腹水脱落细胞学

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1、黄石爱康医院检验科 作业指导书腹水脱落细胞学8文件编号:LJ-SOP-012版本:B/0生效日期:2009-07-011 目的规范钾离子(K+)浓度检测试验,确保检测结果准确性和重复性。2 测定方法离子选择电极法3 测定原理基于能斯特(Nernst)方程:2.303RTlogxfxn F E=E0 + E=离子选择电极在测量溶液中的电位;E0=离子选择电极的标准电极电位;n=被测离子的电荷数;R=气体常数(8.314 / Kmol);T=绝对绝对温度(273+t0C);F=法拉第常数(9648C / mol);x=被测离子的活度;fx=被测离子的活度系数。上式表明,在一定条件下,原电池的电动势

2、与被测离子活度的对数呈线性关系,因此只要通过测量电池电动势,即可求得被测离子活度。4 标本5 试剂6 仪器7 上机操作8 参考范围9 性能指标10 患者检验结果可报告区间:注意事项腹水脱落细胞学仪器离心机、OLYMPUS 显微镜方法一. 将标本容器上部液体弃去,取底部沉淀标本分别注入支大试管内,每管约为ml,以25003000转分速度离心分钟,弃去上清液,将试管垂直颠倒,并且速度要快,除底部沉淀外留少许液体即可。二. 把底部沉淀混匀,用吸管吸出液体后滴在玻片上,用推片法制成厚薄均匀的涂片,要求张以上,自然干燥三. TCT液基薄层制片仪制片。试剂1. 瑞氏-姬姆萨染色液:取瑞氏染粉1g,姬姆萨染

3、粉0.5g,甘油10ml溶于500ml甲醇中,充分振摇使其溶解,配好的染液即可使用,但最好在半年内用完,超过1年染色效果将会逐渐变差。2 pH65磷酸盐缓冲液:磷酸二氢钾15g,磷酸氢二钠10g、加蒸馏水到5000ml。最后纠正pH65。3.刘氏快速染色也可材料 1. 5ml试管2. 推片、栽玻片。 操作 将标本容器上部液体弃去,取底部沉淀标本分别注入支大试管内,每管约为ml,以25003000转分速度离心分钟,弃去上清液,将试管垂直颠倒,并且速度要快,除底部沉淀外留少许液体即可。制片 把底部沉淀混匀,用吸管吸出液体后滴在玻片上,用推玻片沾以适当的角度(30-45度)用力均匀,推制出厚薄均匀的

4、涂片 染色 1将自然干燥的涂片放于染色架上。2滴加刘氏A染液滴于涂片上。3立即滴加刘氏B3-5滴,使其充分混合均匀,一般用吸球吹气混合。4染色1分钟。5立即用急流水冲洗1分钟,自然干燥。注意事项1. 肿瘤细胞或其他病原体在腹水中分布是稀疏而不均的,检查的标本只能是其中很少的部分,因此腹水的检查应该反复多次的检查才能提高阳性率。2.腹水的新鲜事与否是影响细胞学诊断的十分重要因素,因为腹水抽出后若不及时制片或固定,其中细胞就会自溶破坏,使细胞正常结构变得模糊不清,这是腹水中找不到癌细胞的主要原因。腹水抽出送检,夏天不能超出半小时,冬天不能超出一小时,检验部门收到标本后必须立即制成涂片,不能拖延。3

5、.容器应该是消毒、无水的,否则造成细菌感染,细胞溶解,影响细胞学诊断。4.临床医生在抽吸腹水时应将拔针前抽出的200-300ml液体留作检查。5.涂片厚度应适宜,不能太厚或太薄,太薄时细胞数量太少,太厚时细胞重叠并易干裂脱落。一般略比末梢血片厚为宜。6.涂片应尽量在空气中自然晾干,避免加温,因为加温会使细胞皱缩变形。7.若标本为粘稠脓液无法离心时,可直接推片。8.若标本中有大量血液,离心后取出上清液,用吸管吸取红细胞表面带会白色的部分,滴载玻片上推片。染色厚薄均匀的细胞涂片自然干燥后在较厚的头端细胞膜上写上病人姓名、日期及编号。加瑞姬染色液4-8滴,用吸球吹吸并使其布满整张涂片,约1分钟后,滴

6、加适量缓冲液,与染液混合均匀,染色10-15分钟,夏天可缩短些,冬天则可延长些,然后自来水充分冲洗,自然干燥,待检。分析要点1. 正常情况下间皮细胞是单层片平的上皮细胞,细胞呈多边形,大小形状较一致,核染色质呈细颗粒状,分布均匀,有时可见一两个小核仁。在病理情况下,间皮细胞可变成立方或主状上皮,间皮细胞容易脱落,所以在胸水中常见到,间皮细胞外的纤维细胞交织排列不易脱落,所以在胸水中不易找到。2. 腹水常见的有胃癌、结肠癌、直肠癌、卵巢癌等。较少见的有肝癌,胰腺癌、子宫颈癌,子宫内膜癌等。肝转移癌和腹膜间皮瘤及腹膜淋巴结的恶性淋巴瘤很少见。 诊断用语1.未查见恶性肿瘤细胞2.可见疑是恶性肿瘤细胞

7、3.可见恶性肿瘤细胞 结果登记与标本的归档为了保持患者档案资料的完整性,以备复查和整理,细胞室检查项目须进行结果登记和标本归档。1. 结果登记:检验结果一份发出后,在专用电脑的医用显微图像分析系统的数据库中有存底,电脑中数据一般每月备份一次(用刻录光盘保存),并每月打印一份病人标本信息清单;2. 标本编号、贴标签:标签内容包括患者姓名、检验号、送检日期,化学染色名称等;3. 标本归档:由专人负责并登记签名:初诊患者所有涂片包括化学染色片均须归档,复诊患者无特殊者保留瑞氏片2张、空白片2张。按分类号定期归档;标本应长期保存,阴性结果的片子保存约5年便可销毁,而阳性片子则应保存15-25年不等,特殊人群,如儿童的片子应专门分类存放,至少应存放25年。无特殊原因不得丢弃标本;3/2

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