实验诊断学.ppt

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1、实验诊断学总论实验诊断学-总论一检验医学在医学领域的地位二检验医学的范畴三检验医学的重要技术和主要设备四 检验医学与临床一 检验医学在医学领域的地位1 1 从从医学检验医学检验到到检验医学检验医学是把检验技术与诊断是把检验技术与诊断功能紧密结合观念上和认识上予以法制化功能紧密结合观念上和认识上予以法制化2 2 从从辅助科室辅助科室到到诊断科室诊断科室成为临床医学发展的成为临床医学发展的双翼只之一双翼只之一3 3 检验医学的检验医学的五大职能五大职能一 检验医学在医学领域的地位REVEAL原发性肝癌与 HBV-DNA 载量Chen CJ et al JAMA 2006;295:肝硬化发生率随肝硬

2、化发生率随HBV DNAHBV DNA水平升高而上升水平升高而上升趋势检验趋势检验P0.001n=3582Uchenna H.Iloeje et al GASTROENTEROLOGY 2006;130:678686一 检验医学在医学领域的地位w按照卫生部认可的项目分为五大类，包括按照卫生部认可的项目分为五大类，包括：w一一.临床体液、血液专业；临床体液、血液专业；w二二.临床化学检验专业；临床化学检验专业；w三三.临床免疫、血清学专业；临床免疫、血清学专业；w四四.临床微生物学专业；临床微生物学专业；w五五.临床细胞分子遗传学专业。临床细胞分子遗传学专业。w共计共计1104个大项目个大项目（

3、一）临床生物化学：蛋白质蛋白质、肝病诊断肝病诊断、肾脏疾病诊断肾脏疾病诊断、无机物及血气分析无机物及血气分析、维生素、氨基酸等维生素、氨基酸等 心肌病及其他酶类心肌病及其他酶类、 糖及其代谢物糖及其代谢物、 血脂及脂蛋白血脂及脂蛋白、 激素和骨质疏松激素和骨质疏松（二）临床免疫：二）临床免疫：免疫功能：细胞免疫和体液免疫免疫功能：细胞免疫和体液免疫（三）临床血液及体液： 临床和基础研究的重要手段之临床和基础研究的重要手段之一。一。一、前导技术是分子生物学技术一、前导技术是分子生物学技术 二、生物芯片技术二、生物芯片技术三、自动化与信息技术三、自动化与信息技术 四、生物传感器技术四、生物传感器技

4、术 五、标记免疫分析技术五、标记免疫分析技术 w该技术将渗入并推动着医学检验的各学科该技术将渗入并推动着医学检验的各学科生生化、血液、免疫、微生物及血库、解剖病理的发化、血液、免疫、微生物及血库、解剖病理的发展。换言之，各学科均需应用分子生物学技术。展。换言之，各学科均需应用分子生物学技术。 w实验室医学中的分子生物学技术主要是多种形式实验室医学中的分子生物学技术主要是多种形式的体外基因扩增技术，其主要代表是聚合酶链反的体外基因扩增技术，其主要代表是聚合酶链反应应(PCR)(PCR)。w定量定量PCRPCRwPCRPCR的全自动化的全自动化 w人类基因组工程；人类基因组工程；w遗传性疾病的产前

5、诊断；遗传性疾病的产前诊断；w各种病原体各种病原体( (病毒、细菌、真菌、支原体、立克次病毒、细菌、真菌、支原体、立克次体、螺旋体等体、螺旋体等) )的诊断，尤其适用于不能进行人工的诊断，尤其适用于不能进行人工培养的病原体；培养的病原体；w癌基因、抑癌基因的检出；癌基因、抑癌基因的检出； w发现各种疾患与基因的联系以寻求致病基因及易发现各种疾患与基因的联系以寻求致病基因及易感基因，实现症状前诊断；感基因，实现症状前诊断；特征与优点特征与优点微型化高通量提高信息量平行化提高信息的可比性微量化降低待检样品用量自动化提高工作效率低成本可迅速普及推广点样密度高点样密度高 杂交体积小，只需杂交体积小，只

6、需20 20 L L左右，灵左右，灵敏度高敏度高 用双色荧光标记两种探针，数据用双色荧光标记两种探针，数据可靠性高可靠性高 更易自动化，包括点样，杂交，更易自动化，包括点样，杂交，图象处理及数据采集等方面图象处理及数据采集等方面BIO-RADBIO-RAD共聚焦显微镜共聚焦显微镜 用于观测芯片反应结果用于观测芯片反应结果AXON芯片扫描系统芯片扫描系统用于芯片反应的荧光信号扫读用于芯片反应的荧光信号扫读基因芯片基因芯片基础研究基础研究农业农业药物筛选药物筛选军事军事医学研究医学研究临床诊断临床诊断司法司法环境保护环境保护. 环境监测 水质监测 农业植物 环境检测 军事科学 人类健康 药物筛选

7、检验医学 生物芯片应用 什么是遗传基因检测？什么是遗传基因检测？ w简单的说所谓基因检测，就是取被检测简单的说所谓基因检测，就是取被检测者的一滴血，通过基因芯片健康检测卡者的一滴血，通过基因芯片健康检测卡对被检测者细胞中的对被检测者细胞中的 DNA 相应分子做检相应分子做检测，分析他所含有的各种疾病易感基因测，分析他所含有的各种疾病易感基因的情况，从而使人们能及时了解自己的的情况，从而使人们能及时了解自己的基因信息，预测身体患疾病的风险，从基因信息，预测身体患疾病的风险，从而改善自己的生活环境和生活习惯，让而改善自己的生活环境和生活习惯，让自己活得明明白白。自己活得明明白白。 基因芯片检测的内

8、容基因芯片检测的内容 ? w所检测的疾病易感基因共四类，联合基因公司还将所检测的疾病易感基因共四类，联合基因公司还将不断推出针对新的疾病种类的易感基因的检测，更不断推出针对新的疾病种类的易感基因的检测，更好地为人类服务。好地为人类服务。 A类：人工性慢性寻麻疹、尖锐湿疣、肾癌、风湿类：人工性慢性寻麻疹、尖锐湿疣、肾癌、风湿性瓣膜病、原发性肝细胞癌、增殖性玻璃体视网膜性瓣膜病、原发性肝细胞癌、增殖性玻璃体视网膜病变、强直性脊椎炎、溃疡性结肠炎病变、强直性脊椎炎、溃疡性结肠炎B类：乙肝疫苗的无免疫应答、儿童急性白血病、类：乙肝疫苗的无免疫应答、儿童急性白血病、白塞氏病、尖锐湿疣、前葡萄膜炎、结核病

