微生物基础技术 教案

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1、微生物基础技术微生物基础技术教教 案案祖炬雄湖南省医药学校湖南省医药学校 微生物学教案2说明说明一、课程性质微生物学是药学专业重要的基础学科,通过学习微生物的形态结构、生理特征、致病性等内容,对学生学习药学专业知识,形成综合职业能力,以及继续学习和发展,具有重要作用。二、教学目标在教学过程中,要帮助学生激发学习兴趣,开拓视野,发展智力,发展个性和特长,培养学生热爱微生物学的精神。三、教学任务微生物的生物学特性,微生物学在药学中的地位和重要性,微生物与制药工艺、药理学有关的基本理论、基本知识、基本技能。四、注意的问题、在教学中必须惯彻注重基础,强化能力,突出重点,学以致用的原则,使学生在掌握必要

2、的知识和技能的基础上,提高水平。、积极进行教学改革,注意学生的态度、兴趣、意识等智力因素的培养,尊重学生在学习过程中的主体地位,充分发挥他们学习的主动性和创造性。、密切联系社会生活,充分利用各种自然资源,引导学生学会观察、分析、处理问题,拓展视野,重视积累,提高认识客观的能力,在生活实践中学习微生物学。、充分运用现代教育技术,提高教学质量和效率。 湖南省医药学校 微生物学教案3第一章 绪论第一节 概述一、概念 微生物是自然界一切肉眼不能直接看见的微小生物的总称。必须借助显微镜或电子显微镜放大几百、甚至几万倍才能看到。二、特点(一) 个体微小,结构简单主要以单细胞、简单多细胞或细胞群体的形式存在

3、。(二) 种类多、分布广微生物的种类1. 非细胞型微生物-病毒个体极微小,不具细胞结构2. 原核细胞型微生物仅有原始的核,缺乏细胞器,如细菌、放线菌、支原体、衣原体、螺旋体、立克次体。3真核细胞型微生物细胞核分化为核膜与核仁,具完整的细胞器,如真菌。(三) 代谢旺盛(四) 繁殖快、变异快三、微生物学微生物学是生物学的一个分枝,是研究微生物及其生命活动规律的科学。其研究内容主要涉及微生物的形态结构、生理生化、生长繁殖、遗传变异等内容。四、微生物学与药学专业(一)利用微生物生产药品。(一)利用微生物生产药品。 微生物对人类的生产生活起着十分重要的作用,在医药工业方面,微生物可用来生产抗生素、维生素

4、、酶制剂、氨基酸、疫苗等,许多微生物本身就是很好的药材,如灵芝、猴头、马勃等。 指导医疗用药。 湖南省医药学校 微生物学教案4(二)指导药物生产。指导药物生产。 药物生产过程中要防止微生物污染,生产中要检查药物的微生物学指标。(三)指导用药(三)指导用药 一些传染病是由病原微生物引起,了解微生物的结构、生理特征等,可以指导我们使用抗菌药物。指导我们使用抗菌药物。五、如何学好微生物学第二节第二节 微生物学发展简史微生物学发展简史人类对动植物的认识,可以追溯到人类的出现,可是,对微生物却长期缺乏认识。原因是:1. 个体微小,难以发现或认识它们。2. 杂居混生,很多人对眼前的微生物往往表现出“视而不

5、见,嗅而不闻,触而不觉,食而不察,得其益而不感其好,受其害而不知其恶”的愚昧状态。 、(一)形态学时期 1676 年荷兰人列文虎克用自制的显微镜观察了牙垢、污水及腐败的有机物,看到了“微动体” ,并记载了它们的基本形态。(二)生理学时期1. 19 世纪 60 年代,法国学者巴斯德的贡献:a.否定“自然发生说”1961 年“鹅颈瓶”试验。 b.创立了巴氏消毒法c.证明病原微生物可导致传染病湖南省医药学校 微生物学教案5如鸡霍乱、牛炭疽、狂犬病。2.同一时期德国、郭霍的主要贡献:a.发明了固体培养基b.细菌染色技术3. 1892 年俄国、伊万诺夫斯基首次发现烟草花叶病毒。4. 英国,琴纳创立了用牛

6、痘预防天花的方法。5. 1929 年,英国学者弗来明发现了青霉素,1940 年,沸洛里和柴恩首次提纯并用于临床。(二) 生物工程时期1. 1944 年美国,艾米里用实验证明 DNA 是生物体的遗传物质。2. 1975 年单克隆抗体研制成功。 第三节第三节 我国药用微生物学的概况和展望我国药用微生物学的概况和展望(一)古人利用微生物 如酿酒、制酱、制醋、茯苓、猪苓、冬虫夏草,用人痘预防天花等。(二)现代微生物研究1. 1956 年分离出沙眼衣原体。2. 1957 年发现亚洲甲型流感病毒,分离出麻疹病毒并制成疫苗。3. 1949 年上海建立了青霉素实验所,开始试制研究,1953 年 5 月1 日,

7、上海第三制药厂正式建厂并开始生产抗生素。4. 1958 年 6 月 3 日,我国最大的抗生素生产企业华北制药厂建成投产,能生产多种抗生素。5. 1961 年试制出半合成青霉素。6. 新发现一些国外没有的抗生素,如创新霉素,球红霉素、金褐霉素等。(全世界已达 1 万种左右)湖南省医药学校 微生物学教案6第二章细 菌细菌是一类具有坚韧细胞壁的单细胞原核细胞型微生物。细菌是一类具有坚韧细胞壁的单细胞原核细胞型微生物。在我们周围,到处都有大量的细菌存在。凡在温暖潮湿和富含有机物质的地方,都有大量的细菌在活动,在它们大量集居处,常会散发出特殊的臭气和酸败气,如用手去抚摸长有细菌的物体表面时,就有粘、滑的

8、感觉,在固体衣物表面,如果长出水珠状、浆糊状、颜色多样的细菌菌苔时,用小棒去试挑一下,常会拉出丝状物来,长有大量细菌的液体,会呈现混浊、沉淀或飘浮一片片小“白花” ,并伴有大量气泡冒出。当人类还未研究和认识细菌时,细菌中的少数病原菌曾猖獗一时,夺走无数生命,不少细菌也常常引起衣物和工农业产品腐烂变质。因此,细菌给人的最初印象常常是有害的,甚至是可怕的。实际上,随着微生物学的发展,当人们对它们的生命活动规律认识越来越清楚后,情况就有了根本的改变。目前,由细菌引起了传染病基本上得到了控制,与此同时,还发掘和利用了大量的有益细菌到工、农、医、环保等生产实践中,给人类带来极其巨大的经济效益和社会效益。

9、例如,在发酵工业上各种氨基酸、核苷酸、酶制剂、乙醇、丙酮、丁醇、有机酸、抗生素等的发酵生产 ,农业上如杀虫菌剂、细菌肥料的生产和在沼气发酵饲料青贮等方面 的应用,医药上如各种菌苗、类毒素、许多医用酶类的生产等,以及细菌在环保、国防上的应用等,都是利用有益细菌活动的例子。本章主要介绍细菌的形态、结构、生理特征与致病性等基础知识。第一节第一节细菌的形态与大小细菌的形态与大小一、细菌的形态与大小一、细菌的形态与大小(一)球菌球菌 呈球形 ,类球形 ,直径 0.81.2um,按其排列方式可分为: 双球菌 如脑膜炎球菌 四联球菌 如四联微球菌 八叠球菌 如藤黄八叠球菌 链球菌 如溶血性链球菌湖南省医药学

