生化基础知识

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1、2021-11-151生化基础知识生化基础知识上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司 张张 浩浩上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-152生物化学生物化学( (Biochemistry)Biochemistry) 是生命的化学是生命的化学, ,在在分子水平探讨生命的分子水平探讨生命的本质本质。生物化学的主要任务是阐述活。生物化学的主要任务是阐述活细胞内及细胞间的化学反应及其与生细胞内及细胞间的化学反应及其与生命活动的关系。命活动的关系。 1 1、研究生物分子的结构及功能研究生物分子的结构及功能。 包括蛋白质、核酸、脂类及糖等。包括蛋白质、核酸、脂类

2、及糖等。 2 2、新陈代谢及其调节新陈代谢及其调节。 3 3、遗传信息的贮存、传递、表达及调遗传信息的贮存、传递、表达及调控控（分子生物学）。（分子生物学）。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-153结合生产需要结合生产需要 1.蛋白质化学蛋白质化学 2.酶学概论酶学概论 3.血液生化血液生化2021-11-154第一部分第一部分 蛋白质化学蛋白质化学上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-155 蛋白质蛋白质 是是由由许多不同的许多不同的-氨基酸氨基酸按按一定的序列一定的序列通过通过酰胺键（酰胺键（肽肽键键）缩合而成缩合而成

3、的。的。 具有较稳定的构象并具有一具有较稳定的构象并具有一定生物功能的大分子定生物功能的大分子。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-156一、蛋白质的生物学意义一、蛋白质的生物学意义 1. 生物体的组成成分生物体的组成成分 2. 酶酶 3. 运输运输 4. 运动运动 5. 抗体抗体 6. 干扰素干扰素 7. 遗传信息的控制遗传信息的控制 8. 细胞膜的通透性细胞膜的通透性 9. 高等动物的记忆、识别机构高等动物的记忆、识别机构上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-157二、蛋白质的元素组成二、蛋白质的元素组成 C（5055%

4、）、）、H（68%）、）、O（2023%）、）、 N（1518%）、）、 S（04%）、）、 N的含量平均为的含量平均为16% 是凯氏定氮法的理论基础是凯氏定氮法的理论基础上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-158三、蛋白质的氨基酸组成三、蛋白质的氨基酸组成 氨基酸是蛋白质的基本组成单位氨基酸是蛋白质的基本组成单位。 从细菌到人类，从细菌到人类，所有蛋白质所有蛋白质都由都由20种标准氨基酸种标准氨基酸（20 standard amino acids)组成。组成。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-159 （一）氨基酸的结构

5、通式（一）氨基酸的结构通式 除脯氨酸外除脯氨酸外， 其它所有氨基酸其它所有氨基酸在结构上都有一个共同的在结构上都有一个共同的特点，即在与羧基相连的特点，即在与羧基相连的-碳原子上含有碳原子上含有一个氨基。从这个结构通式可以看出，氨基一个氨基。从这个结构通式可以看出，氨基酸的差别就表现在侧链酸的差别就表现在侧链R R基团上。基团上。 Pro具有二级氨基（具有二级氨基（-亚氨基酸）亚氨基酸）上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1510 氨基酸的构型：氨基酸的构型： 氨基酸的构型是以氨基酸的构型是以D-D-、L-L-甘油醛甘油醛为标准确定的。为标准确定的。 除甘氨

6、酸外，除甘氨酸外， 其他所有其他所有-氨基酸都是氨基酸都是L-L-型的。型的。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1511 C如是不对称如是不对称C（除（除Gly），则：），则： 具有两种立体异构体具有两种立体异构体 D-型和型和L-型型 具有旋光性具有旋光性 左旋（左旋（-）或右旋（）或右旋（+）不带电形式 H2NCHCOOHR +H3NCHCOO-R两性离子形式上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1512 （二）氨基酸的分类（二）氨基酸的分类根据根据側链側链R R基基的极性的极性,2020种氨基酸可分成种氨基酸可分成4

7、 4类类（1）极性氨基酸：）极性氨基酸：1）不带电：）不带电：Ser、Thr、Asn、Gln、Tyr、Cys 2）带正电：）带正电：His、Lys、Arg 3）带负电：）带负电：Asp、Glu（2）非极性氨基酸：）非极性氨基酸：Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Met、Pro、Trp上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1513 甘氨酸甘氨酸( (Glycine,GlyGlycine,Gly,G),G), 丙氨酸丙氨酸( (AlanineAlanine,Ala,A),Ala,A), 缬氨酸缬氨酸( (ValineValine,Val,V),Val

8、,V), 亮氨酸亮氨酸( (Leucine,LeuLeucine,Leu, L), L), 异亮氨酸异亮氨酸( (Isoleucine,IleIsoleucine,Ile,I),I), 脯氨酸脯氨酸( (ProlineProline,Pro,P),Pro,P), 苯丙氨酸苯丙氨酸( (Phenylalanine,PhePhenylalanine,Phe,F),F), 色氨酸色氨酸( (Tryptophan,TrpTryptophan,Trp,W),W), 甲硫氨酸甲硫氨酸( (MethionineMethionine,Met,M),Met,M) 1. 1. 非极性非极性R R基氨基酸（共基氨基

9、酸（共9 9种）：种）：上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1514 2.2.无电荷的极性无电荷的极性R R基氨基酸（共基氨基酸（共6 6种）种）： 丝氨酸丝氨酸( (Serine,Ser,S),Serine,Ser,S), 苏氨酸苏氨酸( (Threonine,ThrThreonine,Thr,T),T), 酪氨酸酪氨酸( (Tyrosine,TyrTyrosine,Tyr,Y),Y), 半胱氨酸半胱氨酸( (Cysteine,CysCysteine,Cys,C),C), 天冬酰胺天冬酰胺( (Asparagine,AsnAsparagine,Asn,N)