9、、骨肉白塞氏病、尖锐湿疣、前葡萄膜炎、结核病、骨肉瘤、原发性高血压、溃疡性结肠炎、慢性荨麻疹瘤、原发性高血压、溃疡性结肠炎、慢性荨麻疹 基因芯片检测的内容基因芯片检测的内容 ? C类：环境致癌物导致肿瘤的易感基因检测类：环境致癌物导致肿瘤的易感基因检测 D类：类：Graves病（弥漫性甲状腺肿伴甲状腺功能病（弥漫性甲状腺肿伴甲状腺功能亢进）、慢性粒细胞性白血病、系统性红斑狼亢进）、慢性粒细胞性白血病、系统性红斑狼疮、原发性肝癌、疮、原发性肝癌、I型糖尿病、型糖尿病、Vogt-Koyanagi-Harada 综合症（小柳综合症（小柳-原田综合症）、类风湿原田综合症）、类风湿性关节炎、原因不明性习

10、惯流产、慢性肾小球性关节炎、原因不明性习惯流产、慢性肾小球肾炎、激素敏感型肾病、肾炎、激素敏感型肾病、 肾癌、肾癌、 骨关节结核、骨关节结核、 乙肝疫苗的无免疫应答、非霍奇金淋巴瘤、乙肝疫苗的无免疫应答、非霍奇金淋巴瘤、 慢慢性乙肝、膀胱癌、慢性肾小球肾炎尿毒症、非性乙肝、膀胱癌、慢性肾小球肾炎尿毒症、非Iga系膜增生性肾炎系膜增生性肾炎病原体检验与血清学检验病原体检验与血清学检验抗体产生抗体产生病原体病原体 侵入并繁殖侵入并繁殖 芯片实验室芯片实验室v芯片实验室的建立 w大型自动分析仪大型自动分析仪(universal automated instrument)(universal auto

11、mated instrument)可同时可同时做生化、血液、免疫、药物等项目做生化、血液、免疫、药物等项目w精细的、多用途分析系统如毛细管电泳技术，将改精细的、多用途分析系统如毛细管电泳技术，将改变检验科现存的专业分工并推动实验室的全自动化变检验科现存的专业分工并推动实验室的全自动化w机器人的应用机器人的应用w人工智能人工智能( (专家系统、医学诊断系统专家系统、医学诊断系统) )w国际互联网国际互联网(Internet)(Internet)将实现实验室间；实验室与临将实现实验室间；实验室与临床，医院间；区、市、省间；国际间信息交换床，医院间；区、市、省间；国际间信息交换w远程的实验室诊断系统

12、远程的实验室诊断系统(telepathology(telepathology) ) w生物传感器的种类包括离子选择电极生物传感器的种类包括离子选择电极(ISE)(ISE)、气敏电极、场效应转换器、酶电极、压电气敏电极、场效应转换器、酶电极、压电晶体、热量计、表面质子共振晶体、热量计、表面质子共振(SPR)(SPR)、免疫、免疫传感器、酶免疫传感器等，其在检验中的传感器、酶免疫传感器等，其在检验中的应用，可测定离子、气体、底物、酶、有应用，可测定离子、气体、底物、酶、有机物、代谢物、抑制物、污染物、抗生素、机物、代谢物、抑制物、污染物、抗生素、维生素、维生素、pHpH等。生物传感器与芯片的应用等

13、。生物传感器与芯片的应用将使检验仪器小型化、灵活而多用途。将使检验仪器小型化、灵活而多用途。 w其发展趋向是：新标记物的发展与联合应其发展趋向是：新标记物的发展与联合应用；单克隆以及基因工程抗体的应用和免用；单克隆以及基因工程抗体的应用和免疫放大技术，可明显提高检测的特异性，疫放大技术，可明显提高检测的特异性，敏感性可达敏感性可达Zepto(10Zepto(10-21-21) )，yocto(10yocto(10-24-24) )水平，水平，1.7yocto1.7yocto1 1分子，即可实现分子水平的检测。分子，即可实现分子水平的检测。 w 将从研究实验室走入临床实验室，此项技术主要将从研究

14、实验室走入临床实验室，此项技术主要用于监测人体细胞免疫状态，进行组织配型及监控用于监测人体细胞免疫状态，进行组织配型及监控移植物的排斥反应，血液系统疾患的检查与分型，移植物的排斥反应，血液系统疾患的检查与分型，血栓与止血缺陷的检查，细胞血栓与止血缺陷的检查，细胞DNADNA定量与细胞周期定量与细胞周期分析以鉴定肿瘤细胞及评价化疗效果，检测细胞凋分析以鉴定肿瘤细胞及评价化疗效果，检测细胞凋亡，检测细胞特异性标记物如受体等，检测细菌对亡，检测细胞特异性标记物如受体等，检测细菌对抗菌药物的耐药性。抗菌药物的耐药性。 实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w一一.血细胞分析仪血细

15、胞分析仪: 库尔特原理库尔特原理:根据血细胞非传导性的性质根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础时引起的电阻变化进行检测为基础,称为称为电阻电阻抗法抗法.在库尔特原理的基础上在库尔特原理的基础上1987年年Coulter公司又发明了公司又发明了VCS技术技术,体积体积(Volume,V),电电导法导法(conductivity,C),光散射光散射(light scatter,S)，对未经处理的血细胞进行白细胞，对未经处理的血细胞进行白细胞五分类（包括幼稚细胞）、五分类（包括幼稚细胞）、-淋巴细胞免疫淋

16、巴细胞免疫分型及网织红细胞计数等功能。分型及网织红细胞计数等功能。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w一一.血细胞分析仪血细胞分析仪:wAbbott公司生产的公司生产的CD-3500，CD-4000又发明了又发明了“多角度偏振光散射白细胞分类技术多角度偏振光散射白细胞分类技术”（ Multi-Angle Polarised Scatter Separation of White Cell MAPSS）使红细胞不干扰白细胞的使红细胞不干扰白细胞的检测，同时对白细胞达到最佳分类。检测，同时对白细胞达到最佳分类。wSysmex公司的公司的SE-5000采用采用“阻抗与射频技

