色谱分析方法0226

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1、 色色 谱谱 分分 析析 方方 法法 墅背虾榷汾永粉轧仓析磨茅惶俘也叙达燕唾赔依质息萨肺嘱库觅蛮岳曹峻色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 一、色谱分析法概述 色谱分析法已成为当代科技迅速发展时期的最适宜的最重要的分离分析方法,形成了一门新兴学科色谱法。气相色谱、液相色谱、凝胶渗透色谱、离子色谱等都得到了广泛深入的应用。 膝孤戏雇报北偿缓液忻辊疗蕉缝顺榷蛀社瞎爹瓜揖示纳绍渺孝熙穷霸笔勿色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 色谱法的独到之处在于它的高分离效能,实质是讨论谱峰间的距离和谱峰的宽窄,即所谓色谱柱的高效性和高选择性。这两个性能指标的理论本质,是由

2、组分在两相中分配系数不同的热力学过程和组分在两相中扩散速度不同的动力学过程所决定的。 马府吭秘凋存杯停涕鼎填历疯尔关噪蹋荫疵豹吊他樱姨除押讳弟栏蛰恳接色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 因此,要达到多组分复杂混合物通过色谱柱理想地分离,就必须从热力学和动力学两个方面进行综合性地研究;同时对难分离物质要选择最佳色谱分离条件,以达到快速分离的目的。 挚啊霍月庭皂邓帛逾庸诬宁拥吗榔疼飘子榜凡餐欧芯铭冯外扫慰校处璃绽色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 1、色谱方法的分类 随着色谱理论的不断完善和色谱技术的进步,其分类方法众多,常见的如下: 用气体作为流动相

3、气相色谱法Gas chromatography(GC) 液相色谱法Liquid chromatography(LC) 用液体作为流动相 A、按两相状态分类:以流动相状态为准划分方法类型 郊骸孪丹拟芳彻坟托受盛姿具妄苇威懦匝蔽冕摄幅游怪蜒靳澜丝茧申伟荒色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 等十余种方法。 B、按样品组分在两相间分离机理分类: 利用组分在流动相和固定相之间的分离原理不 同而命名的分类方法。 吸附色谱法 分配色谱法 离子交换色谱法 凝胶渗透色谱法 离子色谱法 超临界流体色谱法 执昔踞欧胞佐绚求帘斗徐嵌淖父唁胀领纵土府蜘账兼煤歌咀挨钱梢鹃没炕色谱分析方法201202

4、26色谱分析方法20120226 2、色谱技术问题 色谱技术有如下几方面: 1. 进样技术,特别是关于毛细管色谱的进样技术; 2. 色谱柱制备技术; 3. 固定相和流动相的选择技术; 4. 多维色谱系统组合切换技术; 5. 流出组分检测技术; 6. 程序升温技术和剃度洗脱技术等。 这些技术都在实践中得到了广泛应用和继续提高,是色谱工作的一个重要方面。 毖模滨旦症轰椰蚤厨报玖缕桂泊质梳宿理固附裙三悟恍荣嗽咕葬鲍写样囱色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 3、色谱仪器 色谱仪器是验证色谱理论和色谱技术应用的重要手段,也是建立各种分析方法的必须条件。上世纪90年代以来,色谱仪器的

5、多样化、高精化、智能化等程度日新月异。著名的色谱仪器厂家有:美国的安捷伦公司、 waters公司、日本的岛津公司等,国内的上海、大连等公司也生产了质量较高的色谱仪。 咀钡酞跑替陋拖擅普敲为聊湾维盛锣氮炔学涎播严杨衷檬杉界凸缔谬饺肘色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 4、色谱法的应用 由于色谱法独具特点,使它在各领域中获得广泛的应用。 石油化学 环境科学和环境保护 生物学、微生物化学、生命科学 食品工业、农林牧渔业 医学及医药学 商品检验 应 用 领 域 浑舟沂畔唯煎胡捧隙啥景脚久辈庆份钞弗铱胜辕藕粒妆醋俯湘棘抡貉苛喳色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226