10、校 微生物学教案7 葡萄球菌 如金黄色葡萄球菌 (二)杆菌杆菌 呈杆状或圆筒状 长 1-5um 宽 0.5-1.0um球杆菌 :如布氏杆菌棒状杆菌:如白喉杆菌按其排列方式可分为:链杆菌:如枯草杆菌分支杆菌:如结核杆菌(三)螺形菌螺形菌 菌体弯曲1 孤菌 只一个弯曲 , 长 15um,宽 0.3-0.5um,2 螺菌 多个弯曲 , 长 1-50um,宽 0.3-1um,一个典型细菌的大小可用大肠埃希氏菌作代表,它的细胞平均长度约2m ,宽度约 0.5m 。形象地说,若把 1500 个细胞的长径相连,仅等于一颗芝麻的长度( 3mm) ;若把 120 个细胞横向紧挨在一起,其总宽度才抵得上一根人发的

11、粗细 (60m )。关于它的重量,则更是微乎其微,若以每个细胞湿重约 10-12g 计,则大约 109个大肠埃希氏菌细胞才达 1mg 重。二、细菌的形态检查法二、细菌的形态检查法细菌的物理形状 1.光学特性:细菌为半透明体。 2.表 面 积:细菌菌体微小,相对表面积大,有利于同外界进行物质交换。 由于细菌的细胞极其微小又十分透明,因此,用水装片或悬滴法观察法在光学显微镜下进行观察时,只能看到其大体形态和运动情况,若要观察其形态和主要构造,一般要对它们进行染色。染色法的种类很多。如:简单染色法 p191荚膜染色法、鞭毛染色法抗酸染色法革兰染色法 p194 在上述各种染色法中,以革兰染色法最为重要

12、,该染色法由丹麦医生 C,Gram 湖南省医药学校 微生物学教案81884 年创立,故名。( (一一) )方法方法涂片干燥固定结晶紫初染 1水洗碘液媒染 1水洗酒精脱色 30沙黄复染 1水洗镜检注意:关键步骤:酒精脱色(二)结果结果紫色 G+红色 G 甲菌乙菌(三)意义1. 鉴别细菌。鉴别细菌。 通过革兰染色可将细菌分为 G+菌和革兰阴性菌两大类,有助于鉴别细菌的种类。2. 指导临床用药。指导临床用药。 G+菌与 G-菌对抗生素的敏感性不同,大多数 G+菌对青霉素、红霉素、庆大霉素等抗生素敏感,G-菌对链霉素、氯霉素、卡那霉素敏感,所以对临床治疗用药的选择也有帮助。3. 与致病性有关。与致病性

13、有关。 G+菌多以外毒素致病,G-菌多以内毒素致病,两者的致病性不同,临床症状不同。湖南省医药学校 微生物学教案9第二节第二节细菌的结构细菌的结构 一个细胞就是一个个体,分为基本结构与特殊结构 一、基本结构一、基本结构所有的细菌个体都具有的结构,包括:( (一一) )细胞壁细胞壁位于细胞最外层,坚韧而有弹性功 能 (1) 维持细菌固有外形; (2) 保护菌体抵抗低渗;(3) 参与细胞内外物质交换;(4) 决定菌体的抗原性。1. G+菌细胞壁的化学组成肽聚糖:占 50%-80%,多达 50 多层磷壁酸:均匀分布于肽聚糖中(1) 肽聚糖又称粘肽、糖肽或胞壁质。 N乙酰葡糖胺(N-acetyl gl

14、ucosamine)聚糖骨架 N乙酰胞壁酸(N- acetyl muramic acid)肽聚糖 四肽侧链五肽交联桥(G菌没有)(2) 革兰阳性菌细胞壁特殊组分 胞壁较厚(2080nm),由内向外有肽聚糖 含量丰富(1550 层),多层聚糖骨架通过四肽侧链、五肽交联桥,组成坚韧的三维立体框架,结构致密。磷壁酸 革兰阳性菌的特殊组分。大量磷壁酸以长链形式穿插于肽聚糖中,一端结合在细胞壁上的称壁磷壁酸,结合在细胞膜上的称膜磷壁酸或脂磷壁酸(LTA),另一端游离于肽聚糖层外。磷壁酸抗原性强,是革兰阳性菌重要的表面抗原;有类似菌毛样的粘附特性,与致病性有关。溶菌酶可破坏肽聚糖的聚糖骨架,引起菌体裂解。

15、青霉素能干扰五肽交联桥与四肽侧链 D-丙氨酸之间的连结,导致细菌死亡。 金葡菌肽聚糖结构 湖南省医药学校 微生物学教案10 凡能破坏肽聚糖的结构或抑制其合成的物质,都能损伤细胞壁使细胞破裂或变形,因而具有抑菌或杀菌作用。 溶菌酶能水解聚糖骨架中的糖苷键。 环丝氨酸、磷霉素可抑制聚糖骨架的合成。 万古霉素、杆菌肽可抑制四肽侧链的连接。青霉素、头孢霉素可抑制五肽桥的连接。上述药物作用的结果使菌体不能形成肽聚糖,因而不能形成细胞壁,细菌失去细胞壁的保护,对环境因素敏感,容易受破裂、死亡。人和动物细胞没有细胞壁,无肽聚糖,故这类药物对人和动物细胞无毒性。2革兰阴性菌细胞壁特殊组分 胞壁较薄(1015n

16、m),结构较复杂,由内向外有(1)肽聚糖 (以大肠杆菌为例)a.含量少 仅占壁干重的 10%左右,1-3 层。 b.成分差异:没有五肽桥、四肽侧链中的第三位是二氨基庚二酸(DAP),与相邻聚糖链上第四位 D-丙氨酸直接连接。 C为单层平面网络二维结构 (2)脂蛋白由脂质和蛋白城质组成,其脂质部分与脂质双层的磷脂相连,蛋白质部分连接在肽聚糖的侧链上。 (3)脂质双层为 G菌细胞壁的主要成分,其内镶嵌一些特殊蛋白质,与细胞膜的结构相似,具有屏障作用,能阻止多种大分子物质和青霉素,溶菌酶等进入细胞体内。(4)脂多糖 类脂 A-内毒素的主要成分,与其致病性有关湖南省医药学校 微生物学教案11 核心多糖

17、特异性多糖 脂蛋白、脂质双层、脂多糖共同组成 G-菌细胞壁的外膜,占壁干重的 80%,具有屏障作用,一些作用于肽聚糖的药物,如青霉素,溶菌酶,对 G-菌无明显的抗菌作用。革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁的比较革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁的比较结 构革兰阳性菌革兰阴性菌细胞壁厚度及强度较厚、较坚韧较薄、较疏松肽聚糖含量丰富(占胞壁干重 5080)较少(占 10左右)磷壁酸有无脂蛋白无有脂质双层无有脂多糖无有对溶菌酶、青霉素敏感性敏感不敏感( (二二) )细胞膜细胞膜 1组成 脂质双层 蛋白质2功能a.选择性渗透作用b.呼吸作用c.生物合成d.形成中介体中介体细菌的细胞膜向胞浆内凹陷、折叠而成的管状或

