临床检验仪器学

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1、 临床检验仪器学第1章 概论1. 灵敏度:检验仪器在稳态下输出量变化与输入量变化之比,即检验仪器对单位浓度或质量的被检物质通过检测器是所产生的响应信号值变化大小的反应能力,他反应仪器能够检测的最小被测量。2. 误差:当对某物理量进行检测时,所测得的数值与标称值(真值)之间的差异。误差的大小反映了测量值对真值的偏离程度。3. 噪音:检测仪器在没有加入被检验物品(输入为零)时,仪器输出信号的波动或变化范围。4. 精度:对检测可靠度或检测结果可靠度的一种评价,是指检测值偏离真值的程度。精度是一个定性的概念,其高低是用误差来衡量的,误差大则精度低,误差小则精度高。5. 可靠性:仪器在规定的时期内及在保

2、持其运行指标不超限的情况下,执行其功能的能力。它是反映仪器是否耐用的一项综合指标。6. 重复性:在同一检测方法和检测条件(仪器、设备、检测者、环境条件)下,在一个不太长的时间间隔内,连续多次检测同一参数,所得到的数据的分散程度。重复性与精密度密切相关,重复性反映一台设备固有误差的精密度。7. 分辨率:仪器设备能感觉、识别或探测的输入量(或能产生、能响应的输入量)的最小值。8. 线性范围:输入与输出呈正比例的范围,也就是反映曲线呈直线的那一段所对应的物质含量范围。1. 临床检验仪器具有哪些特点?答:临床检验仪器具有以下特点:结构复杂、涉及的技术领域广、技术先进、精度高、对使用环境要求严格。2.

3、临床检验仪器常用的性能指标有哪些?答:一个优良的检验仪器应具有的性能指标有:灵敏度好、精度高;噪音、误差小;分辨率高;可靠性、重复性好;响应迅速;线性范围宽和稳定性好。3. 通常临床检验仪器的分类是从哪两个方面进行的?答:通常以临床检验的方法为主对临床检验仪器进行分类或以检验仪器的工作原理为主对临床检验仪器进行分类。4. 临床检验仪器有哪些主要部件?答:通常,临床检验仪器有取样装置、预分离系统、分离系统、检测器、信号处理系统、显示装置、补偿装置、辅助装置、样品前处理系统等主要部件。第2章 显微镜技术和显微镜1. 光学显微镜:简称光镜,是利用日光照明将小物体形成放大影像的精密光学仪器,由光学系统

4、、机械装置和照明系统三部分组成。光学系统由物镜和目镜组成,其核心是物镜和目镜中的两组透镜,其放大成像的机理是先由物镜形成放大的实像,再由目镜进一步放大成虚像,最后在人眼中形成实像。2. 荧光显微镜:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。3. 相衬显微镜:是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,用于观察活细胞和未染色的标本的一种特殊显微镜。4. 激光扫描共聚焦显微镜:以单色激光作为光源的一种特殊光学显微镜。其物镜和聚光镜互相共焦点,使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像,而焦面以外的漫射光不参加成像,改变焦平

5、面,可获得细胞或原标本不同层次的图像,从而得到样品的三维结构图像。5. 电子显微镜:简称电镜,是利用波长很短的电子束作为照明光源,通过电子流对细胞样品的投射或反射及电磁透镜的多级放大而在荧光屏上成像的大型精密仪器。6. 放大率:或称放大倍数,是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值。7. 数值孔径:又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半正弦值的乘积。8. 显微摄影术:是利用显微照相装置,把显微镜视野中所观察到物件的细微结构真实地记录下来,以供进一步分析研究之用的一种技术。9. 景深和焦长:在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的

6、距离称“景深”。景物不动,像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。10. 视野:又称视场,是指通过显微镜所能看到的标本所在空间的范围。11. 齐焦:当某一物调焦清晰后,变换其他物镜时,也能基本保证焦距适当,成像清晰。12. 像差:光学仪器不可能使物点发出而进入系统的所有光线都是沿着高斯光学的理想光路成像,从而导致成像在形状方面的缺陷。13. 色差:是一种由白光或复色光在即使严格满足高斯条件下也存在的特殊类型的成像缺陷。当用白光或复色光经透镜成像时,会因为各种色光存在着光程差而造成颜色不同、位置不重合、大小不一致的不同成像效果,从而造成像和物体的较大失真。 1. 简述光学显微镜的工作原理。答:显微

7、镜是由两组会聚透镜组成的光学折射成像系统,是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质微细结构信息的光学仪器。把焦距较短、靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜,而焦距较长,靠近眼睛、成虚像的透镜组称为目镜。被观察物位于物镜的前方,被物镜作第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚像,位于人眼的明视距离处。2. 简述光学显微镜的结构组成。答:基本结构包括光学系统和机械系统两大部分。光学系统是显微镜的主体部分,包括物镜、目镜、聚光镜及反光镜等组成的照明系统。机械系统是为了保证光学系统的成像而配置的。包括调焦系统、载物台和物镜转换器等运

8、动夹持部分以及底座、镜壁、镜筒等支持部件。照明装置的主要部件有光源、滤光器、聚光镜和玻片等。3. 光学显微镜的性能参数有哪些?这些参数间的影响和制约关系如何?答:显微镜的性能参数主要有放大率、数值孔径、分辨率、视场、景深、镜像亮度、镜像清晰度、工作距离和机械筒长。显微镜的数值孔径与其放大率成正比u,与分辨率、景深成反比,它的平方与图像亮度成正比。因此,使用较大数值孔径的物镜,其放大率和分辨本领较高,淡视场、景深、工作距离较小。4. 简述医学检验中常用的荧光显微镜的原理、结构及用途。答:荧光显微镜是以紫外线为光源来激发生物标本中的荧光物质,产生能观察到的各种颜色荧光的一种光学显微镜。荧光显微镜是

