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1、慢性阻塞性肺疾病稳定期患者外周血CD8+T细胞自噬水平与数量的相关性分析 摘要】目的探讨慢性阻塞性肺疾病COPD稳定期患者外周血细胞毒性T淋巴细胞CD8+T细胞自噬水平与数量的相关性。方法120例COPD稳定期患者作为观察组，同期120例健康体检者作为对照组，采用流式细胞术计算CD8+T细胞总数，检测CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数和凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链式反应PCR检测LC3、p62基因表达水平;采用蛋白质印迹法检测LC3/、p62蛋白表达水平。比较两组CD8+T细胞总数、CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数、CD8+细胞凋亡率，LC3、p62基因以及LC3
2、/、p62蛋白在CD8+T细胞中的表达;分析LC3/、p62蛋白表达与CD8+T细胞总数、CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数的相关性。结果观察组CD8+T细胞总数32.404.25%、CD8+效应性T细胞数25.628.17%、CD8+记忆性T细胞数22.096.54%均高于对照组的25.944.61%、16.785.49%、7.833.02%，CD8+细胞凋亡率23.526.10%低于对照组的31.365.03%，差异均具有统计学意义P【关键词】慢性阻塞性肺疾病稳定期;外周血CD8+T细胞;自噬水平;数量;相关性2021COPD是常见呼吸系统疾病，也是全球死因排在第三的疾病。本病
3、以反复发作的气道炎症和进行性加重的气流受限为主要特征，病理检查可见气道炎症和破坏性肺气肿【1】。本病的发病机制至今尚未明确，一般认为与有害气体或有害颗粒引起肺组织的异常炎症反应有密切关联，发病的关键可能与自身的免疫系统调节紊乱有关。大量研究证实，COPD发生开展过程中，由巨噬细胞、中性粒细胞、T淋巴细胞等多种炎性细胞共同参与，而肺泡壁的病变程度与肺泡巨噬細胞和T细胞相关【2】。因此，了解T淋巴细胞的作用机制十分必要。CD8+T细胞是关键的淋巴细胞亚群，主要浸润在气道壁、气道平滑肌和支气管黏膜上皮中。有研究显示，COPD患者肺内的LC3/ATG蛋白等自噬体明显上调，提示自噬在COPD中有重要作用
4、【3】。本研究进一步分析COPD稳定期患者外周血CD8+T细胞自噬水平与数量的相关性，现报告如下。1资料与方法2021年5月2021年5月本院收治的120例COPD稳定期患者作为观察组，同期120例健康体检者作为对照组。观察组中男67例，女53例;年龄3678岁，平均年龄56.411.2岁。对照组中男64例，女56例;年龄3379岁，平均年龄56.311.7岁。两组一般资料比照差异无统计学意义，具有可比性P0.05。标准标准观察组均确诊为COPD，现处于稳定期，每月规律在门诊随诊，咳喘病症完全缓解2周。标准排除急性感染、自身免疫性疾病、严重心肝肾疾病、单纯疱疹病毒感染、精神疾病等的患者。方法两
5、组均采集外周静脉血6ml，用流式细胞术计算出CD8+T细胞总数，检测CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数和凋亡率;将CD8+T细胞总数用实时荧光定量PCR检测LC3、p62基因表达水平，用蛋白质印迹法WesternBlot检测LC3/、p62蛋白表达水平;分析LC3/、p62蛋白表达与CD8+T细胞总数、CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数的相关性。方法采用SPSS21.0统计学软件处理数据。计量资料以均数标准差x-s表示，采用t检验;计数资料以率%表示，采用2检验;相关分析采用Pearson相关检验。P2结果2.1两组外周血中CD8+T细胞情况比照观察组CD8+T细胞总数
6、、CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数均高于对照组，CD8+细胞凋亡率低于对照组，差异均具有统计学意义P2.2两组LC3、p62基因以及LC3/、p62蛋白在CD8+T细胞中的表达比照观察组p62基因、自噬蛋白LC3/、p62蛋白表达均高于对照组，差异均具有统计学意义P0.05。见表2。2.3CD8+T细胞与LC3/及p62蛋白表达的相关性分析LC3/蛋白表达与CD8+T细胞总数、CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数均呈正相关r=0.570、0.671、0.736，P3讨论COPD的核心发病机制是慢性气道炎症，CD8+T细胞是COPD稳定期中气道慢性炎症的主要炎症细胞，此时
7、的CD8+T细胞仍处于增长状态。目前，临床对CD8+T细胞增多的机制尚未明确，现主流的观点认为是由病毒感染和自身特异性抗体产生增多所致。近年来，自噬研究显示，自噬能促进CD8+T效应性细胞和CD8+T记忆性细胞的形成和存活，从而增加CD8+T细胞总数4，5。因此，考虑自噬与CD8+T细胞间存在相关性。本研究比照COPD稳定期患者和健康体检者的CD8+T细胞以及细胞自噬水平，分析两者相关性。结果显示：观察组CD8+T细胞总数、CD8+效应性T细胞数、CD8+记忆性T细胞数均高于对照组，CD8+细胞凋亡率低于对照组，差异均具有统计学意义P综上所述，COPD稳定期患者CD8+T细胞数量明显增加，自噬
8、水平明显升高，两者呈正相关，为临床研究COPD发病机制提供了新思路。参考文献【1】陈钢，熊先智.CD8+调节性T细胞在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展.中国免疫学杂志，2021，3011：1567-1573.【2】郝璐，张园.慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞和Foxp3的表达.临床肺科杂志，2021，223：393-398.表达水平的研究.临床和实验医学杂志，2021，175：485-489.表达的影响.中华结核和呼吸杂志，2021，331：33-36.【5】庄虹.慢性阻塞性肺疾病稳定期患者外周血CD8+T细胞自噬水平与数量的相关性研究.遵义医学院，20211：1-57.【6】李世川，张湘燕，廖强，等.CD8+T细胞穿孔素基因启动子区域甲基化状态在慢性阻塞性肺疾病中的作用.中华结核和呼吸杂志，2021，3811：862-864.表达的关系.中华临床医师杂志，2021，356：1554-1560.8孙霞，张志鹏，温煦，等.慢性阻塞性肺病患者外周血单个核细胞自噬与疾病状态的相关性研究.中国医师进修杂志，2021，423：238-244.2021-06-19
慢性阻塞性肺疾病稳定期患者外周血CD8+T细胞自噬水平与数量的相关性分析