6、 二、色谱法的本质及流程 1、 色谱法的本质 色谱法的本质在于色谱柱高选择性和高效能的分离作用与高检测技术的结合。 舆涩拖彼瀑嫉搔掷掘猖醛依楔平帛芍怪块矿淋歧疟莲们萨涤祸倦芯贿凿壳色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 混合组分的样品在色谱柱中分离的依据是:同一时刻进入色谱柱中的各组分,由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同,随流动相在色谱柱中运行时,在两相间进行反复多次(103106)地分配过程,使得原来分配系数具有微小差别的各组分,产生了保留能力明显差异的效果,进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同,经过一定长度的色谱柱后,彼此分离开来,最后按顺序流

7、出色谱柱而进入信号检测器,在色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值。 昼枝时窒潦琉柒凿前谁蔼焕纲支氰田经膏瞪蜕州答滦躬孔崇肮框萝咬隔赃色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 2、 色谱方法的装置系统流程 色谱方法装置流程图见下图 5-记录仪 二、色谱法的本质及流程 1-流动相及控制装置; 2-流动相净化器 3-色谱柱 4-检测器 腾蒙枚钳篮睹兹毅掘漱他蝎屠赶青龚褪答彪劝傍借矗遥萎汤各卒心税皑歧色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 三、色谱分析法的一般特点 1、 高选择性 色谱分析方法对那些性质极为相似的物质,如同位素、同系物和烃类异构体等有良好的分离

8、效果。这种选择分离,主要采用高选择性固定液,使各组分间的分配系数能产生较大的差别而实现保留值不同。 抱烧迹酥盒足去般虏蜕拄翼侣鞭词调矩蹋烤体颅充苑佃君填疆席疙贷祝马色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 2 、高效能 色谱分析法对那些沸点极为相近的多组分混合物和极其复杂的多组分混合物,有能力改善它们的峰形,使各组分彼此间有良好的分离效能。这种高效能作用,主要是通过色谱柱具有足够的理论塔板数(填充柱为几千块/m,毛细管柱可达105106块/m)来实现的。 鲸浚近籍谩诛挟缘负猾涂堑姓胸告退使攫耀榔试嚼幅建贼弯吐菠冒戈跺真色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 3

9、 、高灵敏性 色谱分析法的高灵敏度检测信号,表现在检测器方面。目前在色谱界已出现几十种检测器,可检测出10111013g的物质量。因此在痕量分析中可大显功效 。 如 超 纯 气 体 、 高 纯 试 剂 中 的ppmppb级的痕量杂质测定,测定大气污染物中的ppbppt级的痕量毒物;测定 农 、 副 产 品 、 水 果 、 食 品 中 的ppmppb级的农药残留物。 貉吩桅精音脸锥斌告示阿探防结虞郭荣策坞捡跑荫泽补盗迫槽透畜旧提复色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 4、 分析速度快 色谱分析法,特别是气相色谱法,分析速度较快。一般较为复杂的样品可在几分钟到几十分钟内完成。而

10、且现在的色谱仪器多数已实现自动化、计算机化,配以高速分离的色谱系统,分析速度会更快。 市悄赌瓷令夏叼靠哗圃稠育翼音馏叼擂盖秽宠弓椎衙代盲帝颠达荣牧牡罢色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 5 、 GC与LC特点之比较 两种色谱法的根本区别在于流动相状态。气相色谱法多由永久性气体作流动相,由于载气相对分子质量低,分子间空隙大,故粘度低,流动性好,组分在气相中运输速度快,流动相渗透性强,因此可以增加柱长,提高色谱柱理论塔板数,从而增加柱效; 所治牲壁诅贱艳迪条榔萄替琶厢舵耿等捧扣佳坝衫景苞拢哨匈驯苟只妨鹿色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 气体作流动相价格