9、由光源、绿色系统和光学系统等主要部件组成。荧光显微镜与普通光学显微镜主要区别在于光源和滤光片不同。通常用高压汞灯作为光源,可发出紫外线和短波长的可见光;滤光片有二组,第一组称激发滤片,位于光源和标本之间,仅允许能激发标本产生荧光的光通过(如紫外线);第二组是阻断滤片,位于标本和目镜之间,可把剩余的紫外线吸收掉,只让激发出的荧光通过,这样既有利于增强反差,又可保护眼睛免受紫外线的损伤光学系统主要有反光镜、聚光镜、目镜、物镜、照明系统等组成。荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊蛋白、核酸等,其标本染色简单。荧光图像色彩鲜亮,而且敏感度较高。5. 电镜的基本类型有哪些?各有什么特

10、点?答:电镜的基本类型有透射电子显微镜与扫描电子显微镜。透射显微镜与扫描电子显微镜都用于反复打与分辨微小结构,这两种技术通过标本对电子束的影响来探测标本结构。透射电子显微镜的电子束穿过标本,聚焦成像于屏幕或显像屏上,扫描电子显微镜的电子束在标本表面进行扫描,反射的电子聚焦成像于屏幕或显像屏。透射电子显微镜用于研究超薄切片标本,有极高分辨率,可给出细微的胞内结构。扫描电子显微镜可以反映未切片标本的表面特征。6. 扫描电镜与透射电镜相比有哪些特点?1 能够与直接观察样品表面的结构,样品尺寸可大至120mm*80mm*50mm;2 样品制备过程简单,不用切成薄片;3 样品可以在样品室作三度空间的平移

11、和旋转,因此,可以从各种角度对样品进行观察;4 景深答,图像富有立体感。扫描电镜的景深较光学显微镜大几百倍,比透射电镜大十几倍;5 图像的放大范围广,分辨率也比较高。可放大十几倍到几十万倍,它基本上包括了从放大镜、光学显微镜直到透射电镜的放大范围。分辨率介于光学显微镜与透射显微镜之间,可达3nm;6 电子束对样品的损伤与污染程度较小;7 在观察形貌的同时,还可利用从样品发出的其他信号作成分分析。7. 电镜由哪几个主要部分组成?对成像质量影响较大的部件有哪些?答:电子显微镜主要由电子光学系统(电子透镜和电子枪)、真空系统、供电系统、机械系统和光差显示系统等几部分组成。 对成像质量影响较大的部件有

12、电子透镜和电子枪。电子透镜存在各种镜差,这是影响成像这两个的主要因素。在实际设计中,是通过适当缩小口径、提高加速电压、增大电极圆筒或线圈直径及减低放大率来减少球差,通过降低电子的初速度、提高加速电压和稳定电源电压来减少色差的。8.光学显微镜与电子显微镜的主要区别有哪些?1 照明源不同。电镜所用的照明源是电子枪发出的电子流,而光镜的照明源是可见光。有雨电子流的波长远短于光波波长,故电镜的放大及分辨率显著高于光镜。2 透镜不同。电镜中起放大作用的物镜时电磁透镜,而光镜的物镜则是玻璃磨制而成的光学透镜。电镜中的电磁透镜共有三组,分别与光镜中聚光镜、物镜和目镜的功能相当。3 成像原理不同。在电镜中,作

13、用于被检样品的电子束镜电磁透镜放大后达到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是,电子束作用于被检样品时,入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射,有雨样品不同部位对电子有不同散射度,故样品电子像以浓淡呈现。而光镜中样品的物像以亮度差呈现,它是由备件样品的不同结构吸收光线多少的不同所造成。4 所用标本制备方式不同。电镜观察所用组织细胞标本的制备程序较复杂,技术难度和费用都较高,在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作,最后还需将包埋的组织块切成超薄标本片。而光镜观察的标本则一般置于载玻片上,如细胞涂片标本,细胞滴片标本等。9. 简述相衬显微镜的工作原理、结构特点及

14、其主要用途。答:相衬显微镜的基本原理是把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。光线透过标本后发生折射,偏离了原来的光路同时被延迟了1/4(波长),如果再增加或减少1/4,则光程差变为1/2,两束光合轴后干涉加强,振幅增大或减小,提高反差。 相衬显微镜的结构特点:(1)环形光阑。位于光源与聚光镜之间,作用是使透过聚光镜的光线形成空心光锥,聚焦到标本上 ;(2)相位板。在物镜中加了涂有氟化镁的相位板,可将直射光或衍射光的相位推迟1/4,并能吸收直射光(背景光)的光强,使直射光与衍射光的光强趋于一致,能更好地突出干涉的效果。相衬显微镜主要用于观察活

15、细胞和未染色的标本。第三章 离心技术和离心机1. 离心现象:物体远离圆心运动的现象,也叫离心运动。2. 重力沉降:液体中的微粒受重力的作用,较重的微粒下沉与液体分开。3. 沉降速度:在强大离心力的作用下,单位时间内物质的运动的距离。4. 扩散现象:在介质中,扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的,这种现象称为扩散现象。5. 解释RCF:相对离心力。是指在离心力场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”。6. 沉降系数:是指颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。7. K系数:是用来描述在一个转子中,将粒子沉降下来的速率。也就是溶液恢

16、复成澄清程度的一个指标。1. 什么事离心技术,离心技术主要用于哪些方面?答:应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术,实现离心技术的仪器是离心机。离心技术主要用于各种生物样品的分离、纯化和制备,在细胞生物学和分子生物学的每一进程中,总可见到离心技术的运用。2. 离心机的工作原理是什么?1) 离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或浮力密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。2) 悬浮液在高速旋转下,有雨巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降,从而使溶液得以分离。3) 颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。4) 微粒在重力场下移动的速度和

17、微粒的大小、形态、密度、重力场的强度及液体的黏度有关。5) 离心机就是利用离心机转子高速旋转产生的强答的离心力,迫使液体中微粒克服扩散加快沉降速度,把样品中具有不同沉降系数和浮力密度的物质分离开。3. 什么事离心机及离心现象?答:当物体所受外力小于运动所需要的向心力时,物体将向远离圆心的方向运动。物体远离圆心运动的现象。也叫离心运动。4. 离心力的数学表达公式是什么?答:公式Fc=m2r=m(2*N/60)2r=4*2N2rm/3600式中是旋转角速度,N是每分钟转头旋转次数,r为离心半径,m为质量。5. 什么叫最小离心力场及最大离心力场?答:通常称离心管顶部到旋转中心的距离为最小半径Rmin

