人教版教学件微生物的实验室培养 课件 1
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1、课题课题1 微生物的实验室培养微生物的实验室培养一、课题目标:了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。二、课题重点和难点:无菌技术的操作。三、技能目标:掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术,熟练、规范地进行无菌操作,成功地培养微生物。一、自学导引:一、自学导引:阅读课本P14P20,完成优化设计P16的自学导引。1、关于培养基:(1)按物理状态来分:培养基可分为 和 。其中固体培养基用于菌种分离、鉴定菌落等。(2)按功能来分,可分为选择培养基和鉴别培养基。(3)按成分来分,可分为天然培养基和合成培养基。不管哪种培养基,一般都含有 、 、 和 。二、基
2、础知识:二、基础知识:1、比较各种培养基配方(见附录3),熟悉马铃薯琼脂培养基的配制和操作过程。2、关于无菌技术:(1)获得纯净培养物的关键是 。(2)如何避免杂菌污染?(3)消毒和灭菌的区别:(4)实验室常用的消毒和灭菌方法(见附录4)三、实验操作三、实验操作本实验用马铃薯琼脂培养基进行草坪病原菌的纯化培养,可分成制备培养基和纯化病原菌两个阶段进行。1、制备马铃薯琼脂培养基(1)计算 根据马铃薯琼脂培养基配方的比例,计算配制50ml的培养基,各种成分的用量。(2)称量 准确称取各种成分。(3)溶化 将10g去皮马铃薯切成薄片,加水50ml,加热到沸腾,20min后,用纱布过滤。往滤液中加入1
3、g葡萄糖、1g琼脂,用蒸馏水定容至50ml。用清水清洗三角锥瓶,并准备好棉花塞、牛皮纸。(4)灭菌 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸,再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa、温度为121,灭菌1530min。将培养基用旧报纸包裹,放入干热灭菌箱内,在160170 下灭菌2h。(5)倒平板 待培养基冷却到50 左右时,在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作见课本)2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。2、纯化草坪病原微生物(1)把有斑点的草坪样本若干条剪到培养皿中,加入酒精消毒,用清水清洗后,浸泡待用。(2)用镊子把样品夹到培养基上,每个培养基放五片青草。注意无菌操作,整个操作过程都应在酒精灯附近进行,镊子在接种前和接种后都应灼烧,防止杂菌感染,接种后培养基依旧倒置。注意以上所有操作都不能讲话,防止唾液中微生物污染平板。(3)7d后平板应出现几种不同的微生物,这时可挑选一种进行纯化。(4)培养基的制取同上。用镊子夹取少量菌丝,快速接种到平板上,操作同课本P18。(5)操作后要用肥皂洗手,切勿在实验室吃喝东西或过位,或讲话,都会带来各种杂菌影响实验效果。
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