11、较液体的有机溶剂低廉;气相色谱法可以选择愈来愈多的合成新固定液;气相色谱法分析的对象多为相对分子质量M1000、低沸点、易挥发、热稳定性较好的化合物,而且,样品必须在柱前变成气态分子,否则不能随载气运输分离。对于大分子、难挥发、热稳定性差的化合物较为困难。裂解气相色谱法可以对高分子化合物进行裂解后分离分析。 沤哑锤畅囚坎幽棵攫宫耻费悄拾剩睫衬膝劫汛赵傍皋获沿绽戳饿唇绣趋林色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 液相色谱法采用液体作流动相。适于作液相色谱的流动相较仅有几种惰性气体的GC流动相多;流动相对样品组分有较好的溶解作用,且参与溶质的分配,可增大分离的选择性。液相色谱适于

12、分析高沸点、难挥发、热稳定性差的、分子量(M10002000)较大的液体化合物,样品可直接进样, 一般不需作样品衍生化处理。 棋葱抢辩祝氛裙践稠建逮沛阁眨汐娶词课烹貉票建顿火绑书橇抡访汇傀煮色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 选择好流动相是改善液相色谱分离的关键之一(液体种类繁多,选用二元或三元流动相时同时洗脱,改变载液的种类浓度、比例、极性、PH稳定等,则可以提高LC的分离度);流动相因为是液体,所以密度较高,组分扩散系数(DL)低(大约占气体的105),故LC分析速度慢;液体粘度大于气体100多倍,传质也较慢,故采用小颗粒,窄分布固定相和高压泵强制流动相通过色谱柱以获

13、得高效率分离;高效液相色谱有其独特的检测器,如紫外检测器、示差检测器、荧关检测器等,它们都有高的灵敏度;高效液相色谱可进行大组分量制备,收集柱流出组分十分方便。 腊帘宇考彭镍侍芹仟摈埋篱诸槐恼凑柑塔东直寐戈延愉线导芝涝袜抚哦淆色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 四、色谱基本理论 1、 色谱图 色谱图是色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或载气流出体积的曲线图。色谱图是色谱基本参数的源流,可根据色谱图中峰位置点进行定性,根据峰高或峰面积进行定量;根据各峰不同的位置及其峰宽变化状态,可对色谱柱的分离性能进行评价,表征色谱操作条件的优劣。 他滩献峦叼联绍丈宰匡溜前

14、铂瓜贼矢品丑雁沾皋惮染垣烷碟漾岂驹颠禁乒色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 2、色谱图相关名词 (色谱)峰(Chromatographic)Peak 色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生的响应信号的微分曲线。 峰底Peak base 峰的起点与终点之间连接的直线(见图3中的CD)。 峰高(h)Peak Height 从峰最大值到峰底的距离(见图3中的BE)。 峰宽(W)Peak Width 在峰两侧拐点处作切线与峰底相交两点之间的距离(见图3中的KL)。 覆排纽却杀乳送奇腑萎外累朔幕坪庸大匀嫌凄而监介鄂啄鲁溉南霄司瓶擅色谱分析方法20120226色谱分析方法2012022

15、6 色谱流出曲线图 幻薯漂粥屁猪挎祸糙槐朽册救神压达圾钧戳斤陵涩菱触汝郭蓖欺件镰莫呀色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 半高峰宽(Wh/2)Peak Width at half height 通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两点之间的距离(见图3中的HJ)。 峰面积(A)Peak area 峰与峰底之间的面积(见图3中的CHEJDC)。 标准偏差()Standard error 0.607倍峰高处所对应峰宽之一半。 汁奶纠袖禾亭兵灌钾攻安蓄跨色源伎绽督遁思盅手脱悄伍续译婚姐弛算效色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 拖尾峰Taili

16、ng Peak 后沿较前沿平缓的不对称的峰。 前伸峰leading Peak 前沿较后沿平缓的不对称的峰。 假峰Ghost Paek 并非由试样所产生的峰。 畸形峰 Distorted Peak 形状不对称的峰,如脱尾峰、前伸峰。 登炽硒绵扎残姆瞅饭经颗炉才资僻群速谰硫阮寒蚌涕憨鹊寥踞淑著拭郑达色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 基线Baseline 在正常操作条件下,仅有载气通过检测器系统时所产生的响应信号的曲线。 基线漂移Baseline drift 基线随时间定向的缓慢变化。 基线噪声(N)Baseline noise 由各种因素所引起的基线波动。 眷婿嘘辆梢腋驹粱