18、,该处承受的离心力场为最小离心力场。通常称离心管底部到旋转中心的距离为最小半径Rmax,该处承受的离心力场为最大离心力场。6. 常用的离心方法分几类?答:常用的离心方法大致可分为平衡离心法、等密度离心法、经典式沉降平衡离心法等三类7. 差速离心法的优、缺点是什么?答:差速离心法的优点:(1)操作简单;(2)分离时间短、重复性高;(3)样品处理量大。缺点(1)分辨率有限、分离效果差;(2)壁效应严重;(3)颗粒被挤压,离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。8. 什么是密度区带离心法?答:又称为区带离心法,是样品在一定惰性梯度介质中进行离心沉淀和沉降平衡,在一定离心力下把颗粒分配到梯度

19、液中某些特定位置上,形成不同区带的分离方法。9. 什么是速率区带离心法?答:速率区带离心法是根据分离的粒子在离心力作用下,在梯度液中沉降速度的不同,离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层次形成几条分开的样品区带,达到彼此分离的目的。10、 什么是等密度区带离心法?答:党不同颗粒存在浮力密度差时,在离心力场下,颗粒或向下沉降,或向上浮起,一致沿梯度移动到它们密度恰好相等的位置上(即等密度点)形成区带,称为等密度区带离心法。11. 低速离心机的大致结构有哪些?答:结构较为简单,由电动机、离心转盘(转头),调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。第七章 电化学临床分析技术和临床相关仪

20、器1. 电化学分析法:利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法2. 离子选择性电极:用特殊敏感膜制成的、对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。3. 基流:党PO2的值为零时,电路中存在的微小电流值。4. PO2电极:PO2电极是一种氧化还原电极,电流的大小与血液样品中PO2值有关。5. PCO2电极:又称为“Severinghaus”电极,主要由玻璃电极、参比电极以及CO2渗透膜组成的,电位值随血液PCO2的大小变化而变化。1. 什么是电化学分析法?它利用哪些电化学特性进行检测?答:电化学分析法是利用溶液电化学性质将被测物质的浓度转变成电学参数而进行检测的方法。电化学特

21、性包括电位、电流、电导和电量等。2. pH测定的基本原理是什么?常使用什么电极进行检测?答:pH值检测常用残壁电极为正极,以指示电极为负极,组成一个电化学电池,通过测量电池的电动势E而测得响应溶液的pH值。电池的电动势E与样本中pH值的大小之间有下列关系式E=k+2.303RTpH/F,常利用玻璃电极检测血液样品的pH值。3. 离子选择性电极的工作原理是什么?其基本组成部分有哪些?答:离子选择性电极是一种用特殊敏感膜制成的,对溶液中特定离子具有选择性响应的电极。其电极电位与血液样品离子的浓度Cx之间有如下关系:EISE=k+2.303RTIn(Cxfx)/(nf)。将ISE与残壁电极浸入样品溶

22、液中构成原电池,通过测量E,便求得被测离子的活度或浓度。离子选择性电极通常由电极管、内参比电极、内参比溶液和敏感膜四个部分组成。4. 氧分压PO2电极属于何类电极?简述其组成。答:PO2电极是氧化还原电极,对氧的测量是基于电解氧的原理实现的。血液样品中的O2借助电极外的PO2梯度透过渗透膜而浸入电极。党外加电压在0.4V0.8V内时,O2在铂阴极被还原。当PO2梯度相对稳定时,就产生一个稳定的电解电流,称为极限扩散电流。因此,通过测定电流变化即可测定血液标本中的氧气分压。5. 简述电解质分析仪的基本构成。答:湿式电解质分析仪由离子选择性电极、参比电极、分析箱、测量电路、控制电路、驱动电机和显示

23、器等组成。6. PCO2电极属于何种电极?简述其组成。答:PCO2电极是气敏电极,是由pH玻璃电极和银氯化银电极组装在一起的复合电极。复合电极装入有机玻璃圆筒中,塑料套上有气体渗透膜,内装PCO2电极外缓冲液(含NaHCO3-NaCl),它的pH可以因血液的PCO2而改变。7. 常见的电解质分析仪这样进行分类?答:如果按自动化程序分类,电解质分析仪可分为半自动电解质分析仪和全自动电解质分析仪;按工作方式分类,电解质分析仪可分为湿式电解质分析仪和干式电解质分析仪;按常见电解质分析仪分类,电解质分析仪可分为自动电解质分析仪、函电介质分析的血气分析仪和含电解质分析的自动生化分析仪。8. 电解质分析仪

24、到的日常维护包含哪几个方面?答:日常维护应按照使用说明树上的要求,进行每日维护,每周维护,半年维护和停机维护。9.电解分析仪流路系统的保养包括:流路保养和全流路清洗。10. 在电解分析仪中电极系统的保养包括:钠电极、钾电极、氯电极和参比电极。11. 在电解分析仪中,仪器的哪些部位最易发生管路堵塞?如何排除故障?答:采样针与空气检测器部分、电极腔前端与末端部分、混合器部分以及泵管和废液管。管路堵塞排除方法是:(1)采样针与空气检测器部分。确定阻塞后,可直接用清洗液进行保养管路,亦可拆下空气检测器,用NaClO溶液反复冲洗进样针和空气检测器即可;(2)电极腔前端与末端部分。可用清洗液进行管路清洗保

25、养,亦可将电极全部拆下,将电极腔用NaClO溶液浸泡2分钟左右,再反复清洗即可;(3)混合器部分。主要用清洗液或去蛋白液进行混合器清洗程序,亦可将混合器拆下用注射器将NaClO溶液注入混合器浸泡几分钟,然后反复冲洗即可;(4)泵管和废液管的堵塞。可将废液泵管放松,CO2电极山不敢端废液管拔出,用注射器吸入清洗液或蒸馏水冲洗吸管路即可。12. 简述血气分析仪的基本结构及工作原理。答:血气分析仪的基本结构可分为电极、管路和电路三大部分。 其工作原理是:被测血液样品在管路系统的抽吸下,进入样品室内的测量毛细管中。测量毛细管的管壁上开有四个孔,孔内分别插有pH、PCO2和PO2三支测量电极和一支参比电