17、术联阻抗与射频技术联合检测白细胞分类法合检测白细胞分类法”通过四个不同的检测系统完通过四个不同的检测系统完成对嗜酸、嗜碱、淋巴单核粒细胞和幼稚细胞的检成对嗜酸、嗜碱、淋巴单核粒细胞和幼稚细胞的检测系统，固定参数的自动推片系统。测系统，固定参数的自动推片系统。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w一一.血细胞分析仪血细胞分析仪:wBayer公司生产公司生产ADVIA120血细胞分析仪利用血细胞分析仪利用激光散射和过氧化物酶染色技术激光散射和过氧化物酶染色技术进行白细胞进行白细胞分类计数，有四个测量通道即分类计数，有四个测量通道即Hb通道通道、RBC/Plt通道、嗜碱通道通

18、道、嗜碱通道和和过氧化物酶过氧化物酶（细（细胞分类）通道。胞分类）通道。w还有一些公司利用还有一些公司利用多角度光散射信号多角度光散射信号对白细对白细胞进行分类和采用新型的胞进行分类和采用新型的流式细胞仪技术流式细胞仪技术对对网织红细胞计数和分类。网织红细胞计数和分类。II(1,2M)FibrinogenSol.fibrin Unsol. fibrin+FXIIIIIFibrinogenSol.fibrin Unsol.fibrin+FXIIIButenas, 2001; Mann 2003Activated Platelet assembly of enzymatic complexes F

19、T / VIIa(5-25pM) (0,1nM)IXIXaXXaExtrinsic Tenase /PTVaVXIXIaIXIXa Intrinsic TenaseXXa ProthrombinaseVIIIVIIIa+ Ca+ CaAPTTTT实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w二二.血凝仪：血凝仪：w生物学方法生物学方法（凝固法）：（凝固法）：目前可为三类目前可为三类：电：电流法（钩方法）、黏度法（磁珠法）、光学流法（钩方法）、黏度法（磁珠法）、光学法。主要用于凝血因子的检测；法。主要用于凝血因子的检测；w生物化学方法生物化学方法（发色底物法）：（发色底物法）：主

20、要用于对主要用于对酶、酶原及酶抑制物的检测；酶、酶原及酶抑制物的检测；w免疫学方法免疫学方法：多采用多采用免疫比浊法，有时也采免疫比浊法，有时也采用透射或散射比浊法，用透射或散射比浊法，D-二聚体二聚体和和FDP是采是采用乳胶比浊法。用乳胶比浊法。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w三三.流式细胞仪流式细胞仪(FCM)w工作原理工作原理：将待测细胞用将待测细胞用荧光染色荧光染色后制成单后制成单细胞悬液，用一定压力将待测样品压入流动细胞悬液，用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管人口方向与待

21、测样品流成一管喷出，鞘液管人口方向与待测样品流成一定角度，这样，鞘液就能够包绕着样品高速定角度，这样，鞘液就能够包绕着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下排成单行，依次通过检测区域。液的包被下排成单行，依次通过检测区域。主要的技术特点是：主要的技术特点是：1.鞘流原理；鞘流原理；2.激光光激光光源；源；3.散射光检测；散射光检测；4.荧光检测；荧光检测；5.细胞分选。细胞分选。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w三三.流式细胞仪：流式细胞仪：w临床应用临床应用:w1.FCM 在免疫学中的应用在免疫学中的应用:w

22、(1)外周血外周血T淋巴细胞亚群的测定淋巴细胞亚群的测定w(2)T细胞亚群用于器官移植后排斥反应的监测细胞亚群用于器官移植后排斥反应的监测w(3)肺泡灌洗液中肺泡灌洗液中T淋巴细胞亚群的测定淋巴细胞亚群的测定w(4)FCM 在艾滋病监测中的应用在艾滋病监测中的应用w(5)细胞内染色和细胞因子的测定细胞内染色和细胞因子的测定实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w三三.流式细胞仪：流式细胞仪：w临床应用临床应用:w2.FCM在血液病学中的应用在血液病学中的应用w(1)白血病免疫分型白血病免疫分型w(2)淋巴瘤的免疫分型淋巴瘤的免疫分型w(3)白血病微小残留病变和化疗效果的监

23、测白血病微小残留病变和化疗效果的监测w(4)骨髓移植和干细胞移植的监测骨髓移植和干细胞移植的监测w(5)在免疫血液病中的应用在免疫血液病中的应用w(6)血小板膜表面受体测定在血栓性疾病方面的应用血小板膜表面受体测定在血栓性疾病方面的应用w(7)在贫血中的应用在贫血中的应用实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w三三.流式细胞仪：流式细胞仪：w临床应用临床应用:w3.FCM在细胞增殖和肿瘤病理研究中的应用在细胞增殖和肿瘤病理研究中的应用w(1)细胞周期和细胞周期和DNA倍体的倍体的FCM分析分析w(2)在细胞增殖研究中的应用在细胞增殖研究中的应用w(3)DNA分析在肿瘤研究

24、中的应用分析在肿瘤研究中的应用w(4)FCM对肿瘤基因蛋白产物的测定对肿瘤基因蛋白产物的测定实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w三三.流式细胞仪：流式细胞仪：w临床应用临床应用:w4.FCM在细胞凋亡研究中的应用在细胞凋亡研究中的应用w 主要用于细胞凋亡检测和凋亡相关蛋白的检测主要用于细胞凋亡检测和凋亡相关蛋白的检测w5.其他应用其他应用w(1)染色体的荧光染色染色体的荧光染色w(2)细胞内钙离子细胞内钙离子(Ca2+)的测定的测定w(3)FCM在寄生虫和酶学中的应用在寄生虫和酶学中的应用实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w四四.自动生化分析

25、仪：自动生化分析仪：w分类：分类：1.全自动和半自动；全自动和半自动；w2.按反应装置结构：连续流动式、分立式、按反应装置结构：连续流动式、分立式、离心式和离心式和“袋式袋式”（杜邦）；（杜邦）；w3.普通（液体）和干式；普通（液体）和干式；w4.按仪器的复杂程度：小型：单通道，中型：按仪器的复杂程度：小型：单通道，中型：多通道，可同时测定多通道，可同时测定2-10个项目，但项目不个项目，但项目不能任选，大型：可同时测定能任选，大型：可同时测定10个以上项目，个以上项目，分析项目可以自由选择分析项目可以自由选择。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w四四.自动生化分析仪

