电泳技术及临床应用

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1、*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室n总蛋白异常升高或异常下降nA/G比例变化n血液沉降速度发生异常变化n出现恶性疾病征兆n在免疫球蛋白定量检测中发现 某一种免疫球蛋白出现大量异常增加*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室n含量的变化含量的变化 : 条带中蛋白含量增或减n 基于蛋白含量的变化, 有助于我们对以下疾病的筛查 :炎症 、营养不良、肺气肿等n性质的变化性质的变化 :异常条带的出现n对异常条带的筛查

2、,有助于我们检测下列疾病:骨髓瘤、巨球蛋白血症、细菌和病毒感染等n*在这些情况下, 必须要做其他辅助测试, 比如说免疫固定, 使用不同类型的抗血清对异常蛋白进行检测. (对于后期治疗有很重要的指导意义)*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室n白蛋白（Alb）由肝实质细胞合成，分子量6.64万，等电点45.8，半寿期（1519天，占血浆总蛋白的40%60。血浆白蛋白浓度可以受饮食中蛋白质摄入的影响，在一定程度上可以作为个体营养状态的评价指标，有较广泛的载体功能。正常参考值：3550g/L。n血浆白蛋白增高较少见，在严重失水时，对监测血浓缩有诊断意义。*市中心医院

3、检验科生化室n1-抗胰蛋白酶（AAT）是具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白，分子量为5.5万，等电点4.8，半寿期4天，电泳中位与1区带，是这一区带的主要组分。低血浆AAT可以发现于胎儿呼吸窘迫综合症，AAT先天缺陷易导致肺气肿和肝硬化。n1-酸性糖蛋白（AAG）早期称之为乳清类粘蛋白，分子量4万，等电点2.73.5，半寿期5天，电泳位于1区带。AAG是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增高，在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死患者亦常增高，在营养不良、严重肝损害等情况下降低。n1-脂蛋白 分子量20万。在严重肝病如肝硬化时明显降低，妊娠及高雌激素血症时可轻度增加。n甲胎蛋白（AFP）主要在胎

4、儿肝脏中合成，分子量6.9万，电泳位于1区带。在成人AFP可以在大约80%的肝癌患者血清中升高，在生殖细胞肿瘤出现AFP阳性率为50%，在其他肠胃管肿瘤如胰腺癌或肺癌及肝硬化等患者亦可出现不同程度的升高。*市中心医院检验科生化室n此区显色的条带主要是： 1-抗胰蛋白酶n在一些肺病是情况下，1-抗胰蛋白酶下降，有的时候缺如n在某些严重创伤后，此区可出现明显高峰，同时1-抗胰蛋白酶也增高n注意： 1. 1-抗胰蛋白酶偶尔出现双峰，它预示着既有单克隆抗体成分又有1-抗胰蛋白酶的改变。 2.一些罕见的病例中，此区带会出现另一个较宽的峰，它其实可能有甲胎蛋白的出现*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验

5、科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室白蛋白球蛋白区球蛋白区*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室主要特征： Alb均有不同程度的降低，1、2和球蛋白正常或降低，-G明显增高且宽度增加，可见-桥。*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验

6、科生化室n免疫固定电泳技术（ IFE ）是一种包括琼脂凝胶蛋白电泳和免疫沉淀两个过程的操作。n检测标本可以是血清、尿液、脑脊液或其它体液。nIFE 在临床实验室的最早应用是单克隆抗体的确定nAlfonso 在 1964 年第一个报道了免疫固定技术（ IFE ）。n 1969 年 Alper 和 Johnson 相继报道了 IFE 在铜蓝蛋白、 IgG 基因的多态性检测和 C3 激活后分子转变中的应用，随后他们又发表了 IFE 在补体组份基因多态性和抗胰蛋白酶表现型鉴别中的研究。n 1976 年免疫固定技术（ IFE ）被确定为抗体的检测方法。 *市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*

7、市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室疑似疑似MM IGG L型型正常的免疫固定电泳正常的免疫固定电泳*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室IGG L型型IGA L型型 偏向于偏向于2区区*市中心医院检验科生化室IGM K型型IGG K L型型*市中心医院检验科生化室IGM型，怀疑巨球蛋白血症型，怀疑巨球蛋白血症出现单一的出现单一的L条带条带*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化