26、极。其中pH和pH参比电极共同组成对pH值的测量系统。血液样品进入样品室的测量管后,管路系统停止抽吸,样品同时被四个电极所感测。电极产生对应于pH、PCO2和PO2三项参数的电信号。这些电信号分别镜放大、模数转换后送到微处理机。经微机处理系统处理、运算后,再分别被送到各自的显示单元显示或打印机打印出测量结果。测量系统的所有部件包括温度控制、管道系统的动作等均由危机或计算机芯片控制。13. 在电解分析仪中,如何进行电极系统的保养?答:电极系统的保养主要包括钠电极、钾电极、氯电极和参比电极的保养。坚持每日用厂家提供的清洁液和钠电极调整是最基本的保养。钾电极为选择性膜电极,使用过程中会吸附蛋白质,影

27、响电极的响应灵敏度。每月至少更换一次内充液。氯电极为选择性膜电极,使用过程中亦可吸附蛋白质,最好用物理法进行膜电极的清洁。14. 简述血气分析仪电路系统的工作原理。答:电路系统工作原理是:被测样品通过S型的样品预热器,被吸入到电极测量室内,样品分别被由pH、PCO2、PO2、Hct、Na+、K+、Cl、Ca2+、GLU和参比电极所组成的电极测量系统有选择的检测,并转化成相应的电极信号,这些信号经各种的频道被放大,再经模数转换后变成数字信号,经微机处理、运算后,由荧光屏显示出来或从打印机打印出结果。15. 血气分析仪液路系统具有哪两种功能?气路系统的供气方式有几种?答:液路系统的两种功能,一是提

28、供pH值电极系统定标用的两种缓冲液,二是自动将定标和测量时停留在测量毛细管管中的缓冲液或血液冲洗干净。气路系统的供气方式有两种,一是压缩气瓶供气方式,又叫外配气方式;另一种是气体混合器供气方式,又叫内配气方式。16. 血气分析时,标准液和标准气分别用于何种电极的定标?答:血气分析时,pH电极使用7.383和6.840两种标准缓冲液来进行定标;PO2和PCO2电极用两种混合气体来进行定标。第一种混合气含5%的CO2和20%的O2;第二种含10%的CO2,不含O2。17. 一般的血气分析仪使用哪4种电极?答:pH、PCO2、PO2电极和pH参比电极。18. 血气分析仪内部具有哪两个泵?答:一为真空

29、泵,另一为蠕动泵。可利用这两个泵来完成仪器的定标、测量和冲洗。19. 在血气分析仪中,如何对pH电极进行保养?答:如果pH电极在空气中暴露2h以上,应将其放在缓冲液中浸泡6h24h才能使用。血液中的蛋白质容易粘附在电极表面,必须经常按血液缓冲液水空气的顺序进行清洗。亦可用随机附送的含蛋白质水解酶的清洗液或自配的0.1%胃蛋白酶盐酸溶液浸泡30分钟以上,用生理缓冲液洗净后浸泡备用。若清洗后仍不能正常工作,应更换电极。第十一章 流式细胞技术与流式细胞仪1. 流式细胞仪:是以激光为光源,集流体力学、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术、细胞荧光化学和单克隆抗体等技术为一体的新型高科技仪器。2. 流

30、式细胞术:应用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的生物颗粒进行快速的、多参数的定量分析和分选的技术。3. 狭缝扫描流式细胞仪:被检细胞直径大于激光光斑直径,当细胞通过光束时,细胞各部分被依次先后扫描,得到一维的细胞轮廓组方图,可计算出细胞直径大小、核直径大小、核浆比例等一系列的形态学信息的流式细胞仪。4. 鞘液流:流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕样品流的流束。5. 侧向角散射:侧向角散射是指与激光束正交90o方向的散射信号。6. 长通滤光片:能使特定波长以上的光通过,特定波长以下的光不能通过的滤光片。7. 短通滤光片:与长通滤光片相反,特定波长以下的光通过,特定波长以上的光被吸收或

31、返回。8. 带通滤光片:带通滤光片允许一定波长范围内的光通过,一般滤光片上有两个数值,一个为允许通过波长的中心值,另一个为允许通过光波段的范围。9. 细胞自发荧光:细胞自身在激光照射下发出微弱的荧光信号。10. 零分辨率的流式系统:一般流式细胞仪的激光光斑为椭圆形,光斑直径大于被检细胞体积,只能提供细胞内某种生物化学成分的参数,不能对细胞形态以亚细胞形态进行分辨,所以称之为零分辨率的流式系统。11. 分选收获率:指被分出的细胞占原来溶液中该细胞的百分比。12. 分选速度:指每秒可提取所要细胞的个数。13. 分选纯度:指要分选的目的细胞占分选出细胞的百分比。1. 简述流式细胞仪生物学颗粒分析原理

32、。答:经特异荧光染料染色后的样品沿流动室的轴心向下流动,流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕细胞悬液的鞘液流,鞘液和样品流的喷嘴附近组成一个圆柱流束,与水平方向的激光束垂直相交。染色的细胞受激光照射后发出荧光,这些信号分别被光电倍增管接收,经过计算机储存、计算、分析这些数字化信息,就可得到细胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性质等物理和生化指标。 2. 对BCA进行评价的指标有哪些?答:在细胞计数、血红蛋白测定方面,主要评价仪器测试样本的总变异、携带污染率、现行范围、可比性和准确性等,这对保证检验质量讲起主要作用。3. 如何对BCA进行分类?答:按自动化程度分半自动血细胞分析仪、全自动

33、血细胞分析仪、血细胞分析工作站、血细胞分析流水线;按检测原理分电容型、光电型、激光型、电阻抗型、联合检测型、干式离心分层型、无创型;按对白细胞的分类水平分二分群、三分群、五分群、五分群+网织红BCA。4. 流式细胞仪依据什么进行分类?各类型有什么特点?答:流式细胞仪根据功能不同可分为临床型和科研型。临床型只有分析功能,没有分选功能,仪器的光路调节系统固定,自动化程度高,操作简单,易学易掌握。科研型既有分析功能又有分选功能,可加速将所感兴趣的细胞分选出来,并可将单个或指定个数的细胞分选到待定的容器里,同时可选配多种波长和类型的激光器,适用于更广泛更灵活的科学研究。流式细胞仪根据其结构不同又可分为

