微观生物学名词

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1、1免疫原（immunogen）具有免疫原性和反应原性的物质。又称免疫原。免疫原性是指刺激 机体的免疫活性细胞产生免疫应答的能力。 反应原性是指抗原与抗体或致敏淋巴细胞发生特 异性结合而出现可见反应的能力。2胶体金：胶体金是由氯金酸 （HAuCI4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用 下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金法详见：3gG :免疫球蛋白 G （ immunoglobulin G ，IgG）是血清中免疫球蛋白主成分，约占血清中 免疫球蛋白总含量的 75%，正常值为9.

2、512.5mg/ml。其中4050%分布于血清中，其余分 布在组织中。分子量约为150000道尔顿。人类血清中的 IgG主要为单体，正常人的 IgG包括四个亚型，其 lgG1占6070%, IgG2占1520%, IgG3占510%, IgG4占17%。 这些亚型在补体激活的经典途中结合能力各不相同。IgG主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成，是唯一能通过胎盘的抗体，对防止新生儿出生数周内的感染起很大作用。婴儿初生后第3个月已能合成IgG , 23岁时已达成人水平。40岁后逐渐下降。IgG的含量个体差异很大， 同一个体在不同条件下，波动也很大。机体在抗原刺激下产生的大多数抗菌、抗病毒、抗毒素抗体属

3、于IgG。不少自身抗体，例如系统性红斑狼疮的LE因子，抗甲状腺球蛋白抗体也属于IgG。IgG是机体抗感染免疫的主力抗体。4. 交叉反应：抗原（或抗体）除与其相应抗体（或抗原）发生特异性反应外，还与其他抗体（或抗原）发生的反应。因为共同抗原的存在，由甲乙两种细胞刺激机体产生的抗体不仅可分别与其自身表面的相应抗原表位结合，而且由甲菌刺激机体产生的抗体还能与乙菌表面的相同表位结合；同样，乙菌刺激机体产生的抗体亦可与甲菌表面的相同表位结合，但反应程度较弱，这种抗原、抗体反应即称为交叉反应（cross reaction）.5. ELISA:可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试

4、剂：固相的抗原或抗体， 酶标记的抗原或抗体， 酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状 以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。一双抗体夹心法双抗体夹心法是检测抗原最常用的方法，操作步骤如下：（期将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体：洗涤除去未结合的抗体及杂质。加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时间，让标本中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。加酶标抗体：使固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。 此时固相载体上带有的酶量与标本中受检物质的量正相关。加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的

5、程度进行该抗原的 定性或定量。根据同样原理，将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。二双位点一步法在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两步并作一步（图15-5）。这种双位点一步不但简化了操作，缩短了反应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感性和特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测定抗原的ELISA提高到新水平。在一步法测定中，应注意钩状效应（hookeffect）,类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗原浓度相当高时，过量抗原

6、分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。钩状效应严重时甚至 可出现假阴性结果。三间接法测抗体间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下：将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后， 固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合， 在洗涤过程中被洗去。加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后，固 相载体上的酶量就代表特异性

7、抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人 igG抗体。加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。 本法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。四竞争法竞争法可用于测定抗原，也可用于测定抗体。以测定抗原为例，受检抗原和酶标抗原竞争与固相抗体结合，因此结合于固相的酶标抗原量与受检抗原的量呈反比。操作步骤如下：（将特异抗体与固相载体连接，形成固相抗体。洗涤。待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液，使之与固相抗体反应。如受检标本中 无抗原，则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原，则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合，竞争性地占去了酶标

8、抗原与固相载体结合的机会，使酶标抗原与固相载体的结合量减少。参考管中只加酶标抗原，保温后，酶标抗原与固相抗体的结合可达 最充分的量。洗涤。加底物显色：参考管中由于结合的酶标抗原最多，故颜色最深。参考管颜色深度与待测管 颜色深度之差，代表受检标本抗原的量。待测管颜色越淡，表示标本中抗原含量越多。五捕获法测IgM抗体血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定 IgM抗本多用捕获法，先将所有血清IgM （包括异性IgM和非特异性IgM ）固定在固相上，在去除 IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下： 将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人