10、,N), 谷氨酰胺谷氨酰胺( (Glutamine,GlnGlutamine,Gln,Q),Q)上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1515 3.3.带正电荷的极性带正电荷的极性R R基氨基酸（共基氨基酸（共3 3种）：种）： 赖氨酸赖氨酸( (Lysine,LysLysine,Lys,K),K), 精氨酸精氨酸( (Arginine,ArgArginine,Arg,R),R), 组氨酸组氨酸( (HistidineHistidine,His,H),His,H) 4.4.带负电荷的极性带负电荷的极性R R基氨基酸（共基氨基酸（共2 2种）：种）： 天冬氨酸天

11、冬氨酸( (AsparticAspartic acid,Asp,D), acid,Asp,D), 谷氨酸谷氨酸( (Glutamic acid,GluGlutamic acid,Glu,E),E)上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1516 根据根据R的化学结构的化学结构 （1）脂肪族氨基酸：）脂肪族氨基酸： 1）疏水性）疏水性：Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Met、Cys； 2）极性：）极性：Arg、Lys、Asp、Glu、Asn、Gln、Ser、Thr （2）芳香族氨基酸：）芳香族氨基酸：Phe、Tyr （3）杂环氨基酸：）杂环氨基酸：Trp、

12、His （4）杂环亚氨基酸：）杂环亚氨基酸：Pro上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1517 紫外吸收特性紫外吸收特性 酪氨酸酪氨酸和和色氨酸色氨酸在在280nm处处具紫外具紫外吸收特性吸收特性，蛋白质通常含有这样的蛋白质通常含有这样的氨基酸。氨基酸。 故可以在故可以在280nm处处测定蛋白质的含测定蛋白质的含量量。 上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1518 （三）氨基酸的重要理化性质（三）氨基酸的重要理化性质 1、一般物理性质、一般物理性质 无色晶体，熔点极高（无色晶体，熔点极高（200以上），不以上），不同味道；

13、水中溶解度差别较大（极性和非同味道；水中溶解度差别较大（极性和非极性），不溶于有机溶剂。极性），不溶于有机溶剂。 2、两性解离和等电点、两性解离和等电点 氨基酸在水溶液中或在晶体状态时都以离氨基酸在水溶液中或在晶体状态时都以离子形式存在，在同一个氨基酸分子上带有子形式存在，在同一个氨基酸分子上带有能放出质子的能放出质子的NH3+正离子和能接受质正离子和能接受质子的子的COO-负离子，为两性电解质。负离子，为两性电解质。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1519氨基酸在不同的氨基酸在不同的pHpH条件下可解离成带不同的电荷条件下可解离成带不同的电荷 COOC

14、OOH H COO COO- - COO COO- - | | H H | | H H | | H H3 3NCH NCH H H3 3NCH HNCH H2 2NCHNCH | -H | -H | +H| +H | | H H H H H H 酸性状态酸性状态( (pHpI) ) 两性离子状态两性离子状态( (pH=pI) ) 碱性状态碱性状态( (pHpI) )调节氨基酸溶液的调节氨基酸溶液的pH，使氨基酸分子上的，使氨基酸分子上的+NH3基和基和COO-基的解离程度完全相等时，基的解离程度完全相等时，即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液的即所带净电荷为零，此时氨基酸所处溶液的pH值称为该

15、氨基酸的值称为该氨基酸的等电点等电点（pI）。）。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1520 3.化学性质化学性质 (略略) （1）与茚三酮的反应）与茚三酮的反应 （2）与甲醛的反应）与甲醛的反应 （3）与）与2,4-二硝基氟苯二硝基氟苯(DNFB)的反应的反应 （4）与异硫氰酸苯酯（）与异硫氰酸苯酯（PITC）的反应）的反应 （5）与荧光胺反应）与荧光胺反应 （6）与）与5,5-双硫基双硫基-双（双（2-硝基苯甲酸）反硝基苯甲酸）反应应上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1521四、肽四、肽 蛋白质是由单一肽链或多条肽

16、链构蛋白质是由单一肽链或多条肽链构成的大分子成的大分子。 这些多肽链在长度上一般超过这些多肽链在长度上一般超过4040个个以上的氨基酸残基，最大者甚至超以上的氨基酸残基，最大者甚至超过过40004000个氨基酸残基。个氨基酸残基。 若按氨基酸残基平均分子量若按氨基酸残基平均分子量110110计，计，则则蛋白质分子量范围蛋白质分子量范围大约是大约是4 000-4 000-440 000 440 000 DaDa( (4-440 kD4-440 kD) )。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1522 1 1肽、肽链和肽肽、肽链和肽键键 氨基酸与氨基酸之间可以通

17、过氨基酸与氨基酸之间可以通过-氨基和氨基和-羧基羧基形成的酰胺键共价地结合在一起形成的酰胺键共价地结合在一起, ,这样形成的产这样形成的产物叫做物叫做肽（肽（PeptidePeptide）。 在蛋白质化学中，这种酰胺键称为在蛋白质化学中，这种酰胺键称为肽键肽键 （Peptide bondPeptide bond）。）。 由氨基酸借肽键所形成的一条线性的链状分子就由氨基酸借肽键所形成的一条线性的链状分子就叫做叫做肽链肽链( (peptide chain)peptide chain) 。 在肽链结构中在肽链结构中, ,每个的氨基酸不再是完整的，因每个的氨基酸不再是完整的，因此叫做此叫做氨基酸残基（

18、氨基酸残基（residueresidue）。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1523 2.肽的性质肽的性质 1肽键可被水解肽键可被水解 2肽的解离性质肽的解离性质 肽是一类多聚两性电解质，随环境肽是一类多聚两性电解质，随环境pH的变化，可以电离成带正电荷、负电荷的变化，可以电离成带正电荷、负电荷或者净电荷为零等不同的状态。或者净电荷为零等不同的状态。 每一种多肽都有它的等电点，可通过酸每一种多肽都有它的等电点，可通过酸碱滴定曲线来确定。等电点的差别反映碱滴定曲线来确定。等电点的差别反映出它们的氨基酸组成不同和侧链可电离出它们的氨基酸组成不同和侧链可电离基