34、一般流式细胞仪和狭缝扫描流式细胞仪。前者的激光光斑为椭圆形,光斑直径大于被检细胞体积,只能提高那个细胞内某种生物化学成分的参数,不能对细胞形态和亚细胞形态进行分辨。狭缝扫描流式细胞仪是一种高分辨率的检测仪器,被检细胞直径大于激光光斑直径,细胞通过光束时各部分被依次扫描,根据荧光信号的先后,就可得到一维的细胞轮廓组方图,可计算出细胞直径大小、核直径大小、核浆比例等一系列的形态学信息。5. 简述联合检测型BCA白细胞分类计数的实质和共有特点。答:实质是选用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点:均使用了鞘流技术,将细胞重叠限制到最低限度。6. 联合检测型BCA在

35、白细胞分类上主要有哪些技术?答:联合检测型BCA在白细胞分类技术上主要有:(1)容量、电导。光散射联合检测技术;(2)电阻抗、射频与细胞化学联合检测技术;(3)多角度激光散射、电阻抗联合检测技术;(4)光散射与细胞化学检测技术。7. 流式细胞仪所检测的信号有哪些?这些信号代表的意义和作用是什么?答:流式细胞仪所检测的信号有散射光和荧光信号。(1) 散射信号:散射光分为前向角散射和侧向角散射,两个参数组合,可区分经裂解红细胞处理后外周血白细胞中淋巴细胞、单核细胞和粒细胞三个细胞群体,或在未进行裂解红细胞处理的全血样品中找出血小板和红细胞等细胞群体。(2) 荧光信号:一种是细胞自身在激光照射下发出

36、微弱的荧光信号,另一种是经过特异荧光素标记细胞后,受激发照射得到的荧光信号,通过对这类荧光信号的检测和定量分析能了解所研究细胞的存在和定量。7. 光学法血凝仪从光路结构上分哪几类?答:根据仪器光路结构的不同又可分为散射比浊法和透射比浊法:(1)散射比浊法:根据待测样品在凝固过程中散射光的变化来确定凝固终点;其光源、样本、接收器成直角排列;接收器得到的完全是浊度测量所需的散射光。(2)透射比浊法:根据待检样品在凝固过程中吸光度的变化来确定凝固终点;其光源、样本、接收器成一直线排列;接后期得到的事很强的透射管不光合较弱的散射光。第12章 血液分析技术与相关仪器1. 血细胞分析仪:指对一定体积全血内

37、血细胞异质性进行自动分析的临床常规检验仪器。2. VCS技术中V、C、S各代表什么意思:V代表体积,采用电阻抗进行血细胞计数和体积测量;C代表电导,依据细胞可影响高频电流传导的特性,采用高频电磁探针测量细胞内部结构,细胞内核浆比例,质粒的大小和密度,从而区别体积完全相同而性质不同的两个细胞;S代表光散射,对细胞颗粒的构型和颗粒质量有较强的鉴别能力,通过测定单个细胞的散射光强度把粒细胞分开。1. 血细胞分析仪BCA的概念及功能是什么?答:概念:指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床常规检验仪器。主要功能:血细胞计数;白细胞分类;血红蛋白测定;相关参数计算。2. 简述电阻抗(库尔特)血细

38、胞检测原理。答:血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体,其电阻值大于稀释溶液的电阻值;血细胞通过检测器的孔径感受区时,检测器内外电极之间的恒流源电路的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号;脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞大小成正比。3. 简述电阻抗血细胞分析技术的应用及其特点。答:应用:白细胞计数和分群、血小板计数、红细胞平均体积和血小板平均体积测定及获得其他相关参数等。缺点:(1)白细胞分类计数不特异;(2)技术所限,影响红细胞有关参数的准确性;(3)血小板计数的干扰因素多;(4)不易发现异常细胞。4. 简述电阻抗型BCA和联合检测型BCA的基本结构。答:基本结构:主要由

39、机械系统、电学系统、血细胞检测系统、血红蛋白测定系统、计算机和键盘控制系统以不同形式的组合而构成。5. 联合检测型BCA在白细胞分类上主要有哪些技术?答:联合检测型BCA在白细胞分类技术上主要有:(1)容量、电导、光散射联合检测技术;(2)电阻抗、射频和细胞化学联合检测技术;(3)多角度激光散射、电阻抗联合检测技术;(4)光散射与细胞化学检测技术。6.血凝仪常用检测原理有哪些?答:血凝仪常用的检测原理主要:有凝固法、底物显色法、免疫学方法、干化学技术法检测原理等。凝固法原理是最基本、最常用的方法。7.简述血凝仪光学法检测原理。答:光学法属凝固法的一种;是利用一束光线通过样品杯,样品杯中的血浆在

40、凝固过程中导致血浆浊度发生变化;投射光或散射光的强度也发生改变;仪器根据光强度的变化来判断血浆凝固终点的检测方法称为光学法检测原理。8.简述双磁路磁珠法的测定原理。答:属词磁电检测原理。在测试杯德两侧各有一组驱动线圈,它们产生恒定的交替电磁场,使测试杯内特质的去磁小钢珠保持等幅震荡运动;凝血激活剂加入后,随着纤维蛋白的增多,小钢珠的运动振幅逐渐减弱;另一组测量线圈感应到小钢珠运动的变化;仪器将运动幅度衰减到50%时确定为凝固终点。9.简述凝固法与免疫学方法中的透射比浊、散射比浊的区别。答:凝固法是检测血浆在凝固过程中所致一系列物理量的变化,来反映相关因子的活性,也称生物物理法。凝固法中的透射比

41、浊、散射比浊是根据血浆中的纤维蛋白原逐渐转变成纤维蛋白,导致血浆浊度发生变化,进行光电比浊测定。而免疫学方法中的透射比浊。安设比浊虽属光电比浊原理的光学法,但有抗原抗体参与。前者是血浆凝固过程中纤维蛋白形成所致的浊度,后者是相应的抗原抗体反应形成的复合物所致的浊度。10.血凝仪光学法与双磁路磁珠法主要区别及优缺点是什么?答:主要区别在于:前者是检测血浆凝固过程中光信号的变化,后者是检测该过程中磁电信号的变化。光学法血凝仪测试的优点在于灵敏度高、仪器结构简单、易于自动化。缺点是样本的光学异常、测试杯的光洁度、加样中的气泡等都会成为测量的干扰因素。双磁路磁珠法不受溶血。黄疸、高血脂症及气泡的严重影