26、：自动生化分析仪：w主要部件：主要部件：w1.加样系统加样系统：包括样品转盘或传送轨道、试剂室、样品取样单元和试剂：包括样品转盘或传送轨道、试剂室、样品取样单元和试剂取样单元；取样单元；w2.比色系统比色系统：w（1）.光源：卤素钨丝灯：光源：卤素钨丝灯：325-800nmw 氙灯：氙灯：285-750nmw（2）.比色杯比色杯:分立式比色杯转盘、离心比色盘和流动比色池分立式比色杯转盘、离心比色盘和流动比色池w（3）.单色器和检测器：干涉滤光片和光栅分光式单色器和检测器：干涉滤光片和光栅分光式w（4）.分析方法：光谱技术中的可见、紫外吸收光谱法是各类自动生化分析方法：光谱技术中的可见、紫外吸收

27、光谱法是各类自动生化分析仪的分析原理。分析仪的分析原理。w3.温控系统温控系统：30C和和37 C两种温度两种温度w4.供排水系统供排水系统w5.数据处理系统数据处理系统实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w五五.血气酸碱分析仪：血气酸碱分析仪：w工作原理工作原理:测量管的管壁上开有测量管的管壁上开有4个孔个孔,孔里面插有孔里面插有pH、PCO2 和和PO2三支测量电极和一支三支测量电极和一支参比电极参比电极。待测样品在管路系统。待测样品在管路系统的抽吸下进入样品室的测量管，同时被四个电极所感测到。的抽吸下进入样品室的测量管，同时被四个电极所感测到。电极产生对应于电极产

28、生对应于pH、PCO2 和和PO2的电信号，电信号经放大、的电信号，电信号经放大、处理后经微处理机处理后打印处理后经微处理机处理后打印。w电极的基本结构电极的基本结构：w1.pH电极：由玻璃电极与参比电极组成；电极：由玻璃电极与参比电极组成；w2. PCO2电极：是一种气敏电极电极：是一种气敏电极 ；w3. PO2电极：是一种电极：是一种Clark极化电极，极化电极，O2半透膜为聚丙烯、半透膜为聚丙烯、聚乙烯或聚四氟乙烯。聚乙烯或聚四氟乙烯。w近几年有经皮近几年有经皮PO2、 PCO2和和结膜电极结膜电极为无损伤检测仪器，适为无损伤检测仪器，适用于儿童及大面积烧伤等病人，但是测定结果与真实情况

29、有用于儿童及大面积烧伤等病人，但是测定结果与真实情况有一定的偏差。一定的偏差。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w六六.特种蛋白免疫分析仪：特种蛋白免疫分析仪：w免疫测定免疫测定（immunoassay，IA）是利用抗原抗体）是利用抗原抗体反应检测标本中的微量物质的分析方法，敏感性高，反应检测标本中的微量物质的分析方法，敏感性高，可测出纳克（可测出纳克（ng）水平，该仪器根据监测角度不同）水平，该仪器根据监测角度不同可分为免疫透射浊度分析仪和免疫散射浊度分析仪。可分为免疫透射浊度分析仪和免疫散射浊度分析仪。目前很多实验室使用的目前很多实验室使用的ARRAY特种蛋白分析

30、系统特种蛋白分析系统采用的是采用的是速率散射比浊法速率散射比浊法。速率法是一种先进的动。速率法是一种先进的动力学测定法。所谓速率是指抗原力学测定法。所谓速率是指抗原-抗体结合反应过程抗体结合反应过程中，在单位时间内两者结合的速度。中，在单位时间内两者结合的速度。速率散射比浊速率散射比浊法法是在抗原与抗体反应的最高峰（约是在抗原与抗体反应的最高峰（约1分钟内）测分钟内）测定其复合物形成的量，定其复合物形成的量，快速、准确快速、准确。分析的范围包。分析的范围包括括20余种特种蛋白。余种特种蛋白。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w七七.自动化酶免疫分析仪：自动化酶免疫分析

31、仪：w酶联免疫吸附剂测定酶联免疫吸附剂测定（enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)技术的问世是免疫学定量分技术的问世是免疫学定量分析方法的重要标志之一析方法的重要标志之一.从从ELISA引伸出来的一系列引伸出来的一系列标记酶免疫化学分析标记酶免疫化学分析(简称酶免疫分析简称酶免疫分析,EIA)技术技术,使使标记免疫化学分析技术得以丰富和完善标记免疫化学分析技术得以丰富和完善,并得到广泛并得到广泛应用应用.ELISA技术可分为技术可分为双抗体夹心法、间接法双抗体夹心法、间接法和和竞竞争法争法三类，近几年三类，近几年EIA发展的很快，又出现了发展的很快，

32、又出现了酶倍酶倍增性免疫分析技术增性免疫分析技术(enzyme multiplied immunoassay technique,EMIT)和和隆酶供体免疫隆酶供体免疫分析分析:这是是一项利用基因工程技术设计和发展起来这是是一项利用基因工程技术设计和发展起来的的EIA技术技术.实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w七七.自动化酶免疫分析仪：自动化酶免疫分析仪：wEIA所用的酶主要有所用的酶主要有碱性磷酸酶、辣根过氧碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、葡萄糖化物酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶及磷酸脱氢酶及-岩藻糖苷岩藻糖苷酶。酶。抗体的酶标记和抗原的酶胶连是通过双抗体的酶标记和抗原的

33、酶胶连是通过双功能制剂的共价键联合技术来制备的，重组功能制剂的共价键联合技术来制备的，重组的胶连物是利用基因溶合技术来制备的。各的胶连物是利用基因溶合技术来制备的。各种各样的酶促反应检测体系普遍采用了种各样的酶促反应检测体系普遍采用了光学光学比色检测方法比色检测方法实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w八八.发光免疫分析技术：发光免疫分析技术：w发光免疫技术依其示踪物检测的不同而分为发光免疫技术依其示踪物检测的不同而分为荧光免荧光免疫测定、化学发光免疫测定疫测定、化学发光免疫测定及及电化学发光免疫测定电化学发光免疫测定三大类。荧光免疫测定又可分为两种三大类。荧光免疫测定