19、团的种类和性质的差别。基团的种类和性质的差别。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1524 3.生物活性肽生物活性肽 几乎所有生物体内部都存在多种非蛋几乎所有生物体内部都存在多种非蛋白质肽。白质肽。这类物质都有相应的生物活这类物质都有相应的生物活性，尽管人们并不完全清楚它们的功性，尽管人们并不完全清楚它们的功能。通常我们把这些肽类统称为能。通常我们把这些肽类统称为生物生物活性肽活性肽。 生物活性肽在组成、结构和大小方面生物活性肽在组成、结构和大小方面存在很大的差异。有的呈环形，有的存在很大的差异。有的呈环形，有的有分支，有的还含有有分支，有的还含有D-氨基酸

20、和氨基氨基酸和氨基酸类似物。酸类似物。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1525 谷光甘肽（谷光甘肽（GSH） 催产素和升压素催产素和升压素 促肾上腺皮质激素（促肾上腺皮质激素（ACTH） 脑肽脑肽 胆囊收缩素胆囊收缩素 胰高血糖素胰高血糖素上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1526五、五、 蛋白质的结构蛋白质的结构 蛋白质是氨基酸以肽键相互连接的线性序列。蛋白质是氨基酸以肽键相互连接的线性序列。 在蛋白质中，多肽链折叠形成特殊的形状（构在蛋白质中，多肽链折叠形成特殊的形状（构象）（象）（conformation）。在

21、结构中，这种构象）。在结构中，这种构象是原子的三维排列，由氨基酸序列决定。是原子的三维排列，由氨基酸序列决定。 蛋白质有蛋白质有四种结构四种结构层次：层次： 一级结构（一级结构（primary） 二级结构（二级结构（secondary） 三级结构（三级结构（tertiary） 四级结构（四级结构（quaternary）（不总是有）（不总是有）。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1527（一）蛋白质的一级结构（化学结构）（一）蛋白质的一级结构（化学结构） 一级结构就是蛋白质分子中氨基酸残基的排一级结构就是蛋白质分子中氨基酸残基的排列顺序，即列顺序，即氨基酸的

22、线性序列氨基酸的线性序列。 在基因编码的蛋白质中，这种序列是由在基因编码的蛋白质中，这种序列是由mRNA中的核苷酸序列决定的。中的核苷酸序列决定的。 一级结构中包含的一级结构中包含的共价键共价键（covalent bonds）主要指主要指肽键（肽键（peptide bond）和二硫键（）和二硫键（disulfide bond）上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1528HPhe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His- Leu-Val- Glu- Ala- Leu- Tyr Leu -Val-Cys-GlyGlu-Arg-Gl

23、y-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-AlaOHB链157101519 20212530HGly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln-Leu-Glu-Asn-Tyr-Cys-AsnOH15102015A链711621SSSS牛胰岛素的化学结构牛胰岛素的化学结构SS上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1529（二）蛋白质的空间结构（构象、高级结构）（二）蛋白质的空间结构（构象、高级结构） 蛋白质空间构象蛋白质空间构象 是指蛋白质多肽链是指蛋白质多肽链主链在空间上的走向及所

24、有原子和基主链在空间上的走向及所有原子和基团在空间中的排列与分布。团在空间中的排列与分布。 蛋白质的空间结构包括蛋白质的空间结构包括: : 二级结构二级结构 三级结构三级结构 四级结构。四级结构。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15301. 蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构 指蛋白质多肽链本身的折叠和盘绕方式指蛋白质多肽链本身的折叠和盘绕方式 （1）-螺旋（螺旋（-helix） （2）-折叠结构（折叠结构（-pleated sheet） （3）-转角（转角（-turn） （4）自由回转）自由回转上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 20

25、21-11-1531（1）-螺旋（螺旋（-helix）C(NHCCO)3 NOHHR3.613 (ns)RRRRRRRRR螺旋的横截面上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1532（2）-折叠结构（折叠结构（-pleated sheet）CCCCCCRRRRRRNNCNNCCC平行反平行上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1533（3）-转角（转角（-turn）N1CHCC2CHNHO=C3CHNC4CHNRRHOHRROHO上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1534（4）自由回转）自由

26、回转没有一定规律的松散肽链结构。酶的活性部位。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15352. 超二级结构和结构域超二级结构和结构域 超二级结构超二级结构是指若干相邻的二级结构中的构是指若干相邻的二级结构中的构象单元彼此相互作用，形成有规则的，在空象单元彼此相互作用，形成有规则的，在空间上能辨认的二级结构组合体。间上能辨认的二级结构组合体。是蛋白质二是蛋白质二级结构至三级结构层次的一种过渡态构象层级结构至三级结构层次的一种过渡态构象层次。次。 结构域结构域是球状蛋白质的折叠单位。多肽链在是球状蛋白质的折叠单位。多肽链在超二级结构的基础上进一步绕曲折叠成紧密超

27、二级结构的基础上进一步绕曲折叠成紧密的近似球行的结构，具有部分生物功能。对的近似球行的结构，具有部分生物功能。对于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由于较大的蛋白质分子或亚基，多肽链往往由两个以上结构域缔合而成三级结构。两个以上结构域缔合而成三级结构。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15363. 蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构 指多肽链上的所有原子（包括主指多肽链上的所有原子（包括主链和侧链）在三维空间的分布。链和侧链）在三维空间的分布。 肌红蛋白肌红蛋白上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15374. 蛋白质的四级

28、结构蛋白质的四级结构 多肽亚基（多肽亚基（subunit）的空间排布和）的空间排布和相互作用。亚基间以非共价键连接。相互作用。亚基间以非共价键连接。 血红蛋白血红蛋白上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1538化学键化学键（三）蛋白质分子中的共价键与次级键（三）蛋白质分子中的共价键与次级键 肽键肽键共价键共价键次级键次级键一级结构一级结构氢键氢键二硫键二硫键二、三、四级结构二、三、四级结构疏水键疏水键盐键盐键范德华力范德华力三、四级结构三、四级结构 -是蛋白质空间构象稳定的因素是蛋白质空间构象稳定的因素上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. .