9、IgM。洗涤。加入稀释的血清标本：保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫 球蛋白和血清中的杂质成分。加入特异性抗原试剂：它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。加入针对特异性的酶标抗体：使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。加底物显色：如有颜色显示，则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在，是为阳性反应。6解离常数解离常数（pKa）是水溶液中具有一定离解度的溶质的的极性参数。离解常数给予 分子的酸性或碱性以定量的量度，pKa增大，对于质子给予体来说，其酸性增加；对于质子接受体来说，其碱性增加。pH=pK+lg （电子受体/电子供体）相当于化学中的解离常数。1一元弱酸的解离平

10、衡 在一元弱酸HAc的水溶液中。存在着下列质子转移反应：【IA（砌 + HPQ） =110 何* + A何其平衡常数r/cC(A H芯卩=-O叮弱酸的HA的解离常数。弱酸的解离常数可以借助 pH计测定溶液的pH来确定。若已知弱酸的解离 常数，就可以计算出一定浓度的弱酸的平衡组成一般都是对于弱酸弱碱、难溶电解质和络合物会使用解离常数 k，来表示和计算浓度与解离能力7.免疫亲和层析应用免疫亲和层析是利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法。亲和层析的应用主要是生物大分子的分离、纯化。下面简单介绍一些亲和层析技术用于纯化各种生物大分子的情况。原理抗原和抗体免疫亲和层析利用抗原

11、、抗体之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为免疫亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上， 就可以从血清中分离其对应的抗体。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低，用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离，而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原，经动物免疫后制备抗体，将抗体与适当基质偶联 形成亲和吸附剂，就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。抗原、抗体间亲和力一般比较强，其解离常数为 108 10?12M，所以洗脱时是比较困难的，通常需要较强烈的洗脱 条件。可以采取适当的方法如改变抗原、抗体种类或使用类似物等来降低二者的亲和力，以便于洗脱。另外金黄色葡萄球菌蛋白A

12、 (ProteinA )能够与免疫球蛋白 G (IgG)结合，可以用于分离各种igG8乳胶凝集试验：以乳胶颗粒作为载体的一种间接凝集试验。即吸附可溶性抗原于其表面， 特异性抗体与之结合后，可产生凝集反应。9乳胶：乳胶（latex）泛指聚合物微粒分散于水中形成的胶体乳液。又称胶乳。习惯上将橡胶 微粒的水分散体称为胶乳，而将树脂微粒的水分散体称为乳液。以乳胶为原料制成的制品称乳胶制品，常见的如海绵、手套、玩具、胶管等。10凝集反应：一种血清学反应。颗粒性抗原（完整的病原微生物或红细胞等）与相应抗体 结合，在有电介质存在 的条件下，经过一定时间，出现肉眼可见的凝集小块。参与凝集反应的抗原称为凝集原，

13、抗体称为凝集素。可分为直接凝集反应和间接凝集反应两类。11. 显色培养基（Chromogenic/Fluorogenic Culture Media ）:是一类利用微生物自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测微生物的新型培养基。这些相应的显色底物是由产色基因和微生物部分可代谢物质组成，在特异性酶作用下，游离出产色基因显示一定颜色，直接观察菌落颜色即可对菌种作出鉴定。它是一种新型分离培养基，利用显色培养基进行微生物的筛选分离，其反应的灵敏度和特异性大大优于传统培养基。12. 旋光仪：测定旋光性物质的旋光度的仪器。旋光仪是测定物质旋光度的仪器。通过对样品旋光度的测量，可以分析确定物质的

14、浓度、含量及纯度等。广泛应用于制药、药检、制糖、 食品、香料、味精以及化工、石油等工业生产，科研、教学部门，用于化验分析或过程质量 控制。13. PCR仪：简单的说，PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR仪，实时荧光定量 PCR仪四类。14. 酶标仪：即酶联免疫检测仪，是酶联免疫吸附试验的专用仪器。可简单地分为半自动和全自动2大类，但其工作原理基本上都是一致的

15、，其核心都是一个比色计，即用比色法来分析抗原或抗体的含量。ELISA测定一般要求测试液的最终体积在250u l以下，用一般光电比色计无法完成测试， 因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA ）实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在 抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，