34、又可分为两种:时间分辨荧光时间分辨荧光免疫测定及荧光偏振免疫测定免疫测定及荧光偏振免疫测定.发光免疫技术有明显发光免疫技术有明显的优越性的优越性:w1.敏感度高敏感度高,超过放射免疫分析法超过放射免疫分析法(RIA);w2.精密度和准确性均可与精密度和准确性均可与RIA相比相比;w3.试剂稳定试剂稳定,无毒害无毒害w4.测定耗时短测定耗时短;w5.自动化程度高自动化程度高;w6.检测的项目多检测的项目多.实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w八八.发光免疫分析技术：发光免疫分析技术：检测的项目包括检测的项目包括w1.甲状腺功能及相关疾病的检测项目甲状腺功能及相关疾病的检

35、测项目w2.生殖内分泌激素生殖内分泌激素w3.心肌缺血或梗塞的标志物心肌缺血或梗塞的标志物w4.肿瘤标志物肿瘤标志物w5.糖尿病指标糖尿病指标w6.贫血指标贫血指标w7.肾上腺激素肾上腺激素(皮质醇皮质醇)w8.感染性疾病的血清学标志物感染性疾病的血清学标志物w9.药物浓度监测药物浓度监测实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w九九.微生物生长检测仪器微生物生长检测仪器:w(一一).血培养仪器血培养仪器:第三代血培养仪的特点第三代血培养仪的特点:w（1）.培养基肉汤含量增加培养基肉汤含量增加,多数仪器在多数仪器在40ml或更多或更多,这样可允许采血量达这样可允许采血量达1

36、0ml以上以上.如果同时进行需氧如果同时进行需氧和厌氧培养和厌氧培养,采血量为采血量为20ml,符合血培养推荐的采血符合血培养推荐的采血量量.w（2）.培养、振荡、检测合为一个整体，即血培养培养、振荡、检测合为一个整体，即血培养瓶在培养或震荡培养的同时由检测系统实施连续检瓶在培养或震荡培养的同时由检测系统实施连续检测，即在特定的间隔时间内对血培养物进行检测，测，即在特定的间隔时间内对血培养物进行检测，一般为每一般为每10-30分钟检测一次，可及时发现阳性结分钟检测一次，可及时发现阳性结果果.w（3）.检测采用无损伤瓶外方式（检测检测采用无损伤瓶外方式（检测CO2采用非采用非放射性红外光谱仪），

37、减少了污染机会放射性红外光谱仪），减少了污染机会.w（4）.操作简便操作简便实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w九九.微生物生长检测仪器微生物生长检测仪器:w（二）全自动细菌鉴定系统：（二）全自动细菌鉴定系统：w1.细菌鉴定原理：细菌鉴定原理：根据不同类别细菌的理化根据不同类别细菌的理化性质不同设计不同的鉴定卡，每个鉴定卡有性质不同设计不同的鉴定卡，每个鉴定卡有30项生化反应，采用光电比色法测定细菌因项生化反应，采用光电比色法测定细菌因分解底物导致分解底物导致pH改变或由于细菌生长、利用改变或由于细菌生长、利用底物而产生的透光度变化，并以变化百分率底物而产生的透光度变

38、化，并以变化百分率为每项生化反应判断的变量值。每个鉴定卡为每项生化反应判断的变量值。每个鉴定卡内设有终点指示孔并有相应的终点的阈值。内设有终点指示孔并有相应的终点的阈值。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w九九.微生物生长检测仪器微生物生长检测仪器:w（二）全自动细菌鉴定系统：（二）全自动细菌鉴定系统：w2.药敏试验原理：药敏试验原理：根据美国国家临床实验室标准委根据美国国家临床实验室标准委员会（员会（NCCLS）对药敏试验的判断标准，每一种）对药敏试验的判断标准，每一种药物设计了多个稀释梯度，加入一定浓度的菌悬液，药物设计了多个稀释梯度，加入一定浓度的菌悬液，每个卡

39、每小时读数一次，根据终点指示孔达到阈值每个卡每小时读数一次，根据终点指示孔达到阈值的时间，即为该卡孵育的时间。应用光电比浊的原的时间，即为该卡孵育的时间。应用光电比浊的原理，获得待检菌在三个不同浓度时的生长率并自动理，获得待检菌在三个不同浓度时的生长率并自动计算斜率，与阳性对照孔斜率比较，经回归分析得计算斜率，与阳性对照孔斜率比较，经回归分析得到到MIC值。在最后一次判读结果后系统会自动打印值。在最后一次判读结果后系统会自动打印出含有出含有MIC和和S、I、R结果的实验室报告和病人报结果的实验室报告和病人报告。告。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w十十.尿液分析仪的

40、分析技术尿液分析仪的分析技术:w尿液分析仪主要包括尿液分析仪主要包括干化学尿液分析仪干化学尿液分析仪和和尿沉渣分尿沉渣分析仪析仪两大系列两大系列.w(一一).干化学尿液分析仪干化学尿液分析仪按测试项目分类有按测试项目分类有8项、项、9项、项、10项、项、11项和项和12项尿液分析仪，有半自动和全自动项尿液分析仪，有半自动和全自动两种类型。两种类型。w（1）.尿液分析的试剂带尿液分析的试剂带：它以滤纸为载体，将各：它以滤纸为载体，将各种试剂成分浸入后干燥，作为试剂层，再在其表面种试剂成分浸入后干燥，作为试剂层，再在其表面覆盖一层纤维素膜，作为反射层。试剂带浸入尿液覆盖一层纤维素膜，作为反射层。试

41、剂带浸入尿液后与试剂发生反应，产生颜色变化，不同类型的尿后与试剂发生反应，产生颜色变化，不同类型的尿液分析仪使用自己专用的配套的试剂带。液分析仪使用自己专用的配套的试剂带。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w（2）.尿液分析仪的测试原理尿液分析仪的测试原理：w 当把浸了尿液的试剂带放入分析仪的试剂带传当把浸了尿液的试剂带放入分析仪的试剂带传送带槽内，传送系统将试剂带送到检测器下面进行送带槽内，传送系统将试剂带送到检测器下面进行扫描，试剂带上已产生化学反应的各种试剂块被光扫描，试剂带上已产生化学反应的各种试剂块被光源照射，其反射光被检测器接收。试剂带中各试剂源照射，其反