29、2021-11-1539六、蛋白质分子结构与功能的关系六、蛋白质分子结构与功能的关系 （一）蛋白质一级结构与功能的关系（一）蛋白质一级结构与功能的关系 1. 种属差异种属差异 蛋白质一级结构的种属差异十分明显，但相蛋白质一级结构的种属差异十分明显，但相同部分氨基酸对蛋白质的功能起决定作用。同部分氨基酸对蛋白质的功能起决定作用。根据蛋白质结构上的差异，可以断定它们在根据蛋白质结构上的差异，可以断定它们在亲缘关系上的远近。亲缘关系上的远近。 2.分子病分子病 蛋白质分子一级结构的氨基酸排列顺序与正蛋白质分子一级结构的氨基酸排列顺序与正常有所不同的遗传病。常有所不同的遗传病。2021-11-1540

30、-链 1 2 3 4 5 6 7Hb-A Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-LysHb-S Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Lys含氧-HbA Val 取代GluO2O2粘性疏水斑点含氧HbS脱氧HbS疏水位点血红蛋白分子凝集镰状细胞贫血（镰状细胞贫血（sick-cell anemia）从患者红细胞中鉴定出特异的镰刀型或月牙型细胞。从患者红细胞中鉴定出特异的镰刀型或月牙型细胞。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1541（二）蛋白质构象与功能的关系（二）蛋白质构象与功能的关系 别（变）构作用：含亚基的蛋白质由于一个别（变）构作用

31、：含亚基的蛋白质由于一个亚基的构象改变而引起其余亚基和整个分子亚基的构象改变而引起其余亚基和整个分子构象、性质和功能发生改变的作用。因别构构象、性质和功能发生改变的作用。因别构而产生的效应称而产生的效应称别构效应别构效应。 血红蛋白是别构蛋白，血红蛋白是别构蛋白，O2结合到一个亚基上结合到一个亚基上以后，影响与其它亚基的相互作用。以后，影响与其它亚基的相互作用。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1542七、蛋白质的性质七、蛋白质的性质上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1543（一）蛋白质的相对分子量（一）蛋白质的相对分

32、子量 蛋白质相对分子量在蛋白质相对分子量在10 0001 000 000之间之间。测定分。测定分子量的主要方法有渗透压法、子量的主要方法有渗透压法、超离心法超离心法、凝胶过滤法、凝胶过滤法、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。 最准确可靠的方法是最准确可靠的方法是超离心法超离心法（Svedberg于于1940年设年设计）：蛋白质颗粒在计）：蛋白质颗粒在2550*104 g离心力作用下从溶液离心力作用下从溶液中沉降下来。中沉降下来。 沉降系数（沉降系数（s）：单位（：单位（cm）离心场里的沉降速度。）离心场里的沉降速度。 沉降系数的单位常用沉降系数的单位常用S，1S=110-13（s）

33、 s = v2x v =沉降速度（沉降速度（dx/dt）=离心机转子角速度（弧度离心机转子角速度（弧度/s） x =蛋白质界面中点与转子中心的距离（蛋白质界面中点与转子中心的距离（cm）上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1544 蛋白质分子量（蛋白质分子量（M）与沉降系数（）与沉降系数（s）的关系）的关系R气体常数（气体常数（8.314107ergsmol -1 度度-1）T绝对温度绝对温度D扩散常数（蛋白质分子量很大，离心机转速很快，则扩散常数（蛋白质分子量很大，离心机转速很快，则忽略不计）忽略不计）V蛋白质的微分比容（蛋白质的微分比容（m3g-1）溶剂

34、密度（溶剂密度（20，gml-1） s沉降系数沉降系数M = RTsD（1V）上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1545（二）蛋白质的两性电离及等电点（二）蛋白质的两性电离及等电点 蛋白质在其等电点蛋白质在其等电点偏酸偏酸溶液中带正电荷，溶液中带正电荷，在在偏碱偏碱溶液中带负电荷，在溶液中带负电荷，在等电点等电点pH时为时为两性离子。两性离子。 电泳：带电颗粒在电场中移动的现象。分电泳：带电颗粒在电场中移动的现象。分子大小不同的蛋白质所带净电荷密度不同子大小不同的蛋白质所带净电荷密度不同，迁移率即异，在电泳时可以分开。，迁移率即异，在电泳时可以分开。上上海

35、海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1546 1. 自由界面电泳自由界面电泳：蛋白质溶于缓冲液：蛋白质溶于缓冲液中进行电泳。中进行电泳。 2. 区带电泳区带电泳：将蛋白质溶液点在浸了：将蛋白质溶液点在浸了缓冲液的支持物上进行电泳，不同组缓冲液的支持物上进行电泳，不同组分形成带状区域。分形成带状区域。 （1）纸上电泳：用滤纸作支持物。）纸上电泳：用滤纸作支持物。 （2）凝胶电泳凝胶电泳：用凝胶（淀粉、琼脂：用凝胶（淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺）作支持物。糖、聚丙烯酰胺）作支持物。 -+ 平板电泳：铺有凝胶的玻板上进行的电泳平板电泳：铺有凝胶的玻板上进行的电泳。圆圆盘盘电

36、电泳泳：玻玻璃璃管管中中进进的的凝凝胶胶电电泳泳。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15473.等电聚焦电泳：等电聚焦电泳：当蛋白质在其等电点时，净电荷为零，当蛋白质在其等电点时，净电荷为零，在电场中不再移动。在电场中不再移动。+5.06.07.0稳定pH梯度5.06.07.0稳定pH梯度通电+上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1548（三）蛋白质的胶体性质（三）蛋白质的胶体性质 布郎运动、丁道尔现象、电泳现象，布郎运动、丁道尔现象、电泳现象，不能透过半透膜，具有吸附能力。不能透过半透膜，具有吸附能力。 蛋白质溶液稳定