42、响;该法有利于血浆和试剂的充分混匀。11.简述半自动和全自动血凝仪的基本结构。答:半自动血凝仪的基本结构:主要由样本和试剂预温槽、加样器、检测系统(光学、磁场)及微机组成。全自动血凝仪基本结构包括:样本传送及处理装置、试剂冷藏位、样本及试剂分配系统、检测系统、计算机、输出设备及附件等。12.简述全自动血凝仪的主要特点及其维护与保养。答:主要特点(1)自动化程度高;(2)检测方法多;(3)速度快;(4)项目任意组合,随机性;(5)测量精度好,易于质控和标准化;(6)智能化程度高,功能多;(7)价格昂贵;(8)对操作人员的素质要求高。维护和保养:(1)清洗或更换空气过滤器;(2)检查及清洁反应槽;

43、(3)清洗洗针池及通针;(4)检查冷却剂液面水平;(5)清洁机械导杆和转动部分并钾润滑油;(6)即使保养定量装置;(7)更换样品及试剂针;(8)数据备份及恢复等。13.简述血凝仪的临床应用。答:临床应用主要有:(1)凝血系统的检测,常规筛选实验和单个凝血因子含量及活性的测定。(2)抗凝系统的检测。(3)纤维蛋白溶解系统的检测。(4)临床用药监测等。14.简述毛细管黏度计的工作原理与基本结构。答:毛细管黏度计是依据牛顿流体遵循泊肃叶定律而设定的。即一定体积的液体,在恒定的压力驱动下,流过一定管径的毛细管所需的时间与黏度成正比。基本结构:包括毛细管、储液池、控温装置、计时装置等。15. 简述旋转式

44、黏度计的工作原理与基本结构。答:以牛顿粘滞定律为理论依据。锥板式黏度计是同轴锥板构型,平板和锥体间充满被测样本;调速电机带动圆形平板同速旋转;当圆形平板以某一恒定角速度旋转时,转动的力矩通过被测样本传递到锥体;样本越黏稠,传入的力矩越大。当此力矩作用用锥体时,立即被力矩传感装置所俘获,其信号大小与样本黏度成正比。 基本结构:包括样本传感器、转速控制与调节系统、力矩测量系统、恒温系统。16. 毛细管黏度计有何特点?答:价格低廉、操作简单、速度快、易于普及;测定牛顿流体黏度结果可靠,使用血浆、血清样本测定;难以反映全血等非牛顿流体的黏度特性;全血在毛细管中的不同部位,剪切率不一样,黏度亦不一样;不

45、能直接检测某一剪切率下的表观黏度;对进一步研究RBC、WBC的变形性和血液的粘弹性等也无能为力。17. 旋转式黏度计有何特点?答:能提供所需不同角度下的剪切率;在被测液体中各流层的剪切率一致,使液体在剪切率一致的条件下做单纯的定向流动;可以定量的了解血液、血浆的流变特性,RBC与WBC的聚集性、变形性、时间相关性等很多流变特性。操作使用较为简单,是目前血液流变学研究和应用较为理想的仪器。但价格较毛细管黏度计要贵一些,操作要求也更精细一些。18. 什么情况下需对黏度计进行非技术性能评价?指标有哪些?答:性能评价在仪器安装、维修及使用一定时间后,至少每半年,应对仪器准确度、分辨率、重复性、灵敏度与

46、量程进行一次检验。第十三章 尿液分析技术和相关仪器1. 年沉渣细胞的识别分析:仪器通过对前向散射光波形(散射光强度和散射光脉冲宽度)前向荧光波形(荧光波段和荧光脉冲宽度)和电阻抗值的大小综合分析,得出细胞的形态、细胞截面面积、染色片段的长度、细胞容积等信息并绘出直方图和散射图。仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来对其进行分类。2. 试剂带的反射率:R=R试纸/R空白=TmCs/(TsCm)*100%Tm为试纸块对测量波长的反射强度,Ts为试纸块对参比波长的辐射强度。Cs为空白对测量波长的反射强度,Cm为空白对参比波长的反射强度。3. 尿11项分析仪:可以检测包括尿蛋白、尿pH、尿酮体、尿胆红质

47、、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C的尿液分析仪。1. 尿液分析仪是如何进行分类的?答:尿液分析仪按工作方式可分为湿式尿液分析仪和干式 尿液分析仪。其中干式尿液分析仪主要着眼于自动评定干试纸法的测定结果,因其结构简单、使用方便,目前临床普遍应用。 尿液按测试项目的数量可分为8项尿液分析仪、9项尿液分析仪、10项尿液分析仪、11项尿液分析仪和12项尿液分析仪。 检测项目包括尿蛋白、尿葡萄糖、尿pH、尿酮体、尿胆红质、尿胆原、尿潜血、亚硝酸盐、尿白细胞、尿比重、维生素C和浊度。 尿液分析仪按自动化程度可分为半自动尿液分析仪和全自动尿液分析仪。2. 简述试剂带结构。答:采用了多层膜

48、结构,第一层尼龙膜起保护作用,防止大分子物质对反应的污染;第二层绒制层,包括碘酸盐层和试剂层,碘酸盐层可破坏维生素C等干扰物质,试剂层含有试剂成分,主要与尿液中所测定物质发生化学反应,产生颜色变化;第三层是固定有试剂的吸水层,可使尿液均匀快速地浸入,并能抑制尿液流到相邻反应区;最后一层选取尿液不浸润的塑料片作为支持体。3. 尿液分析仪的检测原理是什么?答:把试剂带浸入尿液中后,出了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化。试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小,反射率也越小。反之,反射率越大。即颜色的深浅

