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1、超净细胞间使用及操作制度（讨论稿）操作人员制度：1. 新进实验室的人员进入超净细胞间以及实验操作前，必须首先了解细胞培养的基本要求和操作规范并进行必要的培训。必须熟悉细胞间的各项制度。首次操作必须在老师和高年资学生的指导下进行。 2. 细胞间实行预约制度，自操作人员开紫外灯、复温培养液为起始预约时间，并进行登记，包括：姓名，超净台号，起始时间。使用完毕后登记离开时间。3. 为保持无菌室清洁，进入无菌室必须在缓冲间更换专用拖鞋、工作服、戴好帽子和口罩。4. 进入细胞间后随手关门。缓冲间拉门与无菌室拉门不能同时开放，否则失去缓冲间作用。5. 无菌室室内禁止不带口罩开口说话，禁止大声喧哗。6. 专用
2、工作服、拖鞋禁止在室外穿用，定期清洗并高压灭菌，请勿将其带出无菌室。7. 研究生实验用物品领取登记后自己保存管理。实验前泡酸、包装和消毒，实验后及时洗刷、干燥、归位。1. 个人配制的试剂需标明试剂名称、配制日期及配置人；个人用消毒器材（离心管、枪头等）必需注明消毒人、物品名称、消毒日期。严禁随意取用他人试剂和器材，临时需用他人试剂一定要事先说明，征得同意后方可取用。 2. 每一个研究人员的培养细胞；细胞培养箱内的位置；培养液；消化液；消毒物品；消毒物品摆放位置等都固定化，并作好标记。禁止交叉乱用，乱放，造成可能的污染扩大，所有研究人员未经本人许可不得使用他人的物品和位置。 3. 灭菌后物品放在
3、指定位置，注明灭菌日期，高压灭菌物品可存放7-14天，过期不能再用，需重新包装灭菌。4. 从室外带入无菌室内的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射预先消毒。无菌操作前75%酒精消毒手掌、手背。整个操作严格执行无菌操作。实验前，需将所需物品放入台中并打开超净台紫外灯，照射时间至少30min。将所需试剂于37度水浴中复温。（水浴所用水必须为三蒸水，每周更换一次）5. 超净台中除摆放公用物品（酒精灯、枪、酒精球、封口膜等）外，其余个人物品必须在试验完毕后拿出超净台。个人开封后的物品需每两周消毒一次，否则管理人有权根据标记日期取出物品，后果由个人承担。6. 试验完毕后，操作人员必须完成的程序：用酒精棉
4、球擦拭超净台，并将物品摆放整齐。检查酒精灯、封口膜、酒精球等公用物品的使用情况，及时添加酒精和补充封口膜。同时检查枪的复位情况。原则是恢复超净台内的物品到初始状态。每日最后使用细胞间的人员打开紫外灭菌，次日第一个使用人员关闭紫外灯后直接使用。检查显微镜的清洁状况，如有必要需进行擦拭。关闭显微镜和离心机的电源。安全制度：1. 遇到超净台酒精灯起火，不要惊慌，将挡板拉下，关闭风机。2. 设备使用完毕，按要求切断显微镜和离心机电源。3. 由实验室管理员安排专人负责二氧化碳气和液氮。细胞培养箱、细胞间的灭菌 （实验室管理员负责）：1. 无菌室内定期消毒灭菌：喷洒3-5%石炭酸溶液并用2-3%来苏水擦洗桌面、凳子，无菌室内喷雾消毒后，紫外灭菌30分。每周一次。2. 无菌室内培养箱定期灭菌30分钟，1次/月，灭菌期间将培养箱内物品置于超净台内，并登记灭菌日期。 3. 无菌室内无菌状况定期检测：灭菌后的接种室内桌上和桌下各放一套培养基平皿，暴露15分钟，盖上，37培养24小时，每个平皿的菌落4，则认为效果良好，否则需延长照射时间或加强其它措施。每周一次。 纳米生物医学组2009-10-27
超净细胞间使用及操作规程