18、囊状结构。主要参与呼吸作用。( (三三) )细胞质细胞质1组成:为无色透明溶胶状物,主要成分为水、蛋白质、脂类、核酸、无机盐等。2功能 : 为细菌的内环境,含丰富的酶系统。(1) 核蛋白体(也叫核糖体)湖南省医药学校 微生物学教案12 由 RNA 和蛋白质组成的微小颗粒,多个核糖体多聚核糖体,多聚核糖体为合成蛋白质的场所。 链霉素、红霉素能与核蛋白体结合,改变核糖体的结构,从而干扰蛋白质的合成,但对人体细胞无影响。(2)胞质颗粒 又称内含物为多种悬浮的颗粒,包括多糖、脂类、多聚磷酸盐等。(3)质粒 是细菌染色体外的遗传物质,为双股环状 DNA 分子。(四)核质组成: 即细菌的染色体,由一条细长

19、的环状双链 DNA 反复盘绕卷曲而成的块状物。功能: 控制生物体的性状。二、特殊结构二、特殊结构( (一一) )荚膜荚膜 概念: 某些细菌在细胞壁外包绕一层粘液性的物质,其厚度超过0.2um,且具有明显的边界者,称为荚膜,厚度小于 0.2um 者,称为微荚膜。成分: 大多数为多糖,少数为多肽。形状: 在光学显微镜下,呈发亮的透明圈。功能: 保护细菌 贮留水分( (二二) )鞭毛鞭毛概念: 鞭毛是从细胞膜长出的游离于菌体外的细长弯曲的丝状物,其长度可达菌体长度的数倍。存在: 孤菌、杆菌、个别球菌镜检:用鞭毛染色法染色,镜检种类: 单毛菌端毛菌丛毛菌周毛菌湖南省医药学校 微生物学教案13成分:蛋白

20、质功能:运动(液体,半固体中)( (三三) )菌毛菌毛概念: 某些细菌表面有比鞭毛纤细、短而直的丝状物,称为菌毛。成分: 蛋白质种类: 普通菌毛性菌毛1普通菌毛特点: 短而直、数量多、周身分布功能: 粘附能力,与致病力有关2性菌毛特点:长而粗、中空呈管状、110 根有性菌毛的细菌称为 F+菌,多为 G-菌无性菌毛的细菌称为 F-菌 功能:转移遗传物质-质粒( (四四) )芽胞芽胞 概念: 某些细菌在一定环境条件下,细胞质、核质发生脱水浓缩、凝聚,在菌体内形成一个园形或椭园形的小体,称为芽胞。能形成芽胞的多为 G+菌。1. 芽胞的形成和发芽 受遗传因素的控制和环境因素的影响动物体外及营养缺乏等

21、一个细菌繁殖体 一个细菌芽胞条件适宜发芽2特 点(1) 坚实无通透性的球体。芽胞含水量少,具有多层厚而致密的膜结构。结构为芽胞核心(核质、核糖体、酶类等)及芽胞被膜(6 层之多、致密、无通透性)。(2) 代谢相对静止,为细菌的休眠状态。(3) 含有特殊的化学组份吡啶二羧酸钙盐(DPA),并且含水量少,大大提高了芽胞的耐热性。(4) 抵抗力极强,耐热(100水数小时)、耐干燥(能在自然环境中存活数年至数十年),同时对药物、消毒剂及射线也有较强的抵抗力。芽胞对高温、干燥、化学消毒剂和辐射等有很强的抵抗力。为灭菌指标湖南省医药学校 微生物学教案14注:芽胞寿命长达几年至几十年。因此,干热 1602h

22、,湿热 1211530min 方可灭活。3功 能(1) 与消毒灭菌有关:芽胞的抵抗力极强,在消毒灭菌时,应以杀死芽胞作为灭菌的指标(121 20 分钟)。(2) 与创伤感染有关:例如深部创伤被泥土污染,进入伤口的破伤风梭菌芽胞,在适宜条件下,就会繁殖产毒,引起破伤风病。(3) 有助于鉴别细菌:不同芽胞的大小、形状、位置因菌而异,可依此鉴别细菌。小结:小结:细菌的基本结构和特殊结构,详见图 22。(p8 页)荚膜护菌强致病,鞭毛运动可鉴定,普通菌毛粘附膜,性毛传递耐药性,芽胞脱水浓缩体,灭菌标准抗力硬。湖南省医药学校 微生物学教案15第三节第三节细菌的营养与繁殖细菌的营养与繁殖一、化学组成与其它

23、生物相似,主要含有水(75%85%)、蛋白质、糖类、脂类等、核酸、无机盐。二、营养物质1.水(是生命之源)2.碳源 3.氮源 4.无机元素 5.生长因子三、繁殖 (一)、繁殖条件1.营养物质2.酸碱度:大多数为 PH6.87.43.温度:多数病原菌为 37,在 1540范围内能生长,耐低温但不耐高温4.气体:主要是 O2和 CO2根据细菌对氧气的不同要求,可分为: 专性需氧菌:如结核杆菌 专性厌氧菌:如破伤风杆菌 兼性厌氧菌:大多数病原体 (二)、繁殖方式与速度无性二分裂法,一般需要 2030min四、人工培养 (一)、培养基1.培养基是人工配制的供给细菌或其它微生物生长繁殖的营养物质,必须具

24、备以下条件:湖南省医药学校 微生物学教案16含有一定配比的营养物质合适的酸碱度适当的物理状态本身必须是无菌的2.种类液体固体: 加 1.5%2%琼脂半固体:加 0.2% 0.5%琼脂 培养细菌常采用 肉汤培养基,加 1%glu,即为营养肉汤培养基(二)、配制原则1. 根据营养需要细菌 营养肉汤培养基放线菌 高氏 1 号培养基真菌 沙保培养基2. 根据培养目的:C/N 碳、氮原子摩尔数之比3. 调节适宜的 PH.加 K2HPO4、KH2PO4.直接滴加酸、碱4. 寻找廉价易得的原料 (三)、细菌在培养基中的生长现象接种 1824 小时可见1. 在液体培养基中.均匀混浊;.液面菌膜;.沉淀;用途:

25、增菌培养、生化试验等2. 在半固体培养基中无鞭毛菌 只沿穿刺线生长,周围仍透明鞭毛菌 向穿刺线周围扩散生长,呈云雾状 用途:动力试验3. 在固体培养基上湖南省医药学校 微生物学教案17A: 固体平板:将细菌划线接种于固体培养基表面,经一定时间培养后, 长出肉眼可见的由单个细菌繁殖而成的集团, 称为菌落。细菌菌落特点:较小、较薄、半透明、易挑起、正反两面颜色相同、常有臭气菌落常表示纯种菌,其特征具有鉴别意义并与致病性有关。一般分为三型:光滑型菌落(S 型) 表面光滑、湿润,边缘整齐。粗糙型菌落(R 型) 表面粗糙、干燥,边缘不整齐。粘液型菌落(M 型) 表面粘稠,有光泽,似水珠样。 B: 固体斜

26、面:多个菌落连成一片 菌苔由于一个菌落由一个细菌繁殖而成,将分离到的可疑菌落转接到另一新鲜培养基上,以获得大量纯种细菌 纯培养用途: 固体平板 分离细菌;测定细菌数量 固体斜面 保存菌种、纯培养第四节第四节 细菌的生长细菌的生长 “生长”指整个群体细胞数目的增长,即整体物质的增加。一、生长的测定 (一)、测定细胞数目1.全细胞计数法计数器测定法:即用血球计数器评价:少用 电子计数器计数法评价:自动计数,但不识别颗粒物质2.活细胞计数法平板菌落计数法湖南省医药学校 微生物学教案18注意事项:.选菌落数在 30-300 之间的平板计数 .在培养基中加入 TTC,防止菌落蔓延,并显粉红色.本法限用于