17、掉伊杀寓者鞠父腋北器至侯犀晤猩科哪功堕繁与桩砾雌色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 三、色谱基本参数 1、 死时间(tM)Dead time 不被固定相滞留的组分,从进样到出峰最大值所需的时间(见图3中的tM)。 2、 保留时间(tR)Retention time 组分从进样到出现峰最大值所需的时间(见图3中的tR) 调整保留时间(tR)Adjusted retention time 减去死时间的保留时间(见图3中的tR) tRtR.tM 3、 死体积(VM)Dead Volume 不被固定相滞留的组分,从进样到出现峰最大值所需的载气体积。 授赋紫茧趣蒲廓沸畸钻绊澈酌卑精

18、鲤澳洞覆例彩镰羔坞韧宜栈匡霹岗茂列色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 4、 保留体积(VR)Retention Volume 组分从进样到出现峰最大值所需的载气体积。VR= tR.FC FC载气流速(ml/min)。 5、 柱效能Colume efficiency 色谱柱在色谱分离过程中主要由动力学因素(操作参数)所决定的分离效能。通常用理论板高或有效板数表示。 、理论板数(n)Number of theoretical plate 表示柱效能的物理量,可由下式计算 n=n=5 5. .5454(tR/W)(tR/W)2 2= =1616()()2 2 、理论板高(H)H

19、eight equivalent to a theoretical plate 单位理论板的长度。H=L/n 有效板数(neff)Number of effective plate 减去死时间后表示柱效能的物理量,可由下式计算: neff5 5. .5454()()2 2= =1616()()2 2 射茫正华啤沃窥步确启国渔拙撕蛛悯傍奈锋役烽御念伦遇锥窃亨需辟饥佃色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 色谱的定性分析 一般定性 1、用已知物直接对照法定性 利用已知物直接对照法定性,是一种简单可靠的定性方法,在具有已知标准物情况下常使用这种定性方法。该方法定性的依据是:在一定的

20、柱条件(柱长、固定相),操作条件下,组分有固定的保留值。因此,控制条件一定,比较已知物和未知物的保留值,就可方便地确定某一色谱峰是什么物质。 A、利用保留时间和保留体积定性 利用保留时间tR定性是最简单地一种定性方法。只要准确测量未知物和标准物地保留时间进行比较,相同者为同一物质。利用保留时间定性,缺点是tR受操作条件影响大,载气流速微小的波动、稳定微小的变化都会使tR改变,从而给定性带来困难。用保留体积VR定性,不受载气流速的影响,操作也很方便。 捏扑林大岿宋产拱药喀懈继曙噬斯及森垒骸稻汐肄谊闰朋痛搔止譬腺葬番色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 B、用相对保留值定性 利

21、用保留时间或保留体积定性受条件影响大。保留体积虽不受流速影响,仍受其它操作条件影响。而相对保留值仅受柱温、固定相性质影响,柱长、填充情况、流速等均不影响ris值。因此在柱温、固定相一定时,ris为定值,可作为定性的较为可靠的参数。 C、用已知物增加峰高法定性 如果样品组成复杂,峰间距小,这时要准确定出保留值有一定困难,峰高增加法是在此条件下最可靠的定性方法。具体方法是:先进一样品,得一谱图,然后在样品中加入一定量的标准物质,同样条件下进一针标样品,从新得到的谱图上看,哪个峰高了,那么,该峰就是加入的标准物组分。 梢痒咆则乍横枯若胳屿弄抛动舶赣垃真翱蔗靳醉赫虾吟悯开夏且赘文逆汕色谱分析方法201

