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1、1、掌握稀释分离和平板划线获得微生、掌握稀释分离和平板划线获得微生物纯种的方法。物纯种的方法。2、学会微生物接种技术。、学会微生物接种技术。一、实验目的及要求一、实验目的及要求二、实二、实 验验 原理原理 从混杂微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的从混杂微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离纯化。平板分离法普遍适用于微生物过程称为微生物的分离纯化。平板分离法普遍适用于微生物的分离与纯化，其基本原理是选择适合于待分离微生物的生的分离与纯化，其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求，或加入某长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等
2、要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其它微生物生长种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。 本实验采用透明圈检验法检测培养物中是否有产淀粉酶微本实验采用透明圈检验法检测培养物中是否有产淀粉酶微生物的生长。生物的生长。三、实三、实 验验 器器 材材1、材、材 料：土壤、粮食或者食品。料：土壤、粮食或者食品。2、培养基：、培养基：PDA培养基、营养琼脂培养基。培养基、营养琼脂培养基。3、器、器 皿：三角瓶、移液管、试管、培养皿、皿：三角瓶、移液管、试管、培养皿、玻璃刮铲、酒精灯、接种环等。玻璃刮铲、
3、酒精灯、接种环等。4、仪器：电炉、恒温培养箱。、仪器：电炉、恒温培养箱。 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤1、微生物的纯种分离、微生物的纯种分离平板稀释分离法平板稀释分离法1、配制所需培养基，无菌水2、培养基、无菌水、玻璃器皿、无菌室的灭菌3、制作菌悬液（样品加至无菌水中震荡）4、菌悬液稀释5、将一定稀释度的菌悬液1ml加至平皿中6、加适量培养基至平皿中并与菌悬液混合7、适温培养8、挑取独立的菌落 225ml无菌无菌水加水加25g样品样品1ml1ml1ml试管中原始装试管中原始装9ml无菌水无菌水10-210-310-41ml四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤1、微生物的纯种分离、微生物
4、的纯种分离（1）稀释涂布分离法：制平板）稀释涂布分离法：制平板制菌悬液制菌悬液涂布涂布培养培养获得纯种微生物。获得纯种微生物。（2）平板划线法：制平板）平板划线法：制平板制菌悬液制菌悬液划划线线培养培养获得纯种微生物。获得纯种微生物。微生物纯种分离微生物纯种分离（一）涂布分离法（一）涂布分离法 微生物纯种分离微生物纯种分离（二）划线分离法（二）划线分离法 微生物纯种分离微生物纯种分离（三）定量稀释分离法（三）定量稀释分离法 四、实验方法和步骤四、实验方法和步骤2、微生物的接种、微生物的接种（1） 斜面接种斜面接种 五步曲：五步曲：a. 接种环灭菌接种环灭菌 b. 拔棉塞及试管口拔棉塞及试管口灭菌灭菌 c. 接种接种 d. 塞棉塞塞棉塞 e. 接种环灭菌接种环灭菌（2） 培养皿接种（霉菌形态观察及鉴定用）培养皿接种（霉菌形态观察及鉴定用） 倒平板倒平板 接种（单接种（单/三点接）三点接） 接种环灭菌。接种环灭菌。1、为什么用稀释法和平板划线法能获得微生、为什么用稀释法和平板划线法能获得微生物纯种？物纯种？2、霉菌平板接种为什么要使平板倒置？、霉菌平板接种为什么要使平板倒置？ 3、要求根据实验结果写一篇科技论文，字数、要求根据实验结果写一篇科技论文，字数在在2000字左右。字左右。 五、五、 作作 业业 题题
实验六产淀粉酶细菌的分离(二)微生物的分离培养和接种方法