27、形成菌落的微生物(二)、测定细胞量的方法1. 比浊法2. 测定细胞重量法培养物经离心后,剩得菌体 直接称重 湿重法 烘干称重 干重法3. 测定细胞总氮量或总碳量二、细菌群体生长规律 (一)、将一定数量的细菌接种于合适的液体培养基中培养,定时取样计数细菌数量1. 迟缓期:菌数不增加,但体积增大、代谢活跃2. 对数生长期:繁殖迅速,按几何级数增长,菌数的对数呈直线上升,群体的形态、化学组成、染色性和生理特征均较典型3. 稳定期:繁殖速度逐渐减慢,繁殖数与死亡数趋于平衡,活菌数相对稳定;产生外毒素、抗生素、氨基酸等代谢产物;芽胞开始产生4. 衰退期:繁殖越来越慢,直至停止;芽胞成熟。(二)、实际意义

28、:1. 在制剂工作中,将灭菌工作放在细菌对数生长期之前2. 以对数生长期细菌,作发酵种子;或研究形态、生理特征。 3. 稳定期代谢产物积累到高峰期,生产上宜在此时放罐。如此时补充营养物质,并调节 PH,可延长稳定期,提高产量。湖南省医药学校 微生物学教案19第五节第五节新陈代谢新陈代谢一、酶 胞内酶 固有酶1、分类:胞外酶 诱导酶 2、性质: 温和性、高效性、专一性二、代谢过程 有机酸葡萄糖丙酮酸 CO2 H2其它三、代谢产物(一)分解代谢产物1、糖发酵试验C6H12O6 大肠杆菌CH3COCOOH + HCOOH + CO2 + H2 (或乳糖) (甲酸) (气体) C6H12O6 伤寒杆菌

29、 CH3COCOOH + HCOOH(甲酸) 乳糖 伤寒杆菌 不分解结果观察:酸性: 加指示剂 酸性复红溴甲酚紫 紫黄(+)产气: 杜氏小管收集: 产生气泡(+)2、甲基红试验(M) 甲酸葡萄糖 大肠杆菌 乙酸 PH4.5 (+)(或乳糖) 乳酸湖南省医药学校 微生物学教案20 甲酸葡萄糖 产生杆菌 乙酸 PH5.4 () 乙酸甲基甲醇现象观察:(+)红色 甲基红 桔黄色() PH4.5 PH5.43、VP 试验葡萄糖 产生杆菌 乙酸甲基甲醇 OH- 二乙酰 Arg 红色化合物(+)大肠杆菌切片葡萄糖不产生乙酰甲基醇,故不产生红色化合物 ()现象观察: 培养物中加 40%Koh1020d,在加

30、 a-奈酚,371530min,出现红色(+)4枸橼酸盐利用试验(C)枸橼酸盐 产生杆菌 碳酸盐 PH7. (+)枸橼酸盐 大肠杆菌 不分解()现象观察: 加指示剂溴麝香草酚蓝(BTB). 浅绿色 BTB 深蓝色 PH7. PH7. 注:培养基中必须以枸橼酸钠为唯一碳源,以磷酸二氢铵为唯一氮源,不得加入其它含碳或氮化合物5吲哚试验()色氨酸 大肠杆菌 吲哚 ()色氨酸 产生杆菌 不分解 ()现象观察:加柯氏试剂(对二甲基氨基苯甲醛)数滴于培养物中,混匀后静置数分钟。湖南省医药学校 微生物学教案216硫化氢试验含硫氨基酸 沙门菌属 H2S+CH3COCOOH+H2OH2S + Pb(Ac)2 P

31、bS Hac (黑色)大肠杆菌含硫氨基酸 不产生 H2S 产生杆菌吲哚试验()甲基红实验(M) 、VP 试验,枸橼酸盐利用试验(C),简称为 IMViC 实验,常用于大肠杆菌与产气杆菌的鉴别,结果是:大肠杆菌+ +,产气杆菌+(二)合成代谢产物1热原质许多 G菌能产生一种耐热物质,将它注入人体或动物体内,可以引起发热反应,这种物质称为热原质。G菌的热原质即为脂多糖,耐高温,121.20min 不受破坏. 2501h 或 1804h 方能破坏.制药工业中,用吸附或过滤方法除去热原质。2 毒素G+菌 外毒素G菌 内毒素3 酶类如链激酶、链道酶可用于治疗血栓、化脓等。4 抗生素如杆菌肽、多粘菌素等。

32、5 维生素如大肠杆菌产生 VB 、VK6 细菌素多用于鉴别.湖南省医药学校 微生物学教案227色素: 用于鉴别第六节第六节 致病性致病性细菌能引起机体产生疾病的性质,称为致病性。凡具有致病性的细菌称为病原菌或致病菌。 毒力 致病三因素: 侵入数量 侵入门户一、细菌的毒力(一)侵袭力-指病原菌突破机体的防御机能,在体内生长繁殖、蔓延扩散的能力。1. 菌体的表面结构(1) 菌毛等粘附因子粘附作用是细菌引起感染的首要条件。(2) 荚膜能抵抗吞噬细胞及体液中杀菌物质的作用。(3) 其它A 蛋白 B 蛋白 K 抗原等2侵袭性酶(1) 透明质酸酶分解结缔组织中的透明质酸,使细胞间隙扩大,有利于菌体扩散。(

33、2) 血浆凝固酶使血浆凝固,沉积于菌体表面及病灶周围。(3) 链激酶 溶解血浆凝块,利于细菌扩散。(4) 链道酶水解 DNA,使浓汁变稀。(二)毒素1. 外毒素:湖南省医药学校 微生物学教案23概念:外毒素是细菌在生长繁殖与代谢过程中合成并分泌到菌体外的一种毒性蛋白质。来源:G+、少数 G-菌。成分:蛋白质性质:6030min 可破坏,化学药品易破坏。毒性:强,对组织细胞的毒害有高度的选择性。致热性:多不引起发热。抗原性:强,能刺激机体,产生相应抗体,0.3%-0.4%甲醛处理可成为类毒素。2内毒素: 概念:是 G-菌细胞壁的脂多糖,当菌体死亡崩解后释放出来。 来源:G-菌。 成分:脂多糖,其

34、中的类脂 A 为毒性部分。 性质:耐热,1604h 才能破坏。毒性:弱,对组织细胞无选择性,小剂量引起发热,大剂量引起白细胞反应,严重感染引起 DIC。致热性:强。抗原性:弱。甲醛不能使其成为类毒素。二、侵入数量与其毒力成反比。三、侵入门户霍乱痢疾等必须经口进入肠道内感染。破伤风经深部创口致病。但结核杆菌可经呼吸道、消化道、皮肤粘膜感染。四、传染类型 感染又叫传染-是在一定条件下,侵入机体的病原菌与机体相互作用而引起的病理过程。 传染病-在传染过程中,有明显的临床症状。湖南省医药学校 微生物学教案24(一)隐性感染虽经感染,但机体的损害较轻,不引起明显的病变和临床症状。 (二)显性感染-传染病