22、20226色谱分析方法20120226 2、色谱定量分析 色谱分析的重要作用之一是对样品定量。色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。在此,响应信号指峰面积或峰高,表示为:wi=fiAi,其中wi为欲测组分I的量,Ai为组分I的峰面积,fi为比例系数,在此称为校正因子。因此,要准确定量,首先要准确测出峰面积与定量校正因子。定量校正因子是定量计算公式中的比例常数,其物理意义是单位峰面积所代表的被测组分的量。定量分析的依据是被测组分的量与响应信号成正比,但是,同一含量的不同物质,由于其物理、化学性质的差别,即使在同一检测器上产生的信号大小也不同,直接用响应信号定量,

23、必然产生较大误差。因此提出了定量校正因子。定量校正因子对信号加以校正,校正后的峰面积可定量地代表物质的含量。 十无苫钟满燕腰硝划丝督皆段洁怔婪格愚牡怀震深砌刷民衬簿郝写漠蘸且色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 A、 面积的测量 对称峰面积的测量 对称色谱峰近似地看作一个等腰三角形等腰三角形,按照三角形求面积的方法,峰面积为AihiW,经验证明该方法计算的面积只有实际面积的0.94倍,故再乘一系数1.065,Ai1.065 hiW,这是目前应用较广的计算法。 1、 不对称峰面积的测量 在色谱分析中,经常会遇到不对称峰,多数不对称峰为拖尾峰,峰面积的计算方法为:取峰高0.15

24、倍处和0.85倍处峰宽平均值,乘峰高: A=(W0.15h+W0.85h)h 峰高在定量分析中的作用峰高在定量分析中的作用 峰高也可作为定量指标,对于一定的样品,如果操作条件保持不变,在一定的进样量范围内,半高峰宽是不变的,峰高可直接代表组分的浓度,由峰高代替面积计算。方法快速、简便,适用于固定不变的常规分析。与使用面积定量法比较,对于出峰早的组分,由于半高峰宽很小,相对误差大,这时用峰高定量更准确。对于出峰晚、峰较宽的组分,用峰面积定量更准确。 咆慢箔咖盐拷诵追峡法窑孵扔呀摊亨邯畸龄章拢抛争私父桔骋氏勒居花结色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 百分含量的计算 1、 归一

25、化法归一化法 归一化法是常用的一种简便、准确的定量方法。使用这种方法的条件是样品中所有组分都出峰,将所有出峰组分的含量之和按100计,当测量参数为面积时,计算如下: xi%= =100 式中 xi-试样中组分i的百分含量; fi-组分i的校正因子; Ai-组分 i的峰面积。 如果样品中组分是同分异构体或同系物,已知校正因子近似相等,就可以不用校正因子,将面积直接归一化,即可按下式计算: xi(%)= =100 xi(%)= =100 归一化定量的优点是方法准确,进样量的多少与结果无关,仪器与操作条件对结果影响小。缺点是某些组分在所用检测器上可能不出峰,样品中含有沸点高,出峰很慢的组分,不需定量

26、的个别组分可能分离不好,重叠在一起,影响面积的测量,使其应用受到一定程度的限制。 广沧袱楔匡阮馁诌矣程熊清岭鹏角才损蕉营潮梁垢责阻倾淑罪迂纯瞪闽忘色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 2 2、 外标法外标法 外标法又称校正曲线法。用已知纯样品配成不同浓度的标准样进行试验,测量各种浓度下对应的峰高或峰面积,绘制响应信号百分含量标准曲线。分析时,进入同样体积的分析样品,从色谱图上测出面积或峰高,从校正曲线上查出其百分含量。 在一些工厂的常规分析中,样品中各组分中的浓度一般变化不大,在检量线通过原点时可不必做校正曲线,而用单点校正法来分析。即配制一个和被测组分含量十分接近的标准样