16、同时促进了生殖健康技术水平提高。15. 气相色谱：气相色谱（gas chromatography简称GC）是二十世纪五十年代出现的一项重 大科学技术成就。这是一种新的分离、分析技术，它在工业、农业、国防、建设、科学研究中都得到了广泛应用。气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。气固色谱指流动相是气体，固定相是固体物质的色谱分离方法。例如活性炭、硅 胶等作固定相。气液色谱指流动相是气体，固定相是液体的色谱分离方法。例如在惰性材 料硅藻土涂上一层角鲨烷，可以分离、测定纯乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等杂 质。16.ISO17025 : ISO17025是实验室认可服

17、务的国际标准，目前最新版本是2005年5月发布的，全称是ISO/IEC17025:2005-5-15检测和校准实验室能力的通用要求。ISO17025标准是由国际标准化组织ISO/CASCO （国际标准化组织/合格评定委员会）制定的实验室管理标准， 该标准的前身是ISO/IEC导则25:1990校准和检测实验室能力的要求。国际上对实验室认 可进行管理的组织是国际实验室认可合作组织（ILAC ） ”，由包括中国实验室国家认可委员会（CNACL ）在内的44个实验室认可机构参加。17. DBI : dBi和dBd是功率增益的单位，两者都是相对值，但参考基准不一样。dBi的参考基准为全方向性天线；dB

18、d的参考基准为偶极子。 一般认为dBi和dBd表示同一个增益， 用 dBi表示的值比用dBd表示的值要大2.1518. 均质器：转子和定子的精密配合，工作头（转子和定子锻件制造）爪式结构，双向吸料，剪切效率高。间歇式高剪切分散乳化均质机是通过转子高速平稳的旋转，形成高频、强烈的圆周切线速度、角向速度等综合动能效能；在定子的作用下，定、转子合理狭窄的间隙中形成强烈、往复的液力剪切、摩擦、离心挤压、液流碰撞等综合效应，物料在容器中循环往复 以上工作过程，最终获得产品。19. 菌株：可以通过从自然界中纯种分离、或通过在实验中诱变而获得的、具有较稳定遗传 性的同一菌种的变异类型。20. 基因芯片：基因

19、芯片（genechip）（又称DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的测序原理是杂交测序方法，即通过与一组已知序列的核酸探针杂交进行核酸序列测定的方法，在一块基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探针。当溶液中带有荧光标记的核酸序列TATGCAA TCTAG ,与基因芯片上对应位置的核酸探针产生互补匹配时，通过确定荧光强度最强的探针位置，获得一组序列完全互补的探针序列。据此可重组出靶核酸的序列21.Sigmaaldrich :美国著名的化学试剂公司，生产包括：尿嘧啶、尿素、万古霉素、维生素B12、胚胎水、渥曼青霉素、黄嘌呤氧化酶、木聚糖、玉米素、棕榈酸、多聚甲醛、胃蛋白酶在内的

20、等等很 多种类的生化化学试剂。种类繁多，质量优良，是科研单位优质生化试剂原料的选择之一。22. 效价：表达1:指某一物质引起生物反应的功效单位，可用理化方法检测，也可用生物检测方法测定。表达2:生物制品活性（数量）高低的标志，通常采用生物学方法测定。23. 薄层层析：将固定相与支持物制作成薄板或薄片，流动相流经该薄层固定相而将样品分 离的层析系统。其特点是样品用量少，分析快速。按所用固定相材料不同，有吸附、分配、 离子交换、凝胶过滤等薄层层析。24. 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction），简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外

21、的特殊DNA复制。PCR（聚合酶链式反应）是利用DNA在体外95度时解旋，35度时引物与单链按碱基互补配对结合，再调温度至65度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖 （5-3）的方向合成互补链。由PCR技术制造的PCR仪实际 就是一个温控设备，能在 95度，35度，65度之间很好的控制。25.OEM:原始设备制造商，OEM生产，即代工生产，也称为定点生产，俗称代工，基本含 义为品牌生产者不直接生产产品，而是利用自己掌握的关键的核心技术负责设计和开发新产品，控制销售渠道，具体的加工任务通过合同订购的方式委托同类产品的其他厂家生产。之后将所订产品低价买断，并直接贴上自己的品牌商标。这种委托他人生产的合作方式简称OEM，承接加工任务的制造商被称为 OEM厂商，其生产的产品被称为 OEM产品。可见， 定点生产属于加工贸易中的代工生产”方式，在国际贸易中是以商品为载体的 劳务出口。26.蛋白质印迹法：蛋白质印迹法即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组 织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中 的表达情况的信息