37、的原因：蛋白质溶液稳定的原因： 1）表面形成水膜（水化层）；）表面形成水膜（水化层）； 2）带相同电荷。）带相同电荷。 +上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1549（四）蛋白质的沉淀反应（四）蛋白质的沉淀反应 1. 加高浓度盐类（盐析）：加高浓度盐类（盐析）：加盐使蛋白质沉淀析加盐使蛋白质沉淀析出。出。 分段盐析：调节盐浓度，可使混合蛋白质溶分段盐析：调节盐浓度，可使混合蛋白质溶液中的几种蛋白质分段析出。液中的几种蛋白质分段析出。 血清球蛋白（血清球蛋白（50%(NH4)2SO4饱和度），清蛋白饱和度），清蛋白（饱和（饱和(NH4)2SO4)。 2. 加有

38、机溶剂加有机溶剂 3. 加重金属盐加重金属盐 4. 加生物碱试剂加生物碱试剂单宁酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸能沉淀单宁酸、苦味酸、钼酸、钨酸、三氯乙酸能沉淀生物碱，称生物碱试剂。生物碱，称生物碱试剂。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1550（五）蛋白质的变性（五）蛋白质的变性 天然蛋白质受物理或化学因素的影响，其共价键天然蛋白质受物理或化学因素的影响，其共价键不变，但分子内部原有的高度规律性的空间排列不变，但分子内部原有的高度规律性的空间排列发生变化，致使其原有性质发生部分或全部丧失发生变化，致使其原有性质发生部分或全部丧失，称为，称为蛋白质的变性蛋

39、白质的变性。 蛋白质的蛋白质的变性只破坏变性只破坏其空间结构而不破坏它的一级结构其空间结构而不破坏它的一级结构。 变性蛋白质主要标志变性蛋白质主要标志是生物学功能的丧失是生物学功能的丧失。溶解。溶解度降低，易形成沉淀析出，结晶能力丧失，分子度降低，易形成沉淀析出，结晶能力丧失，分子形状改变，肽链松散，反应基团增加，易被酶消形状改变，肽链松散，反应基团增加，易被酶消化。化。 变性蛋白质分子互相凝集为固体的现象称变性蛋白质分子互相凝集为固体的现象称凝固凝固。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1551（六）蛋白质的颜色反应（六）蛋白质的颜色反应 见后页见后页上上

40、海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1552反应名称反应名称试试 剂剂颜色颜色反应有关基团反应有关基团有 此 反 应有 此 反 应的 蛋 白 质的 蛋 白 质或氨基酸或氨基酸双缩脲反应NaOH、CuSO2紫色或粉红色二个以上肽键所 有 蛋 白质米伦反应H g N O3、H g ( N O3)2及HNO3混合物红色 Tyr黄色反应浓HNO3及NH3黄色、橘色 Tyr、Phe乙醛酸反应(Hopking-Cole反应)乙醛酸试剂及浓H2SO4紫色 Trp坂口反应(Sakaguchi反应)-萘酚、NaClO红色胍基Arg酚试剂反应(Folin-Cioculteu反应)碱

41、性CuSO4及磷钨酸-钼酸蓝色酚基、吲哚基Tyr茚三酮反应茚三酮蓝色自由氨基及羧基-氨基酸 OH上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1553蛋白质的其他反应蛋白质的其他反应 成盐反应成盐反应 酰基化和烃基化反应酰基化和烃基化反应 成酯反应成酯反应 酰氯化反应酰氯化反应 成酰胺反应成酰胺反应 脱羧反应脱羧反应 迭氮反应迭氮反应上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1554八、蛋白质的分离纯化八、蛋白质的分离纯化 蛋白质的分离纯化是对蛋白质进行研究的蛋白质的分离纯化是对蛋白质进行研究的一项必需的和基础的工作。一项必需的和基础的工

42、作。 目前常使用的分离纯化的方法或技术都是目前常使用的分离纯化的方法或技术都是在在了解了解蛋白质性质和结构特点的基础上蛋白质性质和结构特点的基础上建建立的。立的。 目标蛋白质的分离决不是一件轻而易举的目标蛋白质的分离决不是一件轻而易举的事情，因为要把它与性质、大小和结构十事情，因为要把它与性质、大小和结构十分相似的其他蛋白质分离开来存在许多困分相似的其他蛋白质分离开来存在许多困难。有些目标蛋白质在组织细胞内的含量难。有些目标蛋白质在组织细胞内的含量很低，这无疑将增加获取足量蛋白质的难很低，这无疑将增加获取足量蛋白质的难度。度。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-1

43、1-1555目标蛋白质的分离纯化程序目标蛋白质的分离纯化程序 材料的选择；材料的选择； 组织匀浆和破碎细胞获取粗提取液；组织匀浆和破碎细胞获取粗提取液； 蛋白质初步提纯；蛋白质初步提纯； 选择一种或几种合适的方法除去杂蛋白选择一种或几种合适的方法除去杂蛋白, ,直至完直至完全纯化；全纯化； 目标蛋白的鉴定。目标蛋白的鉴定。 用于研究目的用于研究目的蛋白质蛋白质通常通常应保持应保持它的它的生物活性生物活性。因此，在目标蛋白质的整个分离纯化过程中要在因此，在目标蛋白质的整个分离纯化过程中要在较低温度下较低温度下(0(04)4)操作，注意使用蛋白酶操作，注意使用蛋白酶( (使蛋使蛋白质降解的酶白质降