42、射光被检测器接收。试剂带中各试剂块与尿液中相应成分进行独立反应，显示不同颜色，块与尿液中相应成分进行独立反应，显示不同颜色，颜色的深度与尿液中某种成分成比例关系。颜色的深度与尿液中某种成分成比例关系。w（3）.尿液分析仪测定尿液比重、颜色及浊度的原尿液分析仪测定尿液比重、颜色及浊度的原理理：采用折射指数法测定尿比重、四波长反射法测：采用折射指数法测定尿比重、四波长反射法测定尿液颜色和透光指数法测定尿浊度，使尿液分析定尿液颜色和透光指数法测定尿浊度，使尿液分析更加具体和准确。更加具体和准确。实验室常用仪器的检测方法及原理实验室常用仪器的检测方法及原理w十十.尿液分析仪的分析技术尿液分析仪的分析技

43、术:w（二）（二）.全自动尿沉渣分析仪：全自动尿沉渣分析仪：w测定原理测定原理：以：以UF-100为例为例w 应用流式细胞和电阻抗原理：应用流式细胞和电阻抗原理：当一个尿液标本被当一个尿液标本被稀释液稀释并染色液染色后，靠液压作用通过鞘液稀释液稀释并染色液染色后，靠液压作用通过鞘液流动池。当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动流动池。当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时，它被一种无粒子颗粒的鞘液包围，使每个细室时，它被一种无粒子颗粒的鞘液包围，使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心（竖直）轴胞以单个纵列的形式通过流动池的中心（竖直）轴线，在这里每个尿液细胞被氩激光光束照射。每个线，在这里

44、每个尿液细胞被氩激光光束照射。每个细胞有不同程度的细胞有不同程度的荧光强度、散射光强度荧光强度、散射光强度和和电阻抗电阻抗大小大小得出得出细胞的形态、细胞横截面积、染色片段的细胞的形态、细胞横截面积、染色片段的长度、细胞容积等信息，并绘出直方图和散射图。长度、细胞容积等信息，并绘出直方图和散射图。非常规使用的检验设备非常规使用的检验设备w一一.自动化电泳分析仪自动化电泳分析仪w二二.激光扫描共聚焦显微镜激光扫描共聚焦显微镜w三三.血小板黏附与聚集功能的测定血小板黏附与聚集功能的测定w四四.血液流变学的检测技术血液流变学的检测技术w五五.原子发射光谱仪、原子吸收光谱仪和电感耦合等原子发射光谱仪、

45、原子吸收光谱仪和电感耦合等离子体发射光谱仪离子体发射光谱仪w六六.串联质谱、气相色谱与质谱连用和高效液相色谱串联质谱、气相色谱与质谱连用和高效液相色谱分析仪分析仪w七七.临床分子生物学的相关技术与设备：如半自动临床分子生物学的相关技术与设备：如半自动PCR仪或全自动荧光定量仪或全自动荧光定量PCR扩增仪、测序仪、梯扩增仪、测序仪、梯度凝胶电泳仪及杂交箱、摇床等各种设备度凝胶电泳仪及杂交箱、摇床等各种设备w八八.床旁检测的仪器等床旁检测的仪器等w将实现试验项目的优化与全面质量管理。对试验项将实现试验项目的优化与全面质量管理。对试验项目进行优化与精选，避免检验项目的滥用与误用。目进行优化与精选，避

46、免检验项目的滥用与误用。为减少检验的花费将拟定各病种的基本检验项目。为减少检验的花费将拟定各病种的基本检验项目。全面质量管理全面质量管理(TQM(TQM，QI)QI)会进一步强化，对试验项会进一步强化，对试验项目的评价要更好地推广应用目的评价要更好地推广应用ROC ( receiver operating ROC ( receiver operating characteristics)characteristics)。进一步实现室内质控的自动化，室。进一步实现室内质控的自动化，室间质控国际化，即应用国际统一的标准物、校准物。间质控国际化，即应用国际统一的标准物、校准物。我国已建立国家实验室标

47、准化委员会，并将积极推我国已建立国家实验室标准化委员会，并将积极推行实验室的国家认可制度。行实验室的国家认可制度。 医学实验室医学实验室- -质量和能力质量和能力的专用要求的专用要求（ISO15189ISO15189）ISO15189的理论基础w1.以客户为关注焦点：实验室依存于患者，满足患者要求并争取超越患者期望。w2.领导作用：领导者将本组织的宗旨、方向和内部环境统一起来，并创造使员工能够充分参与实现组织目标的环境。w3.全员参与：各级人员是组织之本，只有他们的充分参与，才能使他们的才干为组织带来最大的收益。ISO15189的理论基础w4.过程方法：将相关的资源和活动作为过程进行管理，可以

48、更高效地得到期望的结果。w5.管理的系统方法：将相互关联的过程作为系统加以识别、理解和管理，有助于组织提高实现目标的有效性和效率。w6.持续改进：持续改进是实验室的永恒目标。ISO15189的理论基础w7.基于事实的决策方法：有效的决策是建立在对数据和信息分析的基础上。w8.与供方互利的关系：组织与供方是相互依存的，互利的关系可增强双方创造价值的能力。ISO15189的特点w1.专用-为医学实验室“量身定做”w2.国际化（ISO）w3.关注质量和能力建设w4.关注过程管理的方法w5.关注安全、信息和伦理w6.适用临床实验室的现有所有学科CAP认可要求w美国病理家协会（College of Am

49、erican Path-ologlist，CAP）非赢利的临床实验室认可机构，成立于1947年。w包括15个管理要素和8个技术要素，全世界通过CAP认证的实验室达6000余个，中国有6个，参加CAP能力验证的实验室达23000余个。w依据：美国临床实验室标准化委员会（CLSI）的业务标准和操作指南，1988年美国临床实验室改进法案（CLIA88）。w在实验室的组织方面将出现两极分化。在实验室的组织方面将出现两极分化。w一方面是大型、集中化、自动化实验室一方面是大型、集中化、自动化实验室(centralized (centralized laboratory)laboratory)如实现检验流程

50、线的大型如实现检验流程线的大型SRL(special SRL(special reference laboratory)reference laboratory)。w另一方面是小型、分散另一方面是小型、分散(decentralized)(decentralized)的现场实验室，的现场实验室，用多种干化学仪器、便携式仪器，以及一次性小用多种干化学仪器、便携式仪器，以及一次性小型仪器实现床侧检验型仪器实现床侧检验(bed-side testing)(bed-side testing)与现场检验与现场检验(Point of care tests)(Point of care tests)。 w检验