49、与光的反射率成比例关系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系。所以只要测得光的反射率即可以求得额尿液中各种成分的浓度。4. 简述尿液分析仪的结构。答:尿液分析仪一般由机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。5. 现代尿液分析仪的光学系统有几种?答:有三种。滤光片分光系统:采用光源灯(卤灯)发出的白光通过球面积分仪的通光筒照射到试剂带上,试剂带把光反射到球面积分仪中,透过滤色片,得到特定波长的单色光,照射到光电二极管、上,实现光电转换。LED系统:采用了可发射特定波长的发光二极管(LED)作为检测光源,两个检测头上都有三个不同波长的光电二极管,对应于试剂带的检测项目分别为红、橙、绿单色

50、(660nm、620nm、555nm),它们相对于检测面以60o照射在反应区上。作为光电转换器件的光电二极管垂直安装在反应区的上方,在检测光照射的同时接收反射光。CCD系统:采用了目前比较简短的光学元件CCD技术进行光电转换。它们把反射光分解为红绿蓝(RGB:610nm、540nm、460nm)三原色,又将三原色的每一种颜色分为2592色素,这样整个反射光分为7776色素,可精确分辨颜色由浅到深的各种微小变化。CCD的基本单元是MOS(金属氧化物半导体),当光照射到CCD硅片上时,在栅极附近的半导体内产生电子空穴对,其多数载流子被栅极电压排开,少数载流子则被收集在势阱中形成信号电荷。将一定规则

51、变化的电压加到CCD各电极上,电极上的电子或空穴(信号电荷)就能沿着半导体表面按一定方向移动,形成电信号。6. 尿沉渣分析仪由几大类型?答:迄今为止尿沉渣分析仪大致有两类,一类是通过尿沉渣直接镜检再进行影像分析,得出相应的技术资料和实验结果;另一类是流式细胞术分析。7. 简述流式细胞术尿沉渣分析仪的结构。答:它包括光学检测系统、液压系统、电阻抗检测系统和电子系统。8. 简述流式细胞术尿沉渣分析仪的工作原理。答:测定是应用流式细胞术和电阻抗的原理进行的。当一个尿液标本被稀释并经染色、染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。反应样品从样品喷嘴出口浸入鞘液流动室时,被一种无粒子颗粒的鞘液包围,使每个细胞以

52、单个纵列的形式通过流动池的中心(竖直)轴线,在这里每个尿液细胞被氩激光光束照射。每个细胞有不同程度的荧光强度、前向散射光强度和电阻抗的大小。仪器将这种荧光、散射光等信号转变成电信号,并对各种信号进行分析,最后得到每个尿液标本产生出的直方图和散射图。通过分析这些图形,即可区分每个细胞并得到有关细胞形态。9. 尿沉渣分析仪的安装、使用注意事项是什么?答:(1)安装。仪器必须安装在通风好,远离电磁干扰源、热源,防止阳光直接照射,防潮的稳定水平实验台上(最好是水泥台上)。环境大小应适宜,仪器两侧至少有0.5m空间,仪器后面最少有0.2m空间。最好安装在有空调装置的房间内(室内温度为15oC30oC,最

53、适温度为25oC相对湿度应为30%85%)。(2) 使用和注意事项。安装新仪器时或每次仪器大维修之后,必须对仪器技术性能进行调试,这对保证检验质量起着重要的作用。全自动尿沉渣分析仪的鉴定必须由仪器制造公司的工程师来进行。每天开机前,操作者要对仪器的状态进行全面检查,确认无误后方可开机。开机时严格按说明书进行操作,仪器先进行自检,自检通过后,仪器再进行自动冲洗并检查本底。本底检测和质控通过后,方可进行样品测试。 下列情况应禁止上机测试:(1) 尿液标本血细胞数2000/l时,会影响下一个标本的测定结果;(2) 尿液标本使用了有颜色的防腐剂或荧光素,可降低分析结果的可信性;(3)尿液标本中有较大颗

54、粒的污染物,可引起仪器阻塞。10. 简述UD自动染色鸟车闸分析仪的主要功能和特点。 答:(1)仪器定量准确,具有极高的重复性;(2)系统自动化、智能化程度高,具备灵活的操作方式;(3)克服了不染色方法易误认、漏检的缺点,提高了典型沉渣成分的检出率;(4)符合标准化要求,克服认为因素后,使尿沉渣分析达到尿沉渣分析的规范化、标准化的要求;(5)安全洁净,减少了对实验室及操作人员的污染;(6)智能控制,软件功能强大,可全面好i先人机对话;(7)功能齐备,人性化设计,环保节约、易于摆放和观察。11. 自动尿液分析质控物选择的要求有哪些?答:对质控物的要求必须达到以下几点(1)质控物应成分稳定,批内分装

55、均匀,易于保存和运输,复溶后成分无变化。(2)选择质控物时,最好使用多项复合控制品。有条件的实验室最好同时好使用高、低两个值的质控物。也有人利用红细胞、白细胞醛化固定,霉菌孢子固定,作为有形成分的质控物。(3)在一天内做质控时最好使用同一份质控物,并采用高、低两种质控物对照。(4)根据各实验室的具体亲狂每天或隔日随机做质控检测,使用不同批号的试剂带钱均需做质控,并对仪器进行校正。(5)质控物的测定结果哟与某些原因超出质控要求的范围表示失控,则需从检查试剂带、质控物、校准仪器等方面查找原因。第15章 自动生化分析技术和相关仪器1. 后分光:即光源光线直接透过样品,提供过光栅,再进行吸光度的检测,

56、可连续检测不同波长的反应。2. 全息反射式光栅:是在玻璃上覆盖一种金属膜后制得的光栅,有一定相差,易被腐蚀。3. 蚀刻式凹面光栅:是将所选波长固定刻在凹面玻璃上,无相差,抗腐蚀,耐磨损,是目前最先进的全息光栅。4. 比例泵:是连续流动式自动生化分析仪结构的一部分,提供使样品在仪器内进行运动的压力以及向流经管道的液体注入空气。5. 同步分析:离心式自动生化分析仪在整个分析过程中,样品与试剂的混合、反应与检测等每一步骤,几乎都是同时完成的,称为同步分析。1. 根据不同分类标准,可将自动生化分析仪分成哪些类型?答:根据仪器反应装置结构不同,可分为连续流动式、离心式、(严格讲也属于分立式范畴)、分立式