44、解的酶) )的抑制剂，避免使用剧烈条件，以的抑制剂，避免使用剧烈条件，以免蛋白质特定的折叠结构受到破坏免蛋白质特定的折叠结构受到破坏上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1556 1、根据蛋白质是两性电解质分离、根据蛋白质是两性电解质分离1. 1. 蛋白质的电泳分离蛋白质的电泳分离 凝胶电泳是目前常用的一种生化方法。用于蛋白质分离的凝胶凝胶电泳是目前常用的一种生化方法。用于蛋白质分离的凝胶主要是聚丙烯酰胺凝胶，该凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂甲主要是聚丙烯酰胺凝胶，该凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂甲叉双丙烯酰胺配制而成，其最大的特点是凝胶的孔径可根据需叉双丙烯酰胺

45、配制而成，其最大的特点是凝胶的孔径可根据需要进行选择。以聚丙烯酰胺凝胶为支持物，可进行非变性电泳要进行选择。以聚丙烯酰胺凝胶为支持物，可进行非变性电泳和变性电泳。和变性电泳。非变性电泳：非变性电泳：蛋白质样品未进行变性处理，凝胶中没加入变性剂，蛋白质样品未进行变性处理，凝胶中没加入变性剂，通过电泳分离的蛋白质仍具有生物活性。通过电泳分离的蛋白质仍具有生物活性。变性电泳：变性电泳：SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳( (SDS-PAGE) SDS-PAGE) 。SDSSDS是一种带负是一种带负电荷的阴离子去垢剂，它能使蛋白质变性、肽链伸展，并吸附电荷的阴离子去垢剂，它能使蛋白质

46、变性、肽链伸展，并吸附在伸展的肽链上，吸附的量与链长成比例。常用来测定蛋白质在伸展的肽链上，吸附的量与链长成比例。常用来测定蛋白质亚基的大小和鉴定蛋白质的纯度亚基的大小和鉴定蛋白质的纯度。等电聚焦：等电聚焦：是在聚丙烯酰胺凝胶电泳的基础上发展起来的一种用于是在聚丙烯酰胺凝胶电泳的基础上发展起来的一种用于检测蛋白质的方法，它与检测蛋白质的方法，它与SDS-PAGESDS-PAGE结合构成的双向电泳技术可结合构成的双向电泳技术可用于确定蛋白质的亚基组成及电荷异构体的分析。用于确定蛋白质的亚基组成及电荷异构体的分析。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1557 电

47、泳后的蛋白质检测电泳后的蛋白质检测考马斯亮蓝染色考马斯亮蓝染色是常用的一项电泳染色方法是常用的一项电泳染色方法, ,是根据考马斯亮蓝能与是根据考马斯亮蓝能与蛋白质多肽链定量结合的原理而建立起的。对于一个混合蛋白质的蛋白质多肽链定量结合的原理而建立起的。对于一个混合蛋白质的电泳分离来说电泳分离来说, ,它只能检测样品的分离情况；如果被检蛋白质的位置它只能检测样品的分离情况；如果被检蛋白质的位置可以确定可以确定, ,可以将该蛋白质的色带切下之后进行脱色可以将该蛋白质的色带切下之后进行脱色, ,测定脱色液光测定脱色液光吸收值吸收值, ,能对该蛋白质进行定量分析。能对该蛋白质进行定量分析。活性染色活性

48、染色是根据有活性的目标蛋白质特有的生物化学反应产生的有是根据有活性的目标蛋白质特有的生物化学反应产生的有色物质或另外加入某种能与产物生成颜色的物质来进行检测的色物质或另外加入某种能与产物生成颜色的物质来进行检测的. .活性活性染色可以从一个复杂的蛋白质样品中检测到目标蛋白出现的位置。染色可以从一个复杂的蛋白质样品中检测到目标蛋白出现的位置。免疫印迹免疫印迹或或蛋白质印迹蛋白质印迹是检测目标蛋白质的一项十分有效的方法。是检测目标蛋白质的一项十分有效的方法。一种蛋白质一种蛋白质( (抗原抗原) )能与它产生的抗体专一地反应。在电泳之后能与它产生的抗体专一地反应。在电泳之后, ,欲检欲检测目标蛋白的

49、存在测目标蛋白的存在, ,可以先将凝胶中的蛋白质电转移到硝酸纤维素膜可以先将凝胶中的蛋白质电转移到硝酸纤维素膜上上, ,然后用目标蛋白产生的抗体与之产生抗原然后用目标蛋白产生的抗体与之产生抗原- -抗体反应抗体反应, ,最后可用连最后可用连接有碱性磷酸酯酶或辣根过氧化酶的第二抗体接有碱性磷酸酯酶或辣根过氧化酶的第二抗体( (通用抗体通用抗体) )与第一抗与第一抗体反应体反应, ,加入能与抗体共接的酶反应生成有色物质的生色液加入能与抗体共接的酶反应生成有色物质的生色液, ,即可十即可十分可靠地检到的目标蛋白分可靠地检到的目标蛋白上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-1

50、1-15582.2.蛋白质的离子交换柱层析分离蛋白质的离子交换柱层析分离用于蛋白质分离纯化的离子交换剂多为纤维素离子交换剂。用于蛋白质分离纯化的离子交换剂多为纤维素离子交换剂。蛋白质样品同离子交换纤维素的结合力取决于彼此相反电荷蛋白质样品同离子交换纤维素的结合力取决于彼此相反电荷基团的静电吸引，这与溶液的基团的静电吸引，这与溶液的pHpH有关，因有关，因pHpH决定离子交换剂决定离子交换剂与蛋白质的解离程度。盐类的存在可降低离子交换剂的离子与蛋白质的解离程度。盐类的存在可降低离子交换剂的离子基团和蛋白质相反电荷基团之间的静电吸引。故蛋白质混合基团和蛋白质相反电荷基团之间的静电吸引。故蛋白质混合

51、物的洗脱分离可由改变洗脱液中的盐类的离子强度和物的洗脱分离可由改变洗脱液中的盐类的离子强度和pHpH来完来完成。同离子交换剂结合力最小的蛋白质首先从层析柱上洗脱成。同离子交换剂结合力最小的蛋白质首先从层析柱上洗脱下来。下来。弱酸性的阳离子交换剂一般适合于分离弱酸性的阳离子交换剂一般适合于分离pIpI7.07.0的蛋白质。的蛋白质。弱碱性的阴离子交换剂一般适合于分离弱碱性的阴离子交换剂一般适合于分离pIpI7.07.0的蛋白质。的蛋白质。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1559 2、根据蛋白质的胶体性质与盐析分离、根据蛋白质的胶体性质与盐析分离 蛋白质在水