51、机构的新业态检验机构的新业态:第三方服务机构第三方服务机构w独立医学实验室独立医学实验室:全世界最成功的范例是:w 美国的Quest Diagnostics,他每天要接受55万人份的标本,目前国内比较成功的独立实验室是广州金域和杭州爱迪康等,天津金域医学天津金域医学检验所检验所是2009年12月1日天津市卫生局批准的首家独立医学实验室。w2121世纪的实验室医学的发展依靠高素质的检验人世纪的实验室医学的发展依靠高素质的检验人才，为此必须加强实验室人员的继续教育。要求才，为此必须加强实验室人员的继续教育。要求实验室人员打破原有精细分工，向多技能化发展，实验室人员打破原有精细分工，向多技能化发展，

52、即需同时具备基础技能、临床技能、科学技能、即需同时具备基础技能、临床技能、科学技能、管理技能、专业发展技能。各学科间将出现技术管理技能、专业发展技能。各学科间将出现技术融合，检验人员必须一专多能。因此要推行检验融合，检验人员必须一专多能。因此要推行检验人员的终生教育制度人员的终生教育制度(SPE)(SPE)。 附件 专家们指出，专家们指出，2121世纪的检验医学将是循证世纪的检验医学将是循证的检验医学。要求临床医学与检验医学密切的检验医学。要求临床医学与检验医学密切合作，提供大量、充分、最佳的证据，深入合作，提供大量、充分、最佳的证据，深入认识和评价诊断试验的科学性，诊断价值及认识和评价诊断试

53、验的科学性，诊断价值及临床适用性，即对诊断试验进行系统的筛选临床适用性，即对诊断试验进行系统的筛选和评估（和评估（Systematic Reviewing on Screening and Systematic Reviewing on Screening and Diagnostic labortaryDiagnostic labortary tests tests），这标志着检验医学），这标志着检验医学发展的新阶段。我国检验人员应尽快地学习发展的新阶段。我国检验人员应尽快地学习并努力实践循证检验医学，跟上时代发展的并努力实践循证检验医学，跟上时代发展的步伐。步伐。 在国际上循证医学代表了医

54、学发展方向之在国际上循证医学代表了医学发展方向之一。它要求医师的任何医疗决策（诊断、治一。它要求医师的任何医疗决策（诊断、治疗、手术指征，处方疗、手术指征，处方）都应根据合理的，）都应根据合理的，充分的科学依据。这些依据应联合多个单位充分的科学依据。这些依据应联合多个单位提供提供( (多中心多中心), ),依据要大量充分（大样本）且依据要大量充分（大样本）且应是随机和双盲的。在此种循证基础上得出应是随机和双盲的。在此种循证基础上得出的结论才能真正指导医疗诊断和治疗，提高的结论才能真正指导医疗诊断和治疗，提高疗效，提高医学水平。疗效，提高医学水平。 70 70 年代末，年代末，Archie Co

55、chrancArchie Cochranc 即提出循证医学。即提出循证医学。19921992年英国牛津组成年英国牛津组成CochrancCochranc协作网，提出国协作网，提出国际间协作开展循证医学的际间协作开展循证医学的9 9项原则。项原则。19961996年我年我国成立循证医学中心，成为此协作网的国成立循证医学中心，成为此协作网的1414个个成员之一。在国内外，循证医学已取得公认成员之一。在国内外，循证医学已取得公认的重要成果，如高血压治疗的的重要成果，如高血压治疗的WHO/ISH(1999)WHO/ISH(1999)诊治指南，对多种心血管药物的大样本、随诊治指南，对多种心血管药物的大样

56、本、随机、双盲的评价以及控制血脂，血葡萄糖以机、双盲的评价以及控制血脂，血葡萄糖以减少心脑血管事件。我国制定的减少心脑血管事件。我国制定的“血脂异常血脂异常的防治建议的防治建议”等等. . 循证医学的原则和方法已深入到医学循证医学的原则和方法已深入到医学各学科，其在检验医学中的应用即形成各学科，其在检验医学中的应用即形成循证检验医学，在近年的国际性检验医循证检验医学，在近年的国际性检验医学的会议上都有专题研讨。学的会议上都有专题研讨。二、实践循证检验医学的步骤二、实践循证检验医学的步骤 一般遵循如下一般遵循如下5 5个步骤个步骤（一）（一） 明确地提出需要解决的问题。明确地提出需要解决的问题。

57、（二）（二） 对此问题进行系统的文献查阅，在对此问题进行系统的文献查阅，在充分占有文献的基础上进行评估。充分占有文献的基础上进行评估。（三）（三） 应用荟萃分析（应用荟萃分析（meta-analysismeta-analysis）等方）等方法 对 现 有 文 献 ， 资 料 进 行 严 格 的 评 价法 对 现 有 文 献 ， 资 料 进 行 严 格 的 评 价（critical appraisalcritical appraisal）得出初步结论。）得出初步结论。（四）（四） 应用此初步结论在实践中考核。应用此初步结论在实践中考核。（五）（五） 发布新的结论与实践结果，丰富文发布新的结论与实

58、践结果，丰富文 献资料，并在实践中发现新的问题。献资料，并在实践中发现新的问题。二、实践循证检验医学的步骤二、实践循证检验医学的步骤 如此循环往复，可促进检验医学的深入如此循环往复，可促进检验医学的深入发展。是我们对检验医学的认识更加科发展。是我们对检验医学的认识更加科学和全面。使之更好地服务于临床诊断学和全面。使之更好地服务于临床诊断和治疗。和治疗。 上述上述5 5步骤可图示如下：步骤可图示如下：发现与提出问题实践应用初步结论严格评估系统查阅文献实践中改进 如心肌损伤标志物从心肌酶（如心肌损伤标志物从心肌酶（CKCK，CK-MBCK-MB）心肌蛋白（心肌蛋白（MbMb，cTnTcTnT，cT

