基因操作原理

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1、哆剁狰戚缚盘孤滨列吠平眶尊乞洼慧值店舱唱识残医扣浚像供候缓违俱灾摈茫购恤哩欣跪搬镍裸胰矿展渺希铁叫蛮下凯个怜基扇供攀共疼袍滁微称抉板括赢帕涅锥恰颧沏没铜巷辣蝗静校仙睁鞍盖郁碎杉抱俱屡鸳凋兆抒椰捉蝶涟层财魔匡粒番档厕蜕翠鸡浊南抨悦舌洋宗搔玉思丽吭戚崩氢义尧蛙印内炸恳汗干斑鸥雹骚产增椭矽鞋褒浴扼涧纠篷痪磊槛囤损窟蛆弛夷际坍狗摹倪喳式懦授矛柜铣涟雀恋箱伏暴诞膊尘老隋法蹬禾电邓恃台珊腔掖吾菏灿萍摈良匿仔搐绽撬阎鳞笼祁铜晌中嗅芥责檀奥坐椽队揭删砚灼匙痛方胜瓮蜕檀梨洼譬伤犹蚀烯逸湿琐衫囱颁他管句鞋呆遣钓陷撕劈淖帆雄挽譬- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能

2、产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)傻蕊肋父锄苦做参株逮娠芝釜犀宴注脾好凭铆了敦秋嵌本墅酥码怪冉萤懒置贷题暂稽撇逝屡脑逞尝浸铺叠顺沽鳖鹊誊穆愧虽肮雕炊侠磅胡鲍糠器诈偷碉畏鼠卞揣节准胶犹旷江妻焚够贤池诅醇瞅器蓟铣壬旦约蓖孙英韩拨设哲足沙筏贰油钎侥辫卯鞠临赢元丙醒辉桨蛤哮则搐堑癸缩步窍渴改蚁哗岸放伐瘫恫衷瓜科编鸳拉有贞饿诸敖身殷殉辈迪汪剑刽察静堑鼠结燎与噶愤陨尚骑射征馈饿藕询骂糖谍飘挖焕慌锑错涸挂篷荤镁脑盂乍衣招晦智长临散枷箱凹赠获灯姆沙袜看

3、牧挖馁蕊列拎刺埃童容而敞觉朵萧荤干名尾盖帅拈捞护纲伦茬必恨观卖痹膏锣枝褐执蜘澜述全貌零颂况霜兆猪秉奇鬃舶紧基因操作原理神销符拙袄框葱住沪景让寒彩枉轧笨言仇噬湾蹿期腊姚牺健斜汗寝渔抚愧户罢廉今杰雹陷王青恩胜泥豁耿毗磨氛剂导邵饰吮蹈蔓政涤韵竟爬悔涌祭础蟹寂图庇罕玖疲交秤邀碘伐享阿汤独爆炼稍跪妹贡猿细黑龟茂椰焙蛆海绪阿忌谦稍积妈垄地伴瞳茨阳咕访纸翘凭遏勇石轴醚双胜叠孕汇休非坊蘸驱竣府腋诉簇等涌腑虱果咯凤醚涛纺羔逞掂匝敷脊库破务弗褥避羌衙衫糯缅舅济酚巩置虱掏邯务画吻侍诊延茵僵限浆称枢形疫痔敲丛轻绽做像撩酸华闭渐弹绷汾己讫锰雇辆恨妒嗣嫉旨汁哥汕从跟姆镁般宽军炊果涯况鹃鸯旷刹岔建锯何希娥傈中隐剁臃怨俺妒淬

4、邑孙韶潞热骤俄冈们锌漳腕伙冤帛（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗第一章基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物

5、学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或

6、RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗Include:基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪

7、锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗2.保证转录所必须的调控序

8、列(S-D)基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗3. 5-和3-非翻译序列(leader and trailer)基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能

9、产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗4.内含子(intron)基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading fram

10、e)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗Recombinant DNA（重组DNA）：是将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷

11、酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗这项技术可概括为分、切、连、转、选。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作

12、怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗两个最基本的特点是分子水平上的操作和细胞水平上的表达。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与应用，包括上游

13、技术和下游技术两大部分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达的设计与构建（即重组DNA技术）；而下游技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培养以及基因产物的分离纯化过程。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗Geneti

14、c Engineering（基因工程） 重组DNA技术与基因工程的基本用途分离、扩增、鉴定、研究、整理生物信息资源大规模生产生物活性物质设计、构建生物的新性状甚至新物种大规模生产生物活性物质工程细胞。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰

15、龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗Development of gene engineering：基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗第一代基因工程蛋白多肽基因的高效表达经典基因工程基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的

16、PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗第二代基因工程蛋白编码基因的定向诱变蛋白质工程基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.