35、机体经感染出现明显的病变和临床症状。1局部感染 病原菌局限在一定部位生长繁殖。2全身感染 病原菌向全身扩散。(1)毒血症:病原菌不入血流,只有毒素入血流。如白喉、破伤风。(2)菌血症:病原菌入血流,但不在血中繁殖。如早期伤寒。(3)败血症:病原菌入血流,且在其中繁殖,引起严重的全身中毒症状。(4)脓毒血症:化脓性细菌引起的败血症。(三)带菌状态:机体经隐性或显性感染后,有时病原菌在体内继续存在,并不断向体外排菌,称为带菌状态。处于带菌状态的人称为带菌者。湖南省医药学校 微生物学教案25金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌一、生物学特性1菌体呈球形,常排列成葡萄串状,G+。2可产生脂溶性金黄色色素。3在

36、无芽胞菌中抵抗力最强,对龙胆紫敏感。二、毒力因素1血浆凝固酶:使人或免血浆发生凝固,此酶可使血浆凝固在菌体周围,阻碍吞噬细胞的吞噬及血清中杀菌物质折杀灭。纤维蛋白沉积在病灶周围,阻止药物及体内杀菌物质与细菌接触,利于细菌繁殖。局部毛细血管栓塞可限制细菌扩散,故感染病灶易于局限,与周围组织界限明显。 2肠毒素:可引起呕吐、腹泻为主要症状的食物中毒。 3溶血素:三、典型疾病 (一)化脓性炎症 葡萄球菌可通过多种途径侵入机体,导致皮肤或器官的多种感染。炎症病灶特点:脓液黄色粘稠,病变多局限,与周围组织界限明显。(二)毒素性疾病1由肠毒素引起的急性肠胃炎-食物中毒 2剥落性皮炎:表皮大面积脱落,病死率

37、高。五、防治原则1创伤及时消毒处理。2合理使用抗菌药。乙型溶血性链球菌乙型溶血性链球菌一、生物学特性 菌体球形或卵圆形、链状排列、G+。二、毒力因素:1透明质酸酶 又称扩散因子,能分解细胞间质中透明质酸,使细菌易于扩散。2链激酶 溶解血块或阻止血浆凝固。3链道酶 分解脓液中高度粘稠的 DNA,使脓液稀薄。4溶血素 对中性粒细胞、血小板、巨噬细胞、神经细胞、心肌细胞等有破坏或毒性作用。5红疹毒素 又称致热外毒素。三、常见疾病:(一) 急性化脓性炎症 皮肤、皮下组织及其它部位或器官的多种感染炎症病灶特点:病变易扩散、周围界线不清,脓液稀薄,带血色。(二) 猩红热 为儿童常见的一种急性呼吸道传染病,

38、主要表现为发热、咽炎、弥漫性鲜红色皮疹等。(三) 超敏反应性疾病 急性感染 2-3 周后,有些患者可出现风湿热和肾小球肾炎。四、防治原则1对急生咽炎、扁桃体炎的患儿,及时彻底治疗,以防止肾小球肾炎、风湿热等发生。2治疗首选青霉素 G。湖南省医药学校 微生物学教案26肺炎链球菌肺炎链球菌一、物学特性菌体呈矛头状或瓜子仁状,G+。二、毒力因素 荚膜具有抗吞噬作用,是主要致病物质。三、常见疾病:大叶性肺炎病(咳嗽、流鼻嚏、呼吸急促)四、治疗:大剂量青霉素或林可霉素脑膜炎双球菌脑膜炎双球菌一、形态:肾形,G+ 毒力:内毒素二、致病症 流行性脑脊髓膜炎(流脑) 病人表现为突然恶寒、高热、恶心、呕吐、皮肤

39、或粘膜出现出血点或出血块。细菌突破血脑屏障侵犯脑脊髓膜,引起化脓性炎症,表现为剧烈头痛,喷射状呕吐,颈项强直等脑膜刺激症状及脑脊液的变化。三、 防治原则i.注射流脑疫苗ii.早发现,早隔离,早治疗,治疗首选磺胺嘧啶,或大剂量青霉素。淋球菌淋球菌 淋球菌是人类淋病的病原菌,淋病是发病率很高的性病,主要经性接触传播,病人分泌物污染的衣物、毛巾、浴盆等均有传染性。 淋病患者主要表现为泌尿生殖道的化脓性炎症。 预防应从取缔娼妓入手,加强卫生宣传。 治疗应力求彻底,首选青霉素。新生儿出生后,应立即用 1%AgNo3滴眼。伤寒杆菌伤寒杆菌一、生物学特性伤寒杆菌、副伤寒杆菌是肠道致病菌。二、毒力因素 1.V

40、i 抗原:抗吞噬 2.内毒素:毒性较强,可引起发热、白细胞减少、中毒性休克等中毒症状。三、临床急病伤寒与副伤寒临床表现相似治疗方法相同。仅伤寒症状较重,病程较长而已。初期(约 1 周) 出现发热、乏力、全身不适。极期(第 2-3 周) 由于大量内毒素释放,全身中毒症状加重,表现为高热(39),缓脉(90 次/分) 玫瑰疹(胸腹部)易发生肠出血、肠穿孔。恢复期(第 3 周后)血清抗体升高,免疫功能加强,如无并发症,体温逐渐下降,病情逐渐好转。伤寒痊愈后,部分人仍然继续排菌,乃重要传染源。湖南省医药学校 微生物学教案27(二) 食物中毒主要症状为发热,恶心、呕吐、腹痛腹泻。 附:伤寒杆菌为胞内寄生

41、菌,病愈后有牢固免疫力。 痢痢 疾疾 杆杆 菌菌一、生物学特性无鞭毛,不能运动,一般不发酵乳糖,对酸敏感,G-。二、毒力因素1菌毛 细菌通过菌毛粘附在大肠粘膜细胞上,在粘膜固有层内形成感染灶,一般不侵入血流。2内毒素 内毒素作用于肠壁,使其通透性增高,促进毒素吸收,毒素作用于中枢神经系统及心血管系统,引起发热、神志障碍,甚至中毒性休克;毒素作用于肠粘膜形成炎症、溃疡,出现典型的脓血粘液便。三、临床疾病1急性菌痢 起病急,典型表现为腹痛、腹泻、里急后重、脓血沾液便,常有发热。2中毒性菌痢 多发生于儿童,以高热、惊厥、昏迷起病,病情凶险,病死率高。3慢性菌痢 病程超过 2 个月,迁延不愈,因症状不

42、典型,易被误诊。 百百 日日 咳咳 杆杆 菌菌一、生物学特性 G-球杆菌,无鞭毛,不形成芽胞。二、主要症状早期轻度咳嗽、发热、喷提、喷嚏、类似普通感冒,1-2 周后,出现阵发性、痉挛性咳嗽,晚间比白天重,咳后咳气像鸡叫,吐出粘痰。易并发肺炎。三、预防常用百白破三联疫苗进行人工自动免疫。大大肠肠埃埃希希氏氏菌菌大肠埃希氏菌俗称大肠杆菌,菌体呈短杆或长杆状,长1.03.0m ,宽 0.51.0m 。革兰染色阴性,大多数有周鞭毛,能运动,有菌毛。无芽胞,一般无荚膜。菌落呈白色至黄白色,光滑、闪光。大肠埃希氏菌是人类肠道菌群的重要成员,在肠道内能合成维生素B、K,供人体吸收利用,产生的大肠菌素,能抑制