8、室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室尿蛋白电泳尿蛋白电泳-本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳- -原理原理*市中心医院检验科生化室尿蛋白电泳尿蛋白电泳-本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳- -原则原则n当血液中检查到当血液中检查到M蛋白时：蛋白时：n进行进行24H尿蛋白检测尿蛋白检测n电泳电泳+免疫固定或是本周蛋白电泳免疫固定或是本周蛋白电泳n对异常峰进行鉴定对异常峰进行鉴定n对患者进行随访，目的是确认药后疗效和对患者进行随访，目的是确认药后疗效和肾脏损伤程度肾脏损伤程度*

9、市中心医院检验科生化室尿蛋白电泳尿蛋白电泳-本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳*市中心医院检验科生化室尿蛋白电泳尿蛋白电泳-本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳*市中心医院检验科生化室尿蛋白电泳尿蛋白电泳-本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳- -注意注意*市中心医院检验科生化室Sebia公司建议如上测定公司建议如上测定尿蛋白电泳尿蛋白电泳-本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳- -注意注意*市中心医院检验科生化室尿蛋白电泳尿蛋白电泳-本周氏蛋白电泳本周氏蛋白电泳- -注意注意*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市

10、中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室分型：IGG、IGA、IGM、IGD、IGE、轻链型、双克隆型和不分泌型等八型，根据轻链由分为k、L型。IgG型居多（约50），其次为IgA型（约25），IgD型较少（约1），IgE型罕见 *市中心医院检验科生化室提示：我们看的不是诊断，而是我们的指标那个对分期分型更有价值提示：我们看的不是诊断，而是我们的指标那个对分期分型更有价值*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中

11、心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室巨球蛋白血症巨球蛋白血症与多发性骨髓瘤有所不同，骨骼损害不常见，疾病发展类似淋巴瘤。本病好发于老年人，80%患者在50岁以上，40岁以下少见，男性少见。本病发展缓慢，临床表现与免疫细胞增殖的程度、血清中巨球蛋白浓度的高低密切相关。可多年无症状，也可表现为乏力，贫血，出血，体重减轻，感染，淋巴结、肝脾肿大，高粘滞度综合症及雷诺现象等。神经系统症状很多，应和神经系统疾病鉴别。*市中心医院检验科生化室n占患者的20%。此型瘤细胞生长较快，倍增时间为3.4月。溶骨病变明显，极易出现高钙症和肾功能衰竭，易误诊为慢性肾炎。淀粉样变的发病率高，症状较为严重，生存期比

12、其它类型短。轻链型骨髓瘤诊断标准为1.溶骨病变2.骨髓中浆细胞比值大于10%。 3.轻链在血清蛋白电泳中常出现在区而不易发现，致使电泳正常或没有M蛋白.尿中凝溶蛋白排出率高达300mg/24h以上。*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室n并不是说免疫电泳只要出现单克隆带就可诊断多并不是说免疫电泳只要出现单克隆带就可诊断多发性骨髓瘤，需与其它的恶性浆细胞病相鉴别：发性骨髓瘤，需与其它的恶性浆细胞病相鉴别：n巨球蛋白血症巨球蛋白血症 虽然血中有大量单克隆虽然血中有大量单克隆IgM，但，但 骨髓中淋巴样浆细胞增多而非骨髓瘤细胞增多，骨髓中淋巴样浆细胞增多而非骨髓瘤细胞增多，且少有溶骨性损害或肾功不全。且少有溶骨性损害或肾功不全。n重链病重链病 血清中仅出现单克隆重链，轻链缺乏，无血清中仅出现单克隆重链，轻链缺乏，无本周氏蛋白尿，多无骨胳破坏。本周氏蛋白尿，多无骨胳破坏。n原发性淀粉样变性原发性淀粉样变性 可有血清可有血清M蛋白和本周氏蛋白蛋白和本周氏蛋白尿，但骨髓中无骨髓瘤细胞，也不出现溶骨损害。尿，但骨髓中无骨髓瘤细胞，也不出现溶骨损害。 *市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室*市中心医院检验科生化室