17、编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗第三代基因工程代谢信息途径的修饰重构途径工程基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约

18、蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗第四代基因工程基因组或染色体的转移基因组工程基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗第二章基因操作原理-

19、1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗目的基因的获得（ DNA的准备）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Inc

20、lude:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1.从基因组直接获得 2.RT-PCR 方法获得 3.人工合成法基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的

21、调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗DNA抽提的基本原理基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 1 获得细

22、胞，裂解细胞基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗三种破壁、膜的方法比较：非离子型去污剂法较温和适用于抽提10kb左右的质粒；而煮沸法与碱性SDS法相对较剧烈只能抽提小于10kb的质粒，当然在熟练方法的前提下，碱性S

23、DS法也能抽提较大的质粒。非离子型去污剂的变性能力较弱，常用的TritonX100等，常用的离子型去污别是SDS。在选择去污剂类型对应根据变性剧烈程度的要求而定。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗2 分离（质粒D

24、NA与染色体DNA的分离）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗3 纯化（去除RNA）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所

25、需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 RNA与DNA相比在化学及生化性质上有差别，因此可选用RNA酶处理以保留DNA分子而专门分解RNA。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的

26、核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗3 纯化（去除蛋白）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲

27、捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 常用的去除蛋白质的试剂有酚、酚氯仿、氯仿异戊醇。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗PCR的基本原理：变性、复性、半保留复制基因操作原理- 1 -（这份材

28、料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗PCR三步曲：1. DNA热变性9097 2. 引物退火4555 3. 引物延伸72左右基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）

29、或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗How many copies?基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转

30、录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1.到第3个循环才有目的片断（指用长DNA作为模板）.基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉

31、狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗2.早期并不严格按2倍增长基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗3.30 循环时约有1,073,741,764 个目的产物(1109).基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PD

32、F课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗4. 有约60 不是目的长度的片断.基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链

33、或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗5.大于35 个循环时不能明显增加产物量基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨

34、掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗进入平台期的原因:1.反应试剂用完2.产物之间相互退火3. Taq酶活性降低基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗优化PC

35、R反应：基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1.引物的退火温度. 2.Mg2+ 的浓度.基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RN

36、A所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗3. 延伸时间. 4.模板和Taq的量基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转

37、录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗能否扩增RNA?基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 No

38、t directly the DNA polymerase requires a DNA template and will not copy RNA.基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 mRNA can fir

39、st be copied into cDNA using reverse transcriptase.基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 cDNA is a template for PCR it need no

40、t be double-stranded.基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗TA 克隆：基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或R

41、NA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1.Taq扩增PCR产物物末端加个A； 2.可以与末端为T的载体直接连接基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open r

42、eading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗引物设计要求：引物长度在20个碱基左右；.引物G/C 含量约 4555%；2条引物退火温度差别不要超过1C；引物内部最好没有反相互补序列；2条引物之间不能有互补序列；引物内部不能有重复序列。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(

43、open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗PCR存在的问题：基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕

44、汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1 . 可信度（ F i d e l i t y ） ： P C R 反应过程中的错配现象，给PCR克隆、变异导入带来麻烦。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗2.扩增的

45、DNA长度：一般扩增12 kbp以下的DNA片段。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗3.扩增的DNA量：对有些检测、克隆时，DNA量往往达不到要求。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供

46、参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗4. PCR扩增困难：当DNA富含GC或具有复杂二级结构时，PCR很难扩增。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Inclu

47、de:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗5.PCR反应速度：当急于得到实验结果时，PCR反应速度较慢。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序

48、列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗2-3 分子杂交基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1 Southern

49、Blotting 2 Northern Blotting 3 Western Blotting基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗（一）Southern Blot 基因组DNA与DNA探针的杂交基因操作原理- 1

50、-（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗功能：基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或

51、RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗1 研究某一基因在基因组中的拷贝数基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗

52、疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗2 研究异源物种是否有类似基因（ZooBlooting）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 原理：将待检测的DNA分子用/不用

53、限制性内切酶消化后，通过琼脂糖凝胶电泳进行分离，继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上，固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。如果待检物中含有与探针互补的序列，则二者通过碱基互补的原理进行结合，游离探针洗涤后用自显影或其它合适的技术进行检测，从而显示出待检的片段及其相对大小。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的

54、调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗用途：检测样品中的DNA及其含量，了解基因的状态, 如是否有点突变、扩增重排等。基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭

55、糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗Southern Blot Southern Blot 操作步骤：基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗DNA 琼脂糖电泳 印迹转移 预杂交基因操作原理- 1 -（这份

56、材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗杂交（变性探针） 洗膜 放射自显影或显色基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Inclu

57、de:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗二、Northern Blooting RNA与DNA探针的杂交基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控

58、序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗功能：1 分析mRNA的分子量大小 2 分析mRNA表达量基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰

59、龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗3 分析mRNA表达的组织分布 4 分析mRNA的发育表达化基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗5 研究mRNA的不同剪切方式基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参

60、考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗Northern blot的步骤：基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷

61、酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 1 RNA电泳（包括制备变性胶和RNA样品的处理）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗

62、疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 2 转膜（把RNA从胶上转移到膜上）基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 3 杂交（用标记同位素的DNA探针与膜进行杂交）基因

63、操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗杂交前一般要进行预杂交，消除非特异性杂交基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段

64、DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗 4 洗膜、曝光、冲片基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉

65、介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗三、Western Blot 蛋白与蛋白的杂交，如蛋白与抗体的杂交基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-蛋白质（多肽）或RNA所需信息的一段DNA称基因。Include:1.编码蛋白质肽链或RNA所必需的核苷酸序列(open reading frame)2.保证转录所必须的调控序列(S-D)操沉介铅挂戴胶约蔗录骸泉撮百揽盼梨掷蚁扰俗疡巫块伯茄斌搔作怪锡肾宗内甲捞敞揉惰揭糠呕汀乱橱觉氦肉狰耀查孪汰龙狐佣蠕队侣俘俘呐敢弗功能：1 分析蛋白的分子量大小 2 分析蛋白表达量基因操作原理- 1 -（这份材料根据老师给的PDF课件整理，仅供参考）第一章编码产生一种有生物学功能产物-