43、志贺菌、沙门菌等病原菌的生产,对机体是有利的。但若离开肠道侵入其他组织器官时,可引起化脓性炎症,如肾盂肾炎、腹膜炎等。大肠埃希氏菌在医药工业中的应用举例:(1)制取氨基酸:如天门冬氨酸、色氨酸、苏氨酸等。(2)制备多种酶:如天门冬酰氨酶(抗肿瘤,用于治疗白血病)青霉素酰化酶、溶菌酶(用于消炎、抗菌等)等。(3)作为基因工程受体菌:经改造后可作为工程菌,用于生产各种多肽、蛋白质类药物(如生长素、胰岛素、干扰素、白介素等)和氨基酸。(4)作为口服药品中微生物学检验的指标菌。湖南省医药学校 微生物学教案28霍乱孤菌霍乱孤菌一、生物学特性 短小、弯曲呈孤形,G- 一端有单鞭毛,运动活泼,100煮沸 1

44、-2 分钟,可杀死本菌,因此,饮用开水是有效的预防措施。二、毒力因素1菌毛 粘附于肠上皮细胞,并在其上繁殖。2肠毒素三、临床疾病在自然条件下,人类是霍乱孤菌唯一的易感者,通过污染的水源或食物经口感染,暴饮暴食造成胃酸被稀释,有利于霍乱孤菌的生长繁殖。肠毒素进入小肠细胞内,使其分泌功能亢进,导致严重的呕吐与腹泻,吐泻物呈米泔水样,剧烈吐泻导致严重脱水,代谢性酸中毒,严重者可因肾功能衰竭,休克而死亡。病后可获得牢固的免疫力,再感染者少见。四、防治原则1接种霍乱孤菌死疫苗。2治疗应及时补充液体和电解质、氟哌酸、四环素抗菌。白白 喉喉 杆杆 菌菌一、生物学特性 菌体细长微弯,一端或两端膨大呈棒状,G+

45、。二、毒力因素白喉毒素是白喉杆菌的主要致病物质,能抑制敏感细胞蛋白质合成,破坏细胞正常生理功能,引起组织坏死。三、临床疾病 白喉杆菌引起的白喉多在秋冬季节流行,细菌累飞沫传播,从呼吸道侵入,在鼻咽部粘膜上繁殖并分泌外毒素。 白喉的特征是在咽喉等处形成灰白色假膜,故名假膜易脱落阻塞气道窒息,是白喉病死的主要原因。 病后,隐性感染和预防接种均可获得免疫力。四、防治原则预防: 注射白喉类毒素是预防白喉的主要措施,目前,国内外均应用白喉类毒素,百日咳菌苗、破伤风类毒素混合制成三联疫苗,简称白百破疫苗。治疗 对白喉患者除使用抗生素外应及早注射足量白喉抗毒素。 结核杆菌结核杆菌一、生物学特性1菌体细长弯曲

46、,常聚集成团,G+。2耐干燥,在干燥的痰中可存活 6-8 个月,粘附尘埃上 8-10 天保持传染性。3耐酸碱、耐青霉素,可抵抗 3%Hcl、6%H2SO4、4%NH。4怕湿热 液体加热 62-63,15min 或煮沸即可杀死,故可用巴氏消毒法杀死牛奶中的结核杆菌,病人使用的餐具可经煮沸消毒。5怕酒精 70-75%酒精可杀死细菌。湖南省医药学校 微生物学教案296怕紫外线,日光晒数小时可杀死。二、临床疾病 结核杆菌可通过呼吸道、消化道或皮肤伤口侵入引起全身多部位多器官的结核病,其中以呼吸道感染的肺结核最常见。结核杆菌可通过呼吸道、消化道或皮肤伤口侵入,引起全身多部位器官的结核病,其中以呼吸道感染

47、的肺结核最常见。结核杆菌的感染是一个慢性过程,常持续数年之久。三、防治原则1预防 新生儿接种卡介苗2治疗 早期发现,早期治疗。联合用药,彻底治愈,可选用链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇等。破伤风杆菌破伤风杆菌一、生物学特性 菌体细长,有周鞭毛、形成芽胞,G+,专性厌氧。 二、毒力因素痉挛毒素 是一种神经毒素,可到达中枢神经系统的脊髓前角及脑干。1mg 纯毒素可杀死 3000 万只小鼠,对人的致死量小于 1ug。三、临床疾病破伤风杆菌及芽胞经伤口侵入机体,在厌氧的微环境下生长繁殖,因此,侵入伤口及局部厌氧微环境是,是破伤风杆菌致病的重要条件,两者缺一不可。破伤风患者的典型表现为:牙关紧闭,面容苦

48、笑,呑咽困难,角弓反张,痉挛可出现呼吸困难,甚至窒息死亡。四、防治原则1预防 对 6 个月至 6 岁儿童可采用百白破三联疫苗,接种 3 次。2紧急预防 对创伤较深,混有泥土杂物者,肌肉注射 1500-3000uT.A.T 注射前应作皮试。3治疗 10 万-20 万 u TAT + 大剂量青霉素,均应皮试。产气荚膜杆菌产气荚膜杆菌一、生物学特性:菌体 G+,粗大杆状,芽胞卵圆形。二、临床症状1气性坏疽 多见于战伤,也可见于平时有创口污染的大面积开放性骨折及软组织损伤,表现为局部组织坏死,气肿、水肿、恶臭、剧痛,且迅速蔓延,伴有全身中毒症状。2食物中毒 表现为剧烈腹痛和腹泻,一般 1-2 天可自愈

49、。三、防治原则1预防 及时清洗伤口,用 H2O2冲洗。2治疗 应尽早实施手术,彻底清除感染和坏死组织,必要时截肢以防病变扩散。 大剂量青霉素可杀灭病原菌。湖南省医药学校 微生物学教案30 肉毒杆菌肉毒杆菌一、生物学特性G+大杆菌,有周鞭毛,芽胞椭圆形,抵抗力强,湿热 100可生存 5h,湿热 12130min 才致死。二、毒力因素肉毒毒素是已知毒素中毒性最强的,毒性比 KCN 强 1 万倍,纯品 1mg 能杀死 2 亿只小鼠,对人的致死量可 0.1ug。肉毒毒素作用于颅脑神经核和外周神经肌接头,导致肌肉驰缓型麻痹。三、临床疾病1食物中毒该病是单纯性毒素中毒,而非细菌感染。 肉毒中毒的临床表现与

50、其它食物中毒不同,胃肠症状少见,主要为运动神经末梢麻痹,典型表现先从眼肌麻痹开始,出现复视,斜视、眼脸下垂,逐渐发展至咽部肌肉麻痹,致吞咽困难,呼吸困难与衰竭。四、防治原则食品加热消毒是预防本病的关键。炭疽杆菌炭疽杆菌 炭疽杆菌是引起炭疽病的病原菌,炭疽病是一种人畜共患的急性传染病,主要发生于牛、羊、马等草食动物,亦可传染给人。 一、生物学特性G+粗大杆菌,是致病菌中最大的细菌,专性需氧。二、毒力因素 荚膜与炭疽毒素是主要致病物质,荚膜具有抗吞噬作用,有利于细菌在机体组织内繁殖与扩散。三、所致疾病 炭疽杆菌可经皮肤、呼吸道或胃肠道侵入机体引起炭疽病。早期头痛、发烧。 1皮肤炭疽 最多见,占炭疽