59、nIcTnI）扩展到检测感）扩展到检测感染标志物（染标志物（CRPCRP）, ,血栓形成标志物（血栓血栓形成标志物（血栓前体蛋白前体蛋白TpTTpT）p p选择素等，心肌缺血标志选择素等，心肌缺血标志物（糖原磷酸化酶，脂肪酸结合蛋白等）物（糖原磷酸化酶，脂肪酸结合蛋白等）和坏死标志物（和坏死标志物（肌动蛋白）就是对心肌肌动蛋白）就是对心肌损伤标志物的不断深入评价的过程，是在损伤标志物的不断深入评价的过程，是在试验中不断发现老试验的局限性而发展的试验中不断发现老试验的局限性而发展的新试验。这些新试验的特点和优势也将接新试验。这些新试验的特点和优势也将接受循证检验医学的评估。受循证检验医学的评估。

60、三、善于发现和提出问题是实践循证三、善于发现和提出问题是实践循证 检验医学的出发点和关键检验医学的出发点和关键 应用应用RIARIA或或EIAEIA法测定血清中胰岛素和法测定血清中胰岛素和C C肽肽用于测定胰岛用于测定胰岛细胞功能已经多年，现有细胞功能已经多年，现有人发现实验中均将其前体物和中间物测入人发现实验中均将其前体物和中间物测入（因共同的单抗识别位点）。因此，它只（因共同的单抗识别位点）。因此，它只能称之为能称之为“免疫反应性胰岛素免疫反应性胰岛素”和和“免疫免疫反应性反应性C C肽肽”推动了对测定推动了对测定“真真”（或特异（或特异性）胰岛素，性）胰岛素，C C肽的研究以及胰岛肽的研

61、究以及胰岛细胞功细胞功能的重新评价问题，这说明善于发现问题能的重新评价问题，这说明善于发现问题的重要性。的重要性。 许多诊断试验的评价不一，许多诊断试验的评价不一，RaoRao JK JK等检等检索索19951995年前发表的以中性粒细胞抗体诊年前发表的以中性粒细胞抗体诊断断WegenerWegener肉芽肿文献肉芽肿文献747747篇，试验敏感性篇，试验敏感性从从34%34%到到92%92%，特异性从，特异性从88%88%到到100%100%。如此。如此大的差异岂不是问题？正需要循证检验大的差异岂不是问题？正需要循证检验医学加以解决。医学加以解决。 发现与提出问题的目的在于解决问题，发现与提

62、出问题的目的在于解决问题，应完整地搜集符合和不符合现有观点的论应完整地搜集符合和不符合现有观点的论据，系统地整理分析。如有人曾收集据，系统地整理分析。如有人曾收集19101910年至年至19861986年的年的642642篇文献，证明末梢血的出篇文献，证明末梢血的出血时间试验既不能反映止血功能的缺陷，血时间试验既不能反映止血功能的缺陷，也不能提示血小板功能。也不能提示血小板功能。四、对该问题的相关文献进行系统查阅四、对该问题的相关文献进行系统查阅（一）明确系统查阅文献的目的和范围（一）明确系统查阅文献的目的和范围（二）收集相关文献重温（二）收集相关文献重温（三）确定原来研究（观点）的有效性（三

63、）确定原来研究（观点）的有效性（四）应用条目或编码法从中提取有用信息（四）应用条目或编码法从中提取有用信息（五）对有用信息进行分析（如评估试验的（五）对有用信息进行分析（如评估试验的 诊断准确性）诊断准确性）（六）增加新资料再重新分析（六）增加新资料再重新分析（七）确定进一步分析研究的目标（七）确定进一步分析研究的目标 电子计算机和电子计算机和InternetInternet为查阅文献和分析资料提为查阅文献和分析资料提供了方便的工具。在对实验方法评价中必须注供了方便的工具。在对实验方法评价中必须注意试验原理的合理性，实验方法的正确性，结意试验原理的合理性，实验方法的正确性，结果数据的可靠性，多

64、种体内、外因素对实验的果数据的可靠性，多种体内、外因素对实验的干扰，评价其批内差异，批间差异，线性范围，干扰，评价其批内差异，批间差异，线性范围，患者结果可报告范围，评价其阳性，阴性临界患者结果可报告范围，评价其阳性，阴性临界值的设定，试验性能，试验对仪器试剂的要值的设定，试验性能，试验对仪器试剂的要求求对实验的临床应用价值的评价必须包括对实验的临床应用价值的评价必须包括参考值和参考范围参考值和参考范围, ,诊断敏感性诊断敏感性, ,特异性特异性, ,阳性和阴阳性和阴性予示值性予示值, ,临床适用性临床适用性, , 假阳性和假阴性的疾患假阳性和假阴性的疾患, ,疾患的不同阶段的结果变动，药物及

65、治疗手段疾患的不同阶段的结果变动，药物及治疗手段对实验结果的影响等对实验结果的影响等. .五、利用荟萃分析对文献严格评价五、利用荟萃分析对文献严格评价 医学文献的荟萃分析是建立在循证医学医学文献的荟萃分析是建立在循证医学和临床流行病学基础上的新研究方法，是和临床流行病学基础上的新研究方法，是对成千上万篇相关文献进行全面、科学、对成千上万篇相关文献进行全面、科学、系统分析的科学方法。荟萃分析方法很多，系统分析的科学方法。荟萃分析方法很多，如简单的如简单的“投票法投票法”和常用的数据整合法，和常用的数据整合法，它又分为固定效果模型（它又分为固定效果模型（Fixed Effective Fixed

66、Effective ModelModel）和随机效果模型（）和随机效果模型（Random Effective Random Effective ModelModel），对此可参考有关专著。），对此可参考有关专著。 荟萃分析首先要从纳入评价范围的文献荟萃分析首先要从纳入评价范围的文献中提取有用的信息，对诊断试验的准确性中提取有用的信息，对诊断试验的准确性进行系统评价所需的信息条目。进行系统评价所需的信息条目。Cochrane Cochrane 协作组与协作组与19961996年提出如下要求年提出如下要求（一）研究文献有效性的标准（一）研究文献有效性的标准 （二）比较实验研究的有效性标准（二）比较实验研究的有效性标准（三）结果适用性的有关标准（三）结果适用性的有关标准 （四）文献质量和应用性间接评定（四）文献质量和应用性间接评定 （一）研究文献有效性的标准（一）研究文献有效性的标准1 1实验要与公认的参考方法比较过实验要与公认的参考方法比较过2 2试验与参考方法已独立地相互比较（最佳）试验与参考方法已独立地相互比较（最佳） 已用参考方法测定但未相互比较已用参考方法测定但未相互比较 试验中独