52、中可形成一种稳定的亲水胶体。蛋白质在水中可形成一种稳定的亲水胶体。 盐溶现象：盐溶现象：在盐溶液很稀的范围内，随着盐浓度的在盐溶液很稀的范围内，随着盐浓度的增加，球状蛋白质的溶解度也随之增加，此现象称增加，球状蛋白质的溶解度也随之增加，此现象称作盐溶作盐溶( (salting-in) salting-in) 。任何物质的溶解度都取决。任何物质的溶解度都取决于溶质分子间的相对亲和力及溶质分子与溶剂分子于溶质分子间的相对亲和力及溶质分子与溶剂分子的相对亲和力。任何降低溶质分子相互作用的因素的相对亲和力。任何降低溶质分子相互作用的因素以及加强溶质分子与溶剂分子相互作用的因素都有以及加强溶质分子与溶剂

53、分子相互作用的因素都有助于增加溶解度。助于增加溶解度。 盐析现象：盐析现象：随着盐浓度的继续升高，例如，达到饱随着盐浓度的继续升高，例如，达到饱和和半饱和的程度，蛋白质的溶解度逐渐变小，彼和和半饱和的程度，蛋白质的溶解度逐渐变小，彼此之间相互凝聚而发生沉淀，此现象称作盐析此之间相互凝聚而发生沉淀，此现象称作盐析( (sattingsatting-out ) -out ) 。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1560 3、 蛋白质的沉降作用及超离心分离蛋白质的沉降作用及超离心分离 沉降速度沉降速度( ( = dx / dt = dx / dt ) )与蛋白质

54、分子的大小与蛋白质分子的大小和密度有关。和密度有关。 沉降速度法，沉降速度法，适用于分离沉降系数不同但密度适用于分离沉降系数不同但密度相近的蛋白质。相近的蛋白质。 沉降平衡法，沉降平衡法，适用于沉降系数相近，但密度不适用于沉降系数相近，但密度不同的蛋白质。同的蛋白质。 沉降系数：当沉降界面以恒定的速度移动时，沉降系数：当沉降界面以恒定的速度移动时，单位离心场里的沉降。单位离心场里的沉降。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1561 4、凝胶过滤、凝胶过滤 是指利用高度水化的，具有不同大小孔径是指利用高度水化的，具有不同大小孔径的网状结构的惰性多聚物颗粒作为层

55、析柱的网状结构的惰性多聚物颗粒作为层析柱的填充物，把分子大小不同的蛋白质混合的填充物，把分子大小不同的蛋白质混合物上样到柱层析上，混合物中的各组分随物上样到柱层析上，混合物中的各组分随着洗脱液的流动，按分子大小以不同的速着洗脱液的流动，按分子大小以不同的速度向下移动，从而把各组分分开。度向下移动，从而把各组分分开。 常用的有常用的有葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶( (sephadexsephadex) )或或琼脂糖琼脂糖凝胶凝胶( (sepharosesepharose) ) 作为层析柱的填充物。作为层析柱的填充物。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1562 5、蛋

56、白质的配体特异性与亲和层析、蛋白质的配体特异性与亲和层析 根据蛋白质的配体特异性，建立了一种非常有效的根据蛋白质的配体特异性，建立了一种非常有效的蛋白质分离方法蛋白质分离方法亲和层析法亲和层析法。 假如某蛋白质假如某蛋白质A A，在表现功能的过程中需要和，在表现功能的过程中需要和B B物质物质结合，且结合是特异的：结合，且结合是特异的：A + BA + B A AB B 假若用化学的方法先将假若用化学的方法先将B B物质与一种不溶性载体物质与一种不溶性载体( (R)R) 偶联，得到偶联，得到R-BR-B，偶联到，偶联到R R上的上的B B不丧失与不丧失与A A结合的能结合的能力的话，那麽，将含

57、有力的话，那麽，将含有A A的混合蛋白通过装有的混合蛋白通过装有R-BR-B的的层析柱时，层析柱时，A A将与将与B B结合结合, , 形成形成R RB BA A，不能与，不能与B B结结合的杂蛋白将从柱下流出合的杂蛋白将从柱下流出, , 然后用适当的洗脱液将然后用适当的洗脱液将A A洗脱下来洗脱下来上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1563根据蛋白质形状根据蛋白质形状球状蛋白球状蛋白纤维状蛋白纤维状蛋白九、蛋白质的分类九、蛋白质的分类上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1564根据根据 分子组成分子组成 简单蛋白（按简

58、单蛋白（按溶解度）溶解度） 结合蛋白结合蛋白（按辅基）（按辅基）清蛋白清蛋白球蛋白球蛋白谷蛋白谷蛋白醇溶蛋白醇溶蛋白精蛋白精蛋白组蛋白组蛋白硬蛋白硬蛋白核蛋白核蛋白糖蛋白与蛋白聚糖糖蛋白与蛋白聚糖脂蛋白脂蛋白色蛋白色蛋白磷蛋白磷蛋白2021-11-1565第二部分第二部分 酶学概论酶学概论上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1566一、酶的概念一、酶的概念 酶酶是生物细胞产生的、具有催化能力是生物细胞产生的、具有催化能力的蛋白质的蛋白质,也称生物催化剂。也称生物催化剂。 酶所催化的反应称酶所催化的反应称酶促反应酶促反应。 酶促反应中，被酶催化的对象称为酶促反