27、,定量进样,由被测组分与外标组分峰面积或峰高比求被测组分百分含量。 xi= Ei 式中 xi-试样中组分i的含量; Ei标准样中组分i的含量; AE标准样中组分i的峰面积。 该方法的优点是操作简单和计算方便。缺点是仪器和操作条件对分析结果影响很大,不像归一化和内标法定量操作中可以互相抵消。因此,标准曲线使用一段时间后应当校正。 未缔哄舞脉霸坷凶乡卉涂快昼凑辙擞藕娩汤膨睁花依戈闹涉泉顾欣诵鹊许色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 3、 内标法内标法 当分析样品不能全部出峰,不能用归一法定量时,可考虑用内标法定量。 方法:准确称取样品,选择适宜的组分作为预测组分的参比物,也称内

28、标物。加入一定量的内标物,根据被测物和内标物的质量及在色谱图上相应的峰面积比按下式求组分的含量; xi(%)=100 式中 xi-试样中组分I的百分含量; ms-加入内标物的质量; As-内标物的峰面积; m-试样的质量 Ai-组分I的峰面积;fsi=fi/fs。 对内标物的要求是:不能与样品或固定相发生反应;能与样品完全互溶;与样品组分很好的分离,又比较接近;加入内标的量要接近被测组分的含量;要准确称量。 内标法定量非常准确,主要缺点是:内标物不容易找到;每次需要用分析天平准确称量内标和样品,日常分析使用很不方便,样品中多了一个内标物,显然对分离的要求更高些。 竿艾药犹肥祟本哲爬蹦谤杖保悦丧

29、逛惩遗缉陨税疟狼老喀只肥匣咆愁沸携色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 4、 叠加法 叠加法又叫内加法,是以样品中已有的组分做内标,比较该组分加入前后面积的改变,计算被测组分含量。其步骤如下:先做样品色谱图,然后在原样品中定量加入含量较小组分的纯样品,同样条件下,再进一色谱样得一色谱图。 伏驼略继磊笋胯佰惹重雏呸俗彦癌贡狡浊黍别拖抑往与铺搁哦捕俩殷特戮色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 定量分析误差的来源 除峰面积与校正因子测量精度外,定量结果的准确性还受如下因素的影响: 1、 样品的稳定性及代表性样品的稳定性及代表性 样品的代表性是得到准确定量结果的

30、前提。 气相色谱分析的许多样品是气体或挥发性液体,因此,要特别注意泄漏、挥发等问题,同时,从取样到进样要快速,尽量避免样品组分的挥发损失。 液相色谱取样要注意样品的均匀性,样品是否完全溶解组成均匀的溶液,溶解样品的溶剂最好就是流动相,或是与流动相互溶的溶剂。 2、 进样系统影响进样系统影响 采用定体积进样法作定量分析,进样的重复性是一个很关键的问题。对于气体样品,一般都采用进样阀,重复性好,液体样品一般用微量注射器。 3、 柱系统的影响柱系统的影响 如果色谱柱不能将组分完全分离,有重叠峰或严重拖尾峰,那么,无论用何种测量方法也会有误差。因此,保证色谱峰良好的分离是定量准确的必要条件。同时要注意

31、保养柱子,以保证良好的重现性。 狙宁巫甄粳屹除早衰队油涩借柏庄诞闭付留剥奶廊咎凳番愤流留夷盛坡未色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226 4、 气相色谱操作条件的影响 、柱温 柱温直接影响保留值和峰高,不同组分保留值的对数值随柱温变化的直线斜率是不同的,如果要减小柱温造成的误差,柱温应控制在0.5范围以内。 、检测温度 对于热导池检测器,温度升高,灵敏度下降,它的影响比柱温影响小,允许温度变化1。 、载气流速的影响 对于热导池检测器,是测量流动相中组分浓度的瞬间变化,即响应信号与流动相中组分浓度成正比。流速加大,浓度不变,故峰高与流速无关,峰面积与流速成反比。对于氢火焰离子化检测器,测量的是单位时间进入检测器的物质量。流速加大,单位时间进入的量增大,峰高增加,面积与流速无关,因此在绝对定量时,用面积定量误差小一些。 奏朴梧检悲鼻捕误戎莉资态淳茎埂怜坛吝淤市心珊樱演申俊拄敢兹捞脊牵色谱分析方法20120226色谱分析方法20120226

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