51、病的 98%,主要通过接触病及其皮毛等患病,皮肤炭疽呈痈样病灶,中内有坏死黑痂,炭疽之名由此而得。2肺炭疽 由吸入含有大量病菌芽胞的尘埃所致,表现为寒战、高热、呼吸困难、胸痛及全身中毒症状。3肠炭疽 食入未煮热的病畜肉,引起以全身中毒症状为主,伴有呕吐,粪便带血、腹胀、腹痛等。四、防治原则1对牧民、屠宰工人、兽医、制革工人等人员用炭疽减毒活疫苗皮上划痕接种上。2 治疗首选青霉素、四环素、氯霉素、强力霉素等也有效。湖南省医药学校 微生物学教案31第三章放线菌放线菌是一类介于细菌与真菌之间的单细胞、呈分枝状生长的原核细胞型微生物。放线菌的细胞内无完整的核(即核膜和核仁) ,它的核由缠绕的 DNA

52、组成。细胞壁中含有细菌等原核细胞型微生物所特有的肽聚糖,不含有真菌细胞中所具有的纤维素或几丁质。放线菌的菌丝比真菌菌丝细得多,其直径与细菌的近似,在1m 左右。因而,放线菌更接近于细菌,国际微生物学者现已将它列入广义的细菌中。放线菌因其菌落呈放射状而得名。放线菌在自然界中分布很广,主要以孢子或菌丝状态存在于土壤、空气、水中以及高山和深海中,而以中性或偏碱性肥沃土壤中含量最多。放线菌对分解有机物质,改变土壤结构以及在自然界物质转化中起一定的作用。放线菌是抗生素的主要产生菌,且能产生不同种类的抗生素,现在人畜和农用的抗生素近6000 多种,其中有 4000 多种是由放线菌产生的。放线菌还可用于制造

53、维生素、酶制剂、甾体转化及污水处理等方面。因此,放线菌在微生物研究中日益倍受重视。第一节第一节生物学特性生物学特性一、形态:基内菌丝(1m 左右) 菌丝 气生菌丝 (较粗、颜色较深) 孢子丝孢子: 无性孢子二、生理:(一)培养1为需氧菌,生产中应通气搅拌。2PH6.87.5 生长良好,对酸较敏感。3最适温度为 2832。4实验室常用高氏 1 号培养基培养(P212 页) 53-7 天形成菌落。(二)菌落特征在固体平板培养基上可形成菌落,由菌丝体和孢子形成,特征如下:湖南省医药学校 微生物学教案321大小与细菌相似,较小,但表面干燥。 (与细胞有关。)2与培养基结合紧密,坚实多皱,致密牢固,不易

54、挑起。3孢子成熟后,正反两面颜色可能不同。4常有土腥气。(三)抵抗力1对湿热抵抗力差,50601545min 被杀死。2孢子耐干燥,在干燥泥土粘末中可存活 2 年以上,对醇类、酸、碱、戍二醛有一定的抵抗力。三、繁殖以孢子进行无性繁殖。孢子芽管分支菌丝体第二节第二节分类分类 现代微生物学将放线菌列入细菌类,原因如下:只有原始核,无核膜,核仁。细胞壁由肽聚糖组成,染色 G+。对酸敏感。对抑制细菌的抗生素敏感。分类地位: 原核生物界、厚壁菌门、放线菌纲、放线菌目。放线菌目的特征: 有发育良好的菌丝体。 菌丝与孢子 1m 左右。 G+。湖南省医药学校 微生物学教案33第三节第三节放线菌与人类关系放线菌

55、与人类关系一、产生抗生素的放线菌(一)链霉菌属 1特征:有发育良好的菌内菌丝,气生菌丝、孢子丝。基内菌丝 0.51.2m 无横隔气生菌丝 11.4m孢子丝 2经济意义:(约 2800 余种抗生素)灰色链霉菌 链霉素卡那霉素链霉菌 卡那霉卡红霉素链霉菌 红霉素金霉素链霉菌 金霉素(当培养基中的 NaCl,用 NaBr 代替时,新产生四环素)。用于肺炎、败血症、斑疹伤寒、沙眼,此外还有氯霉素、新霉素、两性霉素、制霉菌素、万古霉素、博莱霉素。3、重要的链霉菌举例:(1)灰色链霉菌( S. griseus) (2-27)此菌在葡萄糖 -硝酸盐培养基上生长,菌落平而薄,起初白色,渐变为橄榄色,气生菌丝浓

56、密、粉状,呈水绿色,发育适温37,产生链霉素适宜温度26.527.5。(2)红霉素链霉菌 (S.erythreus)此菌生长扩展,有不同规则的边缘,菌丝深入培养基内,菌丝初白色,后变为微黄色,菌落周围白色乳状,气生菌丝细,有分支。最适温度为25,产生红霉素。(3)金霉素链霉菌 (S.aureofaciens)此菌在马铃薯葡萄糖琼脂等培养基中生长时,基内菌丝能分泌金黄色的色素,气生菌丝无色,孢子在初形成时亦为白色, 28培养 57 天,则由棕灰色转为灰黑色,此菌产生金霉素(氯四环素) ,当培养基中的 NaC1 用 NaBr 代替时,就产生四环素。(4)龟裂链霉菌 (S.rimosus)湖南省医药

57、学校 微生物学教案34菌落灰白色,后期生皱褶,呈龟裂状。菌丝呈树枝状分支,白色,孢子灰白色,柱形,产生土霉素(氧四环素)。 (二)诺卡菌属 1特征: 主要形成基内菌丝,纤细,0.3-1.2m,有横隔,易断裂呈杆状。 菌落较小,表面多皱,致密,干燥或湿润,用接种环一触即碎。2经济意义(30 多种)地中海诺卡菌:利福霉素(结核、沙眼) 间型霉素(原虫、病毒) 瑞斯托菌素(作用于 G+菌)(三)小单孢菌属1特征:基内菌丝纤细,0.3-0.6m,无横隔,基内菌丝上长出孢子梗,顶端只生一个孢子。菌落小,凸起,多皱或光滑,常有颜色。 2经济意义 (50 多种) 棘孢小单孢菌、绛红小单孢菌:庆大霉素(广谱型

58、、但副作用大、耳聋) 小单孢菌,湖生小单孢菌: 利福霉素创新霉素 卤霉素(四)游动放线菌属1特征: 基内菌丝分支,直或卷曲,上生孢囊梗,直或分支,每支顶上有 1至数个孢囊,囊内有孢囊孢子,孢子球形,有鞭毛,能运动。2、经济意义菌落湿润发亮。生长缓慢,经23 周培养才能形成菌落。我国发现的创新霉素是由济南游动放线菌(Ajinanensis)产生的。湖南省医药学校 微生物学教案35 济南游动放线菌:创新霉素(五)高温放线菌属1特征:有发育良好的基内菌丝和气生菌丝、孢子侧生孢子,孢子具芽胞的结构与性质,对热,化学药物有抵抗力。2意义: 高温红霉素(广谱抗菌药) 此外,该菌常存在于自然界高温场所,如堆

59、肥、牧草中,引起农民呼吸系统疾病。(六)链孢囊菌属该属的特点是:基内菌丝分支很多,横隔稀少,直径0.51.2m ;气生菌丝丛生、散生或同心环状排列,白色至淡粉色;孢子囊是由气生菌丝盘卷而成的,内部产生多个孢囊孢子;孢子球形,直径1.82.0m ,有一发亮小体,但无鞭毛不能运动(图2- 33) 。该属中粉红链孢囊菌( Sroseum)能产生多霉素,可抑制革兰阳性细菌、阴性细菌、病毒等,对肿瘤也有一定的抑制作用;绿灰链霉菌(Sviridogrseum)能产生孢绿菌素,对细菌、霉菌、酵母菌均有抑制作用。 二、致病性放线菌 1衣氏放线菌2星形诺卡菌湖南省医药学校 微生物学教案36第四章真 菌真菌-是一