59、应中，被酶催化的对象称为底底物物，反应生成物称为，反应生成物称为产物产物。 酶所具有的催化能力称为酶所具有的催化能力称为酶活性酶活性。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1567 酶促反应特点酶促反应特点 酶具有一般催化剂的特征酶具有一般催化剂的特征： 1.只能进行热力学上允许进行的反应；只能进行热力学上允许进行的反应； 2.可以缩短化学反应到达平衡的时间，而不改变反可以缩短化学反应到达平衡的时间，而不改变反应的平衡点；应的平衡点； 3.通过降低活化能加快化学反应速度。通过降低活化能加快化学反应速度。 酶的催化特点酶的催化特点 1.1.高效性高效性：通常要高

60、出非生物催化剂催化活性的：通常要高出非生物催化剂催化活性的10106 610101313倍。倍。 2.2.专一性专一性：酶对底物具有严格的选择性。：酶对底物具有严格的选择性。 3.3.敏感性敏感性：对环境条件极为敏感。：对环境条件极为敏感。 4.4.可调性可调性：酶活性的调节和酶合成速度的调节。：酶活性的调节和酶合成速度的调节。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1568二、酶的分类与命名二、酶的分类与命名 1961年国际酶学委员会（年国际酶学委员会（Enzyme Committee, EC）根据）根据酶所催化的反应类型和机理，把酶分成酶所催化的反应类型和机

61、理，把酶分成6大类：大类： 1. 氧化还原酶类氧化还原酶类：主要是催化氢的转移或电子传递的氧：主要是催化氢的转移或电子传递的氧化还原反应。化还原反应。乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶 2. 转移酶类转移酶类：催化化合物中某些基团的转移。：催化化合物中某些基团的转移。转氨酶转氨酶 3. 水解酶类水解酶类：催化加水分解作用。：催化加水分解作用。蛋白水解酶蛋白水解酶 4. 裂解酶类：裂解酶类：催化非水解性地除去基团而形成双键的反催化非水解性地除去基团而形成双键的反应或逆反应。应或逆反应。醛缩酶醛缩酶 5. 异构酶异构酶：催化：催化 各种异构体之间的互变。各种异构体之间的互变。磷酸葡萄糖变位酶磷酸葡萄糖变位酶 6

62、. 合成酶类合成酶类：催化有：催化有ATP参加的合成反应。参加的合成反应。谷氨酰氨合成酶谷氨酰氨合成酶上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15691 .氧化还原酶类氧化还原酶类:主要是催化氢的转移或电子传递的氧化还原反应。主要是催化氢的转移或电子传递的氧化还原反应。（1）脱氢酶类）脱氢酶类：催化直接从底物上脱氢的反应。：催化直接从底物上脱氢的反应。 （2）氧化酶类）氧化酶类催化底物脱氢，氧化生成催化底物脱氢，氧化生成H2O2：催化底物脱氢，氧化生成催化底物脱氢，氧化生成H2O：AH2 + B（O2）A + BH2（H2O2，H2O）AH2 +BA +BH2（

63、需辅酶（需辅酶或辅酶或辅酶）AH2 + O2A + H2O2（需（需FAD或或FMN）2AH2 + O22A + 2H2O上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1570（3）过氧化物酶）过氧化物酶ROO + H2O2RO + H2O + O2（4）加氧酶（双加氧酶和单加氧酶）加氧酶（双加氧酶和单加氧酶）O2 +OHOHC=OC=OOHOH（顺，顺（顺，顺-已二烯二酸）已二烯二酸）RH + O2 + 还原型辅助因子还原型辅助因子ROH + H2O + 氧化型辅助因子氧化型辅助因子（又称（又称羟化酶羟化酶）上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2

64、021-11-15712. 转移酶类转移酶类：催化化合物中某些基团的转移。催化化合物中某些基团的转移。 根据根据X分成分成8个亚类：转移碳基、酮基或醛基个亚类：转移碳基、酮基或醛基、酰基、糖基、烃基、含氮基、含磷基和含、酰基、糖基、烃基、含氮基、含磷基和含硫基的酶。硫基的酶。AX + BA +BX上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15723. 水解酶类水解酶类：催化加水分解作用。催化加水分解作用。AB + H2OAOH + BH上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15734.裂解酶类：裂解酶类：催化非水解性地除去基团而形

65、催化非水解性地除去基团而形成双键的反应或逆反应。成双键的反应或逆反应。CH3C=OCOOHCC键键CH3C=OH+ CO2CO键键CH2COOHHOCHCOOHHCCOOHHOOCCH+ H2OCN键键COOHCHNH2CH2COOHCOOHCHHCCOOH上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15745. 异构酶异构酶：催化催化 各种异构体之间的互变。各种异构体之间的互变。 常见的有消旋和变旋、醛酮异构、顺反异构常见的有消旋和变旋、醛酮异构、顺反异构和变位酶类和变位酶类。AB上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-15756.

66、 合成酶类合成酶类：催化有催化有ATP参加的合成反应。参加的合成反应。A + B + ATPAB + ADP +Pi乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶 EC 1. 1. 1. 27第第1大类，氧化还原酶大类，氧化还原酶第第1亚类，氧化基团亚类，氧化基团CHOH第第1亚亚类，亚亚类，H受体为受体为NAD+该酶在亚亚类中的流水编号该酶在亚亚类中的流水编号上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1576酶的命名酶的命名 酶的命名有两种方法：酶的命名有两种方法：系统名系统名、惯用名惯用名。乳酸乳酸 + NAD+丙酮酸丙酮酸 + NADH + H+乳酸：乳酸：NAD+氧化还原酶氧化还原酶乳酸：乳酸：NAD+氧化还原酶氧化还原酶乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶对于催化水解反应的酶一般在酶的名称上省去反应类型。对于催化水解反应的酶一般在酶的名称上省去反应类型。惯用名惯用名：只取一个较重要的底物名称和反应类型。：只取一个较重要的底物名称和反应类型。系统名系统名：包括所有底物的名称和反应类型。：包括所有底物的名称和反应类型。上上海海赛赛伦伦生生物物技技术术有有限限公公司司. . 2021-11-1