57、和干片式。根据仪器的功能及复杂程度,可分为小型、中性、大型及超大型。根据同时可测定项目数量不同,可分为单通道和多通道,单通道每次只能检测一个项目,多通道可同时检测多个项目。根据自动化程度不同,可分为全自动化和半自动化。2. 何谓胶囊化学技术?有何特点?答:即使用一种惰性氟甲烷液与样品和试剂同时吸到分析管中,在管道中形成一个封闭的壳,样品与试剂包在其中,形成测试胶囊,并借助于吸进去的空气泡和蠕动泵的推动作用,使胶囊中的样品和试剂混合,不断流动的胶囊,经保温和化学反应后,在一定的测定站进行光学检测,完全克服交叉污染。3. 离心式自动生化分析仪的工作原理是什么?答:是将样品和试剂放在特制圆形反应器内

58、,当离心机开动后,圆形反应器内的样品和试剂受离心力的作用相互混合发生反应,经过一定不过时间的温育后,反应液最后流入圆形反应器外圈的比色凹槽内,垂直方向的单色光通过比色孔进行比色,最后计算机对所得吸光度进行计算,显示结果并打印。4. 什么是“顺序式”分析?答:分立式自动生化分析仪按手工操作的方式编排程序,并以有序的机械操作代替手工操作,用加样探针将样品加入各自的反应杯中,试剂探针按一定时间自动定量加入试剂,经搅拌器充分混匀后,在一定条件下反应。反应杯同时作为比色杯进行比色测定。各环节用传送带连接,按顺序依次操作,故称为“顺序式”分析。5.连续流动式和分立式自动生化分析仪在结结构上有哪些区别?答:

59、分立式与连续流动式自动生化分析仪在结构上的主要区别为:前者各个样品和试剂在各自的试管中 起反应,而后者是在统一管道中起反应;前者采用由加样器和加液器组成的稀释器来加样和加试剂,而不用比例泵;前者一般没有透析器,如要除蛋白质等干扰,需另行处理。前者恒温器必须能容纳需保温的试管和试管架,所以比连续流动式分析仪的体积要大。6.自动生化分析仪的性能指标有哪些?请简要说明。答:自动生化分析仪的性能指标包括:自动化程度:是指仪器能够独立完成生物化学检测操作程序的能力;分析效率:是指在分析方法相同的情况下,自动生化分析仪的分析速度,取决于一次测定中可测样品的多少和可测项目的多少;应用范围:是衡量自动生化分析

60、仪的一个综合指标,与仪器的设计原理及结果有关;分析准确度:是提供实验分析结果的精密度和准确度的基础。此外,自动生化分析仪的取液量,最小反应体积等也是衡量其性能的指标之一。7.何谓后分光光路系统?有何特点?答:后分光的光路是光源样品分光元件检测器,即光源光线直线透过样品,通过光栅,再进行吸光度的检测。使用后分光技术,可以在同一体系测定多种成分。无需移动仪器的任何部分,早杀鞥低,分析精确度和准确度高,故障少。第十六章 免疫分析技术和相关仪器1. 酶免疫分析技术:利用酶的高效催化和放大作用于特异性免疫反应结合而建立的一种标记免疫技术2. 散射免疫浊度法:一束光线通过溶液时受到光散射和光吸收两个因素的

61、影响而使光的强度减弱。在5o96o角的方向上测量散射光强度和被测溶液中微粒浓度关系的方法。3. 发光免疫分析技术:利用化学发光现象,根据物质发光的不同特征,即辐射光波长、发光的光子数,与产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关,通过受激分子发射的光谱、发光衰减常数、发光方向等来判断分子的属性及发光强度进而判断物质的量的免疫分析技术。1. 简述酶免疫分析EIA技术的分类。答:酶免疫分析技术按实际用途,可分为酶免疫组化和酶免疫测定两大类;按抗原抗体反应后是否需将结合的和游离的酶标记物分离,可分为均相酶免疫分析和非均相酶免疫分析两种方法。异相酶免疫测定又可分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定

62、。2. 简述酶标仪的基本工作原理:是分光光度法,按照比色原理分析抗原或抗体的含量。3. 酶标仪的性能评价指标有:滤光片波长精度检查及其峰值测定灵敏度和准确度、通道差与孔间差检测、零点漂移、精密度评价、线性测定、双波长评价等。4. 简述化学发光免疫分析原理。答:化学发光分析是用化学发光剂直接标记的开元宝或抗体与待测标本中相应可以或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,然后在结合状态部分中加入发光促进剂济宁发光反应,通过对结合状态发光强度的检测进行定量或定性检测。5. 简述电化学发光免疫分析原理。答:电化学发光免疫分析是电化学发光和免疫测定相结合的

63、技术,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际包括了电化学和化学发光两个过程。ECL是电启动发光反应。化学发光剂三联吡啶钌Ru(bpy)2+标记抗体,通过抗原抗体反应和磁颗粒分离技术,根据三联吡啶钌在电极上发出的光强度的大小对待测的抗原或抗体进行定量或定性检测。6. 简述免疫浊度测定的基本原理和基本分类。答:基本原理:将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。当可溶性抗原与相应的抗体特异结合,在二者比例合适、并有一定浓度的电解质存在时,可以形成不溶性的免疫复合物,使反应液出现浊度。这种浊度可用肉眼或仪器测知,并可通过浊度推算出复合物的量,即可测定抗原或抗

64、体的量。基本分类:按测量方式可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。按测定速度可分为速率比浊法和终点比浊法。7. 散射免疫比浊法的基本原理是什么?答:沿水平轴照射的一定波长的光,在通过溶液时,光线可被其中的免疫复合物粒子颗粒折射,发生偏转,产生散射光。根据Rayleigh散射方程,散射光强度与粒子(免疫复合物)的浓度和体积成正比,通过测量散射光的强度,可计算出待测抗原的浓度。8. 免疫浊度分析法优点:校正曲线稳定,简便快速,易于自动化,无放射性核素污染等。第17章 PCR进扩散仪1. PCR技术:通过加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下引物同模板DNA杂交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和适合pH缓冲液存在条件下延伸引物,重复上述过程至2540个循环,达到体外扩增核酸序列的目的。2. TaqDNA聚合酶:一种从嗜热水生菌分离得到的热稳

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