瘤片的药效和毒理研究J.广西医科大学学报,2002,19(3):307-307. 4 古建立,李东升,郭成贤,等.化岩胶囊对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响J.新中医,2002,34(12):63-63. 5 陈华圣,许爱华,顾 维,等.扶正抗癌冲剂增强免疫功能的实验研究J.南京中医药大学学报,1995,11(2):76-76. 6 邵启祥,徐芬红,夏 圣,等.黄芪对免疫功能的调节作用J.镇江医学院学报,1994,4(4):261-261.9 / 9文档可自由编辑打印

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