微生物的筛选

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1、2 0 2 1 /6 /1 6 1 土 壤 微 生 物 的 分 离 筛 选 2 0 2 1 /6 /1 6 2 一 微 生 物 筛 选 原 理 及 介 绍二 微 生 物 筛 选 的 流 程三 微 生 物 筛 选 的 操 作content 2 0 2 1 /6 /1 6 3 一 、 微 生 物 筛 选 介 绍1、 概 念2、 筛 选 及 纯 化 的 方 法3、 培 养 基 的 选 择 2 0 2 1 /6 /1 6 4 概 念 ： 在 混 杂 的 微 生 物 群 体 中 ， 按 照 微 生 物 的 代 谢特 征 ， 分 离 出 特 定 功 能 的 微 生 物 ， 并 进 行 纯 化 直至 获 得

2、 单 一 菌 株 的 操 作 过 程 。 土 壤 是 微 生 物 的 大 本 营 ， 混 杂 着 大 量 的 微 生 物 ，从 中 分 离 可 得 到 只 含 有 一 种 微 生 物 的 纯 培 养 。概 念 筛 选 及 纯 化 的 方 法 培 养 基 的 选 择 2 0 2 1 /6 /1 6 5 微 生 物 筛 选 的 方 法 有 ： 稀 释 涂 布 法 和 平 板 划 线 法 。稀 释 涂 布 法 ： 将 土 壤 溶 液 稀 释 成 一 定 的 梯 度 ， 将 其涂 布 到 固 体 平 板 培 养 基 上 。平 板 划 线 法 ： 挑 取 稀 释 涂 布 后 长 出 的 菌 落 ， 在

3、固 体平 板 培 养 基 上 划 线 培 养 ， 获 取 纯 菌 落 。概 念 筛 选 及 纯 化 的 方 法 培 养 基 的 选 择 2 0 2 1 /6 /1 6 6 2 0 2 1 /6 /1 6 7 细 菌 的 筛 选 ： 选 择 性 培 养 基 根 据 某 种 微 生 物 的 特 殊 营 养 要 求 或 其 对 某 化学 、 物 理 因 素 的 抗 性 而 设 计 的 培 养 基 。 其 功 能 是使 混 合 菌 样 中 的 劣 势 菌 变 成 优 势 菌 ， 从 而 提 高 该菌 的 筛 选 效 率 。概 念 筛 选 及 纯 化 的 方 法 培 养 基 的 选 择 2 0 2 1

4、/6 /1 6 8 细 菌 的 保 存 ： 牛 肉 膏 蛋 白 胨 培 养 基配 方 （ g） ： 牛 肉 膏 3,蛋 白 胨 10,氯 化 钠 5， 琼 脂 15,蒸 馏 水 1000ml， pH7.2。概 念 筛 选 及 纯 化 的 方 法 培 养 基 的 选 择 2 0 2 1 /6 /1 6 9 二 、 微 生 物 筛 选 纯 化 的 流 程样品 富集培养 梯度稀释 涂布培养 平板划线纯化 斜面保存 2 0 2 1 /6 /1 6 1 0 三 微 生 物 筛 选 纯 化 的 操 作注 意 事 项 ： 筛 选 之 前 ， 提 前 制 作 好 试 验 用 的 培 养 基 。 与 培 养 微

5、 生 物 相 关 的 试 验 器 材 需 要 灭 菌 ， 方 法 为在 121 的 条 件 下 高 压 灭 菌 20分 钟 。 与 微 生 物 相 关 的 操 作 需 要 在 无 菌 操 作 台 上 进 行 。操 作 之 前 15分 钟 打 开 紫 外 灯 。 2 0 2 1 /6 /1 6 1 1 样品富集培养梯度稀释涂布培养 划线纯化斜面保存采 样 ： 土 壤 样 品 ， 梅 花 形 布 点 采 样 ，取 得 的 用 四 分 法 进 行 取 样 ， 将 样 品放 入 4 冰 箱 中 保 存 待 用 。 2 0 2 1 /6 /1 6 1 2 富 集 培 养 ： 指 从 微 生 物 混 合

6、群 开 始 ,对 特 定 种 的 数 量 比 例 不 断 增 高 而 引 向纯 培 养 的 一 种 培 养 方 法 。 在 适 于 目 标微 生 物 而 不 适 于 其 他 微 生 物 生 长 的 条件 下 继 续 培 养 ， 则 目 标 微 生 物 将 成 为优 势 种 而 得 到 纯 培 养 。样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化 斜面保存 2 0 2 1 /6 /1 6 1 3 以 筛 选 产 DMS功 能 微 生 物 为 例 ： 取 2.5g土 样 置 于 50ml改 良 基础 盐 液 体 培 养 基 中 ， 28 震荡 培 养 4天 。样品富集培养梯度稀释涂布培养划线纯化 斜面保存

7、2 0 2 1 /6 /1 6 1 4 样品富集培养梯度稀释涂布培养 划线纯化斜面保存 2 0 2 1 /6 /1 6 1 5 样品富集培养梯度稀释涂布培养 划线纯化斜面保存 将 菌 种 用 无 菌 水 制 成 悬 液 。 取 若 干 只 无 菌 试 管 ， 每 只 内 盛 9ml无 菌水 。 吸 取 上 述 菌 悬 液 lml加 入 第 1只 含 有 无菌 水 的 试 管 内 。 也 就 是 10-1。 从 第 1只 试 管 内 (10-1)吸 取 lml注 入 第 2只 含 有 无 菌 水 的 试 管 内 ， 也 就 是 10-2。 用 同 样 方 法 ， 制 成 10-3 10-8的 菌

8、 悬 液 。 2 0 2 1 /6 /1 6 1 6 样品富集培养梯度稀释涂布培养 划线纯化斜面保存划 线 目 的 ： 逐 步 纯 化 ， 直 至 出 现 单 菌落 ， 获 得 纯 菌 株 。 35次 。 2 0 2 1 /6 /1 6 1 7 样品富集培养梯度稀释涂布培养 划线纯化斜面保存 2 0 2 1 /6 /1 6 1 8 样品富集培养梯度稀释涂布培养 划线纯化斜面保存 2 0 2 1 /6 /1 6 1 9 样品富集培养梯度稀释涂布培养 划线纯化斜面保存 2 0 2 1 /6 /1 6 2 0 将 接 种 菌 株 的 斜 面 放 入 4 冰 箱 中 保 存 。至 此 ， 已 经 完 成 了 微 生 物 的 初 筛 。 有 关 微生 物 的 更 多 信 息 可 以 用 鉴 别 培 养 基 对 其 进行 复 筛 ， 或 者 运 用 其 他 手 段 对 其 进 行 鉴 别 。 2 0 2 1 /6 /1 6 2 1 谢谢大家 若有不当之处，请指正，谢谢！