60、类有高度分化的细胞核(有完整的核膜、核仁) ,但不含叶绿体,无根、茎、叶的分化的真核细胞型微生物。 真菌可分为五个亚门菌丝横隔有性孢子鞭毛菌亚门无卵孢子接合菌亚门无接合孢子子囊菌亚门有子囊孢子担子菌亚门有担孢子半知菌亚门有不明第一节第一节真菌的生物学特性真菌的生物学特性一形态结构(一)霉菌:是丝状真菌的一个通俗名称,意即“发霉的真菌” 。 菌丝呈管状 2-10m,分支或不分支,有隔或无隔,细胞壁成分为几丁质,其单体为 N-乙酰葡萄糖胺,故对青霉素等抑制细菌的抗生素不敏感。 基内菌丝 菌丝 气生菌丝 生殖菌丝 无性孢子孢子 有性孢子(二)酵母菌 单细胞 卵圆形 圆柱形 长 550m,宽 15m。

61、有些、酵母细胞与其子细胞连在一起形成链状,称为假菌丝。 酵母菌细胞壁成分主要为酵母多糖(葡聚糖与甘露聚糖),其次为几丁质,细胞质中有一至多个液泡。二、繁殖湖南省医药学校 微生物学教案37无性繁殖有性繁殖(一)无性繁殖1裂殖:如裂殖酵属2菌丝断裂3无性孢子:多数真菌(1) 游动孢子:如水霉属 在游动孢子囊内形成,孢子具鞭毛。(2) 孢囊孢子:如接合菌亚门 在孢子囊内形成(3) 厚亘孢子菌丝中个别细胞在不良环境中,膨大,原生质紧缩,形成类似芽胞的结构。 (4) 关节孢子:如接合菌亚门菌丝产生横隔,断裂后形成节段。(5) 分生孢子:如子囊菌和半知菌 菌丝末端或侧缘形成 。(6) 芽生孢子 如酵母酵母

62、细胞长生 12 个小芽,小芽有的脱落,有的不脱落,不脱落的成为假菌丝。(二)有性繁殖 经过两性细胞配合产生新个体的过程。过程:质配核配减数分裂有性孢子萌发菌丝体有性孢子的类型:1、卵孢子雄器+藏卵器卵孢子 2、接合孢子两个圆形配子囊结合接合孢子 3、子囊孢子湖南省医药学校 微生物学教案38圆形或异形配子囊结合囊状细胞 4.担孢子() ()菌丝质配双核菌丝顶端膨大担子三、培养(一) 培养条件酸PH57甜糖类温2228湿湿度大氧需氧菌慢几天培养真菌常用沙保琼脂培养基(二) 菌落特征1.霉菌型较大、疏松、絮状、绒状、不易挑起2.酵母型较大、扁平、湿润、光滑、不透明、易挑起、常有香气3.类酵母型表面如

63、酵母型,但有假菌丝伸入培养基内第二节第二节几种常见真菌几种常见真菌一、酵母菌假菌丝子囊代表酵母属无有啤酒酵母假丝酵母属有无白色念珠菌隐球菌属无无新型隐球菌(一) 啤酒酵母呈圆形、卵圆形、腊肠形、大小为 2.210.5mX3.52m,在麦芽计培养基上呈乳白色,有光泽,平坦,边缘整齐,无性繁殖产生芽孢子,有性繁殖湖南省医药学校 微生物学教案39形成子囊孢子。(二) 白色念珠菌卵圆形,约为 2.54m,无性繁殖产生芽孢子,有性阶段不明。该菌存在于正常人的口腔、上呼吸道及肠道中,为一种条件致病菌,可引起鹅口疮等疾病。(三) 热带假丝酵母为条件致病菌(四) 新型隐球菌为土壤、鸽类、牛乳、水果、腐生菌、可

64、侵染人或动物呼吸道,引起肺部炎症。二、毛霉属接合菌亚门、毛霉目菌丝无隔,气生菌丝单生,末端膨大形成孢子囊,囊内产生孢囊孢子。存在:土壤、蔬菜、水果等富含淀粉的物品中,菌丝发达,引起霉变。代表种:高大毛霉(产琥珀酸)鲁氏毛霉(做豆腐乳)总状毛霉(制豆豉)三、根霉属接合菌亚门毛霉目菌丝无隔,基内菌丝呈假根状,连接假根之间的菌丝为匍匐丝、从假根相反方向长出孢囊梗,顶端膨大,形成孢子囊,孢囊孢子多呈黑色。代表种:匐支根霉(黑根霉)为一种条件致病菌,多发生于糖尿病,酸中毒的病人,也是常见污染菌,一切生霉的材料上常有它。四、曲霉属为半知菌亚门菌丝有隔,在繁殖阶段,由营养菌丝分化形成一膨大的菌丝细胞,称为足

65、细胞,足细胞上生长出气生菌丝分生孢子梗,其顶端膨大形成顶囊,表面以辐射状长出一层或二层小梗,小梗顶端产生分生孢子。湖南省医药学校 微生物学教案40曲霉菌是发酵工业和医药工业的重要生产菌,如酿酒、有机酸酶制剂及抗生素等,也能引起食物、药品霉变。代表种:黄曲霉(易生长在花生上,产黄曲霉毒素)黑曲霉(生产酒精、白酒)宁佐美曲霉(生产白酒)米曲霉(酿酒、酱油)五、青霉属半知菌亚门菌丝有隔,气生菌丝分化产生分生孢子梗,并向上作多次分支,最后一次分支上长出成串的分生孢子,整个分支呈扫帚状或穗状,习称“青霉穗” 。分生孢子多呈兰绿色代表菌:产黄青霉菌落呈兰绿色,表面有明显的放射状沟纹,主要用于生产青霉素,也

66、可生产蛋白酶、脂肪酶。 桔青霉(绒状、艾绿色、可生产核苷酸)六、毛癣菌属半知菌亚门,可引起人的皮肤、毛发、指甲感染,引起体癣、股癣、足癣、手癣、甲癣等。湖南省医药学校 微生物学教案41第三节第三节真菌与人类疾病真菌与人类疾病一、浅部真菌病皮肤癣菌或皮肤丝状菌感染机体、皮肤、毛发、指甲等。习称长癣。引起皮肤癣菌病的真菌一般包括三个属:毛癣菌属、表皮癣属、小孢子菌属。二、深部真菌病1新型隐球菌引起急性或慢性脑膜炎或肺部炎症、多由呼吸道感染。2、白色念珠菌,可引起鹅口疮。真菌对常用抗生素如青霉素、链霉素、磺胺类药物不敏感,灰黄霉素、二性霉素 B、制霉菌素对一些真菌有抑制作用。三、真菌毒素黄曲霉毒素引起肝脏中毒,肝组织坏死,肝硬化,甚至肝癌。卫生部规定在婴儿食品和药品中不得检出黄曲霉毒素。为预防真菌毒素中毒,必须加强对粮食,如花生、谷物、豆类等的保管,防止霉变,对已霉变的食物,不得食用。湖南省医药学校 微生物学教案42第第五五章章 病病毒毒及及其其他他微微生生物物第第一一节节 病病毒毒病毒是一类个体微小、结构简单、必须在活的专性细胞内才能生长增殖的非细胞型微生物。病毒在自然界分布广泛